Two sets of primers were used for t

Two sets of primers were used for the detection of HPV. The PCR protocol and primer set (H441F and H441R) described by Phromjai et al. (2002) was expected to yield a product of 441 bp, while the protocol and primer set 1120F and 1120R described by Pantoja & Lightner (2000) was expected to yield a product of 592 bp. For the detection of MBV, the nested PCR primers and protocol described by Belcher &
Young (1998) were employed. A nested PCR protocol (Hossain et al. 2001) was also used for WSSV detection. PCR was carried out in a 30 µl reaction mixture consisting of: 1 × PCR buffer; 5 pmol of each primer for HPV and WSSV, and 10 pmol of each primer for MBV; 50 µM each of dATP, dCTP, dGTP and dTTP; 0.9 U of Taq DNA polymerase; and 2 µl of DNA extract. Total DNA extracted from shrimp showing histopathological changes characteristic of WSSV, MBV and HPV were used as templates for positive controls, and DNA extracted from healthy freshwater fish Labeo rohita was used as the template for the negative control. Amplification was carried out in a thermocycler (M. J. Research). The amplified PCR products were electrophoresed in a 1.2% agarose gel containing 0.5 µg ml–1 ethidium bromide, and visualized with a UVtransilluminator (Gel doc system, Hero Lab).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สองชุดของไพรเมอร์ที่ใช้สำหรับตรวจหาเชื้อ HPV PCR โพรโทคอลและรองพื้นชุด (H441F และ H441R) อธิบายโดย Phromjai et al. (2002) คาดว่าผลผลิตผลิตภัณฑ์ของ 441 bp ในขณะที่โพรโทคอลและรองพื้นตั้งค่า 1120F และ 1120R โดย Pantoja & Lightner (2000) คาดว่าผลผลิตผลิตภัณฑ์ของ 592 bp สำหรับการตรวจจับของ MBV ไพรเมอร์ PCR ซ้อนกัน และโพรโทคอลโดย Belcher &หนุ่ม (1998) ได้นำมาใช้ โพรโทคอซ้อนของ PCR (Hossain et al. 2001) ยังใช้สำหรับตรวจจับ PCR ดำเนินปฏิกิริยา 30 µl ผสมผสานประกอบด้วย: 1 × PCR บัฟเฟอร์ pmol 5 ของแต่ละสีรองพื้นสำหรับมะเร็งปากมดลูกและตรวจ และ 10 pmol ของแต่ละสีรองพื้นสำหรับ MBV ราคาชิ้นละ 50 µM ของ dATP, dCTP, dGTP และ dTTP 0.9 U ของ Taq DNA พอลิเมอเรส และแยก 2 µl ของดีเอ็นเอ รวมดีเอ็นเอที่สกัดจากกุ้งที่แสดงลักษณะการเปลี่ยนแปลง histopathological ตรวจ MBV และ HPV ถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับตัวควบคุมบวก และดีเอ็นเอที่สกัดจากปลาน้ำจืดเพื่อสุขภาพปลา rohita ใช้เป็นแม่แบบสำหรับตัวควบคุมที่เป็นค่าลบ ขยายถูกดำเนินการในเครื่อง thermocycler (วิจัย J. M.) ผลิตภัณฑ์ PCR ขยายถูก electrophoresed ในเจ 1.2% agarose ประกอบด้วยโบรไมด์ ethidium มล. – 1 0.5 µg ดู และ ด้วย UVtransilluminator (เจเอกสารระบบ ฮีโร่แล็บ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สองชุดของไพรเมอร์ถูกนำมาใช้ในการตรวจหาการติดเชื้อ HPV โปรโตคอล PCR และชุดไพรเมอร์ (H441F และ H441R) อธิบายโดย Phromjai et al, (2002) ที่คาดว่าจะให้ผลผลิตสินค้า 441 bp ในขณะที่โปรโตคอลและไพรเมอร์ชุด 1120F และ 1120R อธิบายโดย Pantoja & Lightner (2000) ที่คาดว่าจะให้ผลผลิตผลิตภัณฑ์ของ 592 bp สำหรับการตรวจสอบของ MBV ที่ไพรเมอร์ PCR ที่ซ้อนกันและโปรโตคอลอธิบายโดย Belcher &
Young (1998) ถูกว่าจ้าง ซ้อนกัน PCR Protocol (Hossain et al. 2001) นอกจากนี้ยังใช้ในการตรวจหาตัวแดงดวงขาว PCR ได้ดำเนินการใน 30 ไมโครลิตรปฏิกิริยาส่วนผสมประกอบด้วย: 1 × PCR บัฟเฟอร์; 5 pmol ของแต่ละไพรเมอร์สำหรับการติดเชื้อ HPV และตัวแดงดวงขาวและ 10 pmol ของแต่ละไพรเมอร์สำหรับ MBV; 50 ไมครอนแต่ละ dATP, dCTP, dGTP และ dTTP; 0.9 U ของ Taq DNA Polymerase; และ 2 ไมโครลิตรของสารสกัดดีเอ็นเอ รวมดีเอ็นเอที่สกัดจากกุ้งแสดงการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาลักษณะของตัวแดงดวงขาว, MBV HPV และถูกนำมาใช้เป็นแม่แบบสำหรับการควบคุมบวกและดีเอ็นเอที่สกัดจากปลาน้ำจืดที่มีสุขภาพดี Labeo rohita ถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับการควบคุมเชิงลบ ขยายได้ดำเนินการใน thermocycler A (MJ) การวิจัย ผลิตภัณฑ์ PCR ขยายถูก electrophoresed ในเจล agarose 1.2% ที่มี 0.5 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร-1 ethidium bromide และมองเห็นด้วย UVtransilluminator (ระบบเจล DOC, ฮีโร่แล็บ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สองชุดของดีเอ็นเอถูกใช้เพื่อตรวจหา HPV . pcr โปรโตคอลและไพรเมอร์ชุด ( และ h441f h441r ) อธิบายโดย phromjai et al . ( 2002 ) คาดว่าผลผลิตสินค้า 441 คู่เบส ในขณะที่โปรโตคอลและไพรเมอร์ 1120f ชุดและ 1120r อธิบายโดย pantoja & ไลท์เนอร์ ( 2000 ) คาดว่าผลผลิตผลิตภัณฑ์ของคุณบีพี ตรวจหาเชื้อ MBV , PCR ไพรเมอร์ที่ซ้อนกันและอธิบายโดยเบลเชอร์ & โปรโตคอลเด็ก ( 2541 ) งาน เป็นแบบซ้อนกันโดยโปรโตคอล ( Hossain et al . 2001 ) ยังใช้สำหรับการตรวจจับี . ซึ่งดำเนินการใน 30 µ L ปฏิกิริยาผสมประกอบด้วย : บัฟเฟอร์ PCR 1 × 5 pmol แต่ละ primer สำหรับ HPV และี และ 10 pmol แต่ละ primer สำหรับ MBV 50 µ M แต่ละ datp dctp dgtp , และ , dttp ; 0.9 U ของดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ทัค และ 2 µลิตร สกัด ดีเอ็นเอ ดีเอ็นเอทั้งหมดสกัดจากกุ้งแสดงการศึกษาการเปลี่ยนแปลงลักษณะของเชื้อ MBV ีและ , ใช้เป็นแม่แบบสำหรับการควบคุมที่ดี และดีเอ็นเอที่สกัดจากปลามีสุขภาพดีสมัยจาโคเบียน rohita ถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับควบคุมลบ การเพิ่มปริมาณได้ทำการศึกษาในเทอมอไซเคล ์ ( เอ็มเจ วิจัย ) การขยาย PCR ผลิตภัณฑ์ electrophoresed ใน 1.2 % เจลที่มี 0.5 กรัมต่อ 1 คู่ ) µโบรไมด์ และมองเห็นกับ uvtransilluminator ( ระบบห้องปฏิบัติการพระเอกหมอเจล )