Cell Culture Bone marrow-derived mast cells (BMMCs)
were obtained by culturing bone marrow cells from
10–15-week-old BALB/c mice (Japan SLC, Shizuoka, Japan)
in Dulbecco’s modified Eagle’s medium supplemented with
10% fetal calf serum (FCS) (Roche, Mannheim, Germany),
0.1mM non-essential amino acids, 100U/mL penicillin,
100µg/mL streptomycin, 10ng/mL recombinant murine IL-3
(Peprotech, London, U.K.), and 2 ng/mL recombinant murine
stem cell factor (Peprotech).
15) After 4 weeks of culture,
>95% of the viable cells were confirmed to be mast cells,
as assessed by acidic toluidine blue staining. BALB/c mice
were housed under standard conditions and in compliance
with Aichi Gakuin University guidelines for the use of experimental
animals, and all animal experiments were performed
after approval by the Animal Care and Use Committee of
Aichi Gakuin University. A rat mast cell line, RBL-2H3,
was cultured in minimum essential medium (Nissui, Tokyo,
Japan) supplemented with 10% FCS. Mouse anti-dinitrophenyl
(DNP) IgE (IgE-53-569) was originally provided by Prof. T.
Kishimoto (Osaka University). DNP-conjugated bovine serum
albumin (DNP-BSA) was prepared using methods described
previously.
16) In our present experiments, six DNP groups, on
average, were conjugated with a single BSA molecule.
Kefiran “Rice kefiran,” which was a gift from Daiwa
Regular Article
*To whom correspondence should be addressed. e-mail: furuno@dpc.agu.ac.jp
February 2012 1
การเพาะเลี้ยงเซลล์ไขกระดูกที่ได้มาจากเซลล์ (BMMCs)
ที่ได้จากการเพาะเลี้ยงเซลล์ไขกระดูกกระดูก
10-15 สัปดาห์อายุ Balb / C หนู (ญี่ปุ่น SLC ชิสึโอกะญี่ปุ่น)
ในการปรับเปลี่ยนขนาดกลางอินทรี Dulbecco ของการเสริมด้วย
10% ซีรั่มของทารกในครรภ์ลูกวัว (FCS) (Roche, Mannheim, เยอรมนี),
0.1mm กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น 100U / mL penicillin,
100μg / mL streptomycin, 10ng / mL recombinant หมา IL-3
(Peprotech ลอนดอนสหราชอาณาจักร) และ 2 ng / recombinant หมา
ปัจจัยเซลล์ต้นกำเนิด (Peprotech).
15) หลังจาก 4 สัปดาห์ของวัฒนธรรม
> 95% ของเซลล์ที่มีชีวิตได้รับการยืนยันที่จะเป็นเซลล์เสา
ที่ประเมินโดย toluidine เป็นกรดย้อมสีฟ้า หนู Balb / C
ได้ตั้งอยู่ภายใต้เงื่อนไขมาตรฐานและสอดคล้อง
กับแนวทาง Aichi Gakuin มหาวิทยาลัยสำหรับการใช้งานของการทดลอง
สัตว์และสัตว์ทดลองได้ดำเนินการ
หลังจากได้รับอนุมัติโดยดูแลและการใช้สัตว์ของคณะกรรมการ
ไอจิ Gakuin มหาวิทยาลัย หนูสายพันธุ์ของเซลล์เสา RBL-2H3,
ได้รับการเพาะเลี้ยงในอาหารที่จำเป็นขั้นต่ำ (Nissui โตเกียว
ญี่ปุ่น) เสริมด้วย 10% FCS เมาส์ป้องกัน dinitrophenyl
(DNP) IgE (IgE-53-569) ได้รับการสร้างสรรค์ให้โดยศต
Kishimoto (มหาวิทยาลัยโอซาก้า) DNP-ผันวัวซีรั่ม
อัลบูมิ (DNP-BSA) ถูกจัดทำวิธีการใช้อธิบายไว้
ก่อนหน้านี้.
16) ในการทดลองในปัจจุบันของเราหกกลุ่ม DNP บน
เฉลี่ยถูกผันกับบีเอสเอโมเลกุลเดียว.
คีเฟอรัน "คีเฟอรันข้าว" ซึ่งเป็นของขวัญ จาก Daiwa
ปกติบทความ
* ผู้ที่ควรได้รับจดหมายที่จ่าหน้า E-mail: furuno@dpc.agu.ac.jp
กุมภาพันธ์ 2012 1
การแปล กรุณารอสักครู่..
