The formation of zeaxanthin (Zea) f

The formation of zeaxanthin (Zea) from violaxanthin (Vio) in chloroplasts of leaves and algae upon strong illumination is currently suggested to play a role in the photoprotection of plants. Properties and location of the enzyme Vio de-epoxidase, which is responsible for the transformation of Vio to Zea, were studied using thylakoid membrane vesicles isolated from leaves of Spinacia oleracea L. Without using detergents a repeated freeze-thaw treatment of thylakoid vesicles was sufficient to release the enzyme into the medium. With the same procedure the mobile electron carrier plastocyanin, known to occur in the thylakoid lumen, was also released. The enzyme was demonstrated by its activity in the supernatant of the pelleted thylakoid vesicles in the presence of the added substrates Vio and ascorbic acid, as well as by staining of the released proteins after polyacrylamide gel electrophoresis. The release of the deepoxidase from the vesicles was pH-dependent, declined below pH 6.5 and ceased in the pH range around 5, which corresponds to the pH optimum of the enzyme activity. By using thylakoid vesicles isolated from pre-illuminated and therefore Zea-containing leaves the release by freeze-thaw cycles of both the de-epoxidase and plastocyanin was diminished compared with the dark control. However, the reason for this effect was not the Zea content but an unknown effect of the illumination on the thylakoid membrane properties. The de-epoxidase collected at pH 7 was able to re-bind to thylakoid membranes at pH 5.5 and to transform intrinsic Vio to Zea in the presence of ascorbate. The isolated de-epoxidase, as well as the endogenous membrane-bound de-epoxidase, was inhibited by dithiothreitol. From these results it is concluded that Vio de-epoxidase, like plastocyanin, is mobile within the thylakoid lumen at neutral pH values which occur under in-vivo conditions in the dark. However, upon strong illumination, when the lumen pH drops (pH < 6.5) due to the formation of a proton gradient, the properties of the de-epoxidase are altered and the enzyme becomes tightly bound to the membrane (in contrast to plastocyanin) thus gaining access to its substrate Vio. These findings corroborate the assumption of a transmembrane opposite location of the two enzymes of the xanthophyll cycle, the ascorbate-dependent Vio deepoxidase at the lumenal side and the NADPH-dependent Zea epoxidase at the stromal side. Indications in favour of a location of Vio within the lipid bilayer of the thylakoid membrane and of a binding of the active deepoxidase to these areas are discussed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การก่อตัวของ zeaxanthin (ซี) จาก violaxanthin (ถึงความ) ใน chloroplasts ใบไม้และสาหร่ายตามรัศมีที่แข็งแรงในขณะนี้ได้รับการแนะนำบทบาทใน photoprotection ของพืช คุณสมบัติและตำแหน่งที่ตั้งของเอนไซม์ถึงความเดอ-epoxidase ซึ่งเป็นการรับผิดชอบสำหรับการเปลี่ยนแปลงของถึงความซี ได้ศึกษาใช้อสุจิเมมเบรนของ thylakoid โดดเดี่ยวของการตื่นสาย Spinacia L. รักษาซ้ำหยุด-thaw ของอสุจิ thylakoid ก็ไม่เพียงพอที่จะปล่อยเอ็นไซม์ที่เป็นสื่อโดยไม่ต้องใช้ผงซักฟอก ด้วยกระบวนการเดียวกัน plastocyanin ของผู้ขนส่งอิเล็กตรอนเคลื่อน อาจเกิดขึ้นได้ใน thylakoid lumen ยังออก เอนไซม์นี้ถูกแสดง โดยเป็นกิจกรรมใน supernatant pelleted thylakoid อสุจิในต่อหน้าของพื้นผิวเพิ่มถึงความและกรดแอสคอร์บิค เป็นการย้อมสีของโปรตีนที่นำออกใช้หลังจากเจล polyacrylamide electrophoresis ปล่อยของ deepoxidase จากอสุจิมี pH ขึ้นอยู่กับ ปฏิเสธด้านล่าง pH 6.5 และหยุดลงในช่วง pH ประมาณ 5 ซึ่งสอดคล้องกับเหมาะสม pH ของเอนไซม์ที่ โดย thylakoid อสุจิที่แยกต่างหากจากใบก่อนสว่าง และดังนั้นซีประกอบด้วยออก โดยรอบแช่แข็ง-thaw de epoxidase และ plastocyanin ถูกลดลงเมื่อเทียบกับตัวควบคุมเข้ม อย่างไรก็ตาม เหตุผลสำหรับลักษณะพิเศษนี้ไม่เนื้อหาซีแต่ผลของรัศมีในคุณสมบัติเมมเบรนของ thylakoid ไม่ทราบ Epoxidase เดอที่เก็บที่ pH 7 ก็สามารถผูกใหม่กับเยื่อหุ้ม thylakoid ที่ pH 5.5 และแปลงถึงความ intrinsic กับซีในต่อหน้าของ ascorbate แยกเดอ epoxidase เป็นเดเมมเบรนแบบผูก endogenous-epoxidase ถูกห้าม โดย dithiothreitol จากผลลัพธ์เหล่านี้ ก็จะสรุปว่า ถึงความเดอ-epoxidase เช่น plastocyanin โทรศัพท์มือถือภายใน lumen thylakoid ที่ค่า pH เป็นกลางซึ่งเกิดขึ้นภายใต้เงื่อนไขใน vivo ในมืด อย่างไรก็ตาม เมื่อแข็งแรงแสงสว่าง lumen pH หยด (pH < 6.5) เนื่องจากการก่อตัวของโปรตอนไล่ มีการเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติของ epoxidase เดอ กเอนไซม์นี้จะถูกผูกไว้กับเยื่อ (ตรงข้าม plastocyanin) จึง สามารถเข้าถึงความเป็นพื้นผิวแน่น ผลการวิจัยเหล่านี้ corroborate อัสสัมชัญของ transmembrane ตรงข้ามของเอนไซม์สองรอบ xanthophyll, deepoxidase ถึงความ ascorbate-ขึ้นอยู่กับทางด้าน lumenal และ epoxidase ขึ้นอยู่กับการ NADPH ซีด้าน stromal บ่งชี้ลงตำแหน่งของถึงความภายใน bilayer กระบวนการเมมเบรนของ thylakoid และผูกของ deepoxidase ใช้พื้นที่เหล่านี้จะกล่าวถึง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การก่อตัวของซีแซนทีน (ซี) จาก violaxanthin (Vio) ในคลอโรพลาของใบและสาหร่ายเมื่อส่องสว่างที่แข็งแกร่งเป็นข้อเสนอแนะในปัจจุบันมีบทบาทในการ photoprotection ของพืช คุณสมบัติและสถานที่ตั้งของเอนไซม์ Vio de-epoxidase ซึ่งเป็นผู้รับผิดชอบสำหรับการเปลี่ยนแปลงของ Vio Zea เพื่อการศึกษาโดยใช้ถุงเยื่อ thylakoid ที่แยกได้จากใบของ Spinacia oleracea ลิตรโดยไม่ต้องใช้ผงซักฟอกซ้ำรักษาแช่แข็งละลายถุง thylakoid เพียงพอ ที่จะปล่อยเอนไซม์เข้าไปกลาง ด้วยขั้นตอนเดียวกันผู้ให้บริการโทรศัพท์มือถือ plastocyanin อิเล็กตรอนที่รู้จักกันที่จะเกิดขึ้นในลูเมน thylakoid ก็ปล่อย เอนไซม์ที่ได้รับการแสดงให้เห็นถึงกิจกรรมในสารละลายของเม็ดถุง thylakoid ในการปรากฏตัวของพื้นผิวเพิ่ม Vio และวิตามินซีเช่นเดียวกับการย้อมสีของโปรตีนการปล่อยตัวหลังจาก polyacrylamide ข่าวคราว การเปิดตัวของ deepoxidase จากถุงก็ขึ้นอยู่กับค่า pH ลดลงด้านล่างค่า pH 6.5 และหยุดอยู่ในช่วงพีเอชประมาณ 5 ซึ่งสอดคล้องกับค่า pH ที่เหมาะสมของกิจกรรมเอนไซม์ โดยการใช้ถุง thylakoid ที่แยกได้จากก่อนสว่างและดังนั้นจึงซีที่มีการเปิดตัวออกโดยรอบแช่แข็งละลายของทั้งสอง de-epoxidase และ plastocyanin ได้ลดลงเมื่อเทียบกับการควบคุมความมืด แต่เหตุผลที่ผลกระทบนี้ไม่ได้เป็นเนื้อหา Zea แต่ผลของการส่องสว่างที่ไม่รู้จักในคุณสมบัติ thylakoid เมมเบรน เด-epoxidase เก็บที่พีเอช 7 ก็สามารถที่จะกลับมาผูกไว้กับเยื่อ thylakoid ที่ pH 5.5 และจะเปลี่ยน Vio ธรรม Zea ในการปรากฏตัวของ ascorbate ที่แยก de-epoxidase เช่นเดียวกับเมมเบรนที่ถูกผูกไว้ภายนอก de-epoxidase ถูกยับยั้งโดย dithiothreitol จากผลเหล่านี้สรุปได้ว่า Vio de-epoxidase เช่น plastocyanin เป็นโทรศัพท์มือถือภายในลูเมน thylakoid ที่ค่า pH เป็นกลางซึ่งเกิดขึ้นภายใต้ร่างกายในสภาพในที่มืด แต่เมื่อส่องสว่างที่แข็งแกร่งเมื่อลดลงค่า pH ลูเมน (pH <6.5) เนื่องจากการก่อตัวของโปรตอนลาดที่คุณสมบัติของ de-epoxidase ที่มีการเปลี่ยนแปลงและเอนไซม์ที่จะกลายเป็นที่ถูกผูกไว้อย่างแน่นหนากับเมมเบรน (ตรงกันข้ามกับ plastocyanin) จึง การเข้าถึงพื้นผิวของ Vio การค้นพบนี้ยืนยันข้อสันนิษฐานของสถ​​านที่ตรงข้ามรนของทั้งสองเอนไซม์ของว​​งจรแซนโทฟิที่ ascorbate ขึ้นอยู่กับ Vio deepoxidase ที่ด้าน lumenal และ NADPH ขึ้นอยู่กับ Zea epoxidase ด้านข้าง stromal ตัวชี้วัดในการสนับสนุนของสถ​​านที่ตั้งของ Vio ภายในไขมัน bilayer ของเยื่อ thylakoid และมีผลผูกพันของ deepoxidase ใช้งานไปยังพื้นที่เหล่านี้จะกล่าวถึง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การก่อตัวของซีแซนทีน ( ซี ) จากไวโอลาแซนทิน ( วีโอ ) ในคลอโรพลาสต์ของใบไม้ และสาหร่าย เมื่อแสงที่แข็งแกร่งในปัจจุบันควรมีบทบาทใน photoprotection ของพืช คุณสมบัติและตำแหน่งของเอนไซม์วีโอ เดอ epoxidase ซึ่งเป็นผู้รับผิดชอบสำหรับการเปลี่ยนแปลงของวีโอ กับ ซี ได้ศึกษาการใช้เยื่อไทลาคอยด์เล็กที่แยกได้จากใบของ spinacia oleracea L .โดยไม่ต้องใช้ผงซักฟอกละลายซ้ำการไทลาคอยด์เล็กเพียงพอที่จะปล่อยเอนไซม์ในอาหาร . ด้วยขั้นตอนเดียวกัน ผู้ให้บริการโทรศัพท์มือถืออิเล็กตรอนพลาสโทไซยานิน ที่รู้จักกันจะเกิดขึ้นภายในไทลาคอยด์ ถูกปล่อยออกมาเอนไซม์ คือ แสดง โดย กิจกรรม ใน น่านของไทลาคอยด์เม็ดเล็กต่อหน้าเพิ่มพื้นผิว วีโอ และกรดแอสคอร์บิก โดยการย้อมสีของตัวโปรตีนหลังจาก polyacrylamide gel electrophoresis การเปิดตัวของ deepoxidase จากเล็กคือ pH ขึ้นอยู่กับลดลงต่ำกว่าพีเอช 6.5 และหยุดในช่วง pH ประมาณ 5ซึ่งสอดคล้องกับค่า pH ที่เหมาะสมของกิจกรรมของเอนไซม์ . โดยใช้ไทลาคอยด์เล็กแยกจากก่อนสว่าง และดังนั้นจึง ซี ที่มีใบปล่อยโดยเกิดวงจรของทั้ง เดอ epoxidase พลาสโทไซยานินและลดลงเมื่อเทียบกับการควบคุมเข้ม อย่างไรก็ตามเหตุผลที่ผลนี้ก็ไม่ใช่ซี เนื้อหา แต่ไม่ทราบผลของไฟส่องสว่างบนคุณสมบัติเยื่อไทลาคอยด์ . การ epoxidase de เก็บที่ pH 7 สามารถจะผูกกับเยื่อหุ้มไทลาคอยด์ที่ pH 5.5 และการเปลี่ยนแปลงภายใน วีโอ กับซี ในสถานะของการเปลี่ยนแปลง . แยก เดอ epoxidase เช่นเดียวกับภายนอกมี epoxidase de ,ถูกยับยั้งโดยบัตรแข็ง . จากผลที่สรุปได้ว่า ไวโอ เดอ epoxidase เหมือนพลาสโทไซยานิน เป็นมือถือภายในไทลาคอยด์ที่ pH เป็นกลาง ค่าลูเมนซึ่งเกิดขึ้นภายใต้เงื่อนไขปี 2544 ในที่มืด อย่างไรก็ตาม เมื่อรัศมีแข็งแรง เมื่อ pH ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ ( pH < 6.5 ) เนื่องจากการก่อตัวของโปรตอนลาด ,คุณสมบัติของ epoxidase de มีการเปลี่ยนแปลงและเอนไซม์จะแน่นผูกติดกับเยื่อ ( ในทางตรงกันข้ามกับพลาสโตไซยานิน ) ดังนั้นการเข้าถึงของพื้นผิววีโอ้ . ผลการศึกษายืนยันสมมติฐานของยาวตรงข้ามกับที่ตั้งของเอนไซม์ทั้งสองรอบไตของ ,การเปลี่ยนแปลงขึ้นอยู่กับวีโอ deepoxidase ที่ด้านข้าง lumenal และ nadph ขึ้นอยู่กับซี epoxidase ที่ด้านข้าง stromal . ข้อบ่งชี้ในความโปรดปรานของตำแหน่งของวีโอภายใน bilayer ไขมันของเยื่อไทลาคอยด์ และเซลล์ของ deepoxidase งานพื้นที่เหล่านี้ได้ถูก