Low cell competency for regeneration and transformation is the main cause of so-called recalcitrance to transform a species or a
genotype. A research was conducted to determine the optimum conditions for in vitro plant regeneration involving organogenesis in
Citrus aurantium, which is an important rootstock worldwide. Seeds with peeled teguments were germinated in vitro, either kept in dark
for 6 weeks or maintained in the absolute dark for 4 weeks followed by 10 days in 16-h photoperiod (56 µmol m-2
s
-1
) at 27 ± 2°C.
Epicotyl-originated explants were cultured in MS medium supplemented with 6-benzylaminopurine (BAP) (0, 1, 2 and 3 mg L-1
) and
Naphthaleneacetic acid (NAA) (0, 0.05, 0.1 and 0.2 mg L-1
) to induce organogenesis. Effects of Pre-culture in liquid MS medium (0, 1
and 2 days) on the number of responsive explants (RE) have been also evaluated. In the next step, explants having buds were transferred
to MS medium containing Gibberellic Acid (GA3
) (0, 0.5 and 1 mg L-1
) and the size and number of shoots, which have been produced by
RE are then measured. The highest percentage of responsive explants (90%) obtained by using 2.5 mg L
-1 BAP in combination with the
0.05 mg L
-1 NAA which had 2 days pre-culture period of epicotyls for allowing to grow in the absolute darkness for 4 weeks, followed by
10 days in 16-h photoperiod (56 µmol m-2
s
-1
). The highest number of well-developed shoots was 4.2 shoots per explant and obtained with
medium containing 0.5 mg L-1 GA3
. These protocols are suitable in association with Citrus aurantium Agrobacterium-mediated genetic
transformation.
ความสามารถต่ำเซลล์สำหรับการฟื้นฟูและการแปลงเป็น recalcitrance เรียกว่าสาเหตุหลักในการแปลงชนิดหรือลักษณะทางพันธุกรรม วิจัยได้ดำเนินการเพื่อกำหนดเงื่อนไขเหมาะสมสำหรับการฟื้นฟูในพืชเกี่ยวข้องกับการเกิดของอวัยวะในส้ม aurantium, rootstock สำคัญทั่วโลกซึ่ง เมล็ดกับ peeled teguments ถูกเปลือกงอกเพาะเลี้ยง การเก็บไว้ในความมืด6 สัปดาห์ หรือยังคงอยู่ในมืดแบบสัมบูรณ์สำหรับ 4 สัปดาห์ตาม ด้วย 10 วันในช่วงแสง 16-h (56 µmol m-2s-1) ที่ 27 ± 2 องศาเซลเซียสเป็นต้นกำเนิดของ epicotyl explants มีอ่างใน MS เสริม ด้วย 6-benzylaminopurine (BAP) (0, 1, 2 และ 3 mg L-1) และกรด Naphthaleneacetic (NAA) (0, 0.05, 0.1 และ 0.2 mg L-1) เพื่อก่อให้เกิดการเกิดของอวัยวะ ลักษณะพิเศษของวัฒนธรรมก่อนในเหลว MS (0, 1และ วันที่ 2) จำนวนตอบสนอง explants (RE) ได้แล้วยังประเมิน ในขั้นตอนต่อไป explants มีอาหารมีการถ่ายโอนการ MS ปานกลางมีกแอ (GA3) (0, 0.5 และ 1 มิลลิกรัม L 1) และขนาดและจำนวนของการถ่ายภาพ ซึ่งมีการผลิตโดยแล้วมีวัดใหม่ เปอร์เซ็นต์สูงสุดของตอบสนอง explants (90%) รับโดย 2.5 mg L-BAP 1 ร่วมกับการ0.05 mg L-NAA 1 ซึ่งมีวัฒนธรรมก่อนรอบระยะเวลาของ epicotyls สำหรับช่วยในการเติบโตในที่มืดแบบสัมบูรณ์สำหรับ 4 สัปดาห์ 2 วัน ตามด้วย10 วันในช่วงแสง 16-h (56 µmol m-2s-1). จำนวนสูงสุดที่ถ่ายภาพพัฒนาห้องพักถูกถ่ายภาพ 4.2 ต่อ explant และรับด้วยสื่อที่ประกอบด้วย 0.5 มิลลิกรัม GA3 L-1. โพรโทคอเหล่านี้เหมาะกับส้ม aurantium mediated อโกรแบคทีเรียมทางพันธุกรรมการเปลี่ยนแปลง
การแปล กรุณารอสักครู่..
ความสามารถของเซลล์ต่ำสำหรับการฟื้นฟูและการเปลี่ยนแปลงเป็นสาเหตุหลักของการดื้อรั้นที่เรียกว่าจะเปลี่ยนเป็นสายพันธุ์หรือจีโนไทป์ การวิจัยได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการฟื้นฟูโรงงานในหลอดทดลองที่เกี่ยวข้องกับอวัยวะใน
Citrus aurantium ซึ่งเป็นต้นตอสำคัญทั่วโลก เมล็ดพันธุ์พืชที่มี teguments
ถูกปอกเปลือกงอกในหลอดทดลองทั้งเก็บไว้ในที่มืดเป็นเวลา6 สัปดาห์หรือคงไว้ในที่มืดแน่นอนเป็นเวลา 4 สัปดาห์ตามด้วย 10 วันในช่วงแสง 16 ชั่วโมง (56 ไมโครโมลของ m-2
s
-1) วันที่ 27 ± 2 องศาเซลเซียส . ชิ้น Epicotyl-ต้นตอมาเพาะเลี้ยงใน MS เสริมขนาดกลางที่มี 6 benzylaminopurine (BAP) (0, 1, 2 และ 3 มก. L-1) และกรดแนปธาลี (NAA) (0, 0.05, 0.1 และ 0.2 มก. L-1) ที่จะทำให้เกิดอวัยวะ ผลกระทบของวัฒนธรรม Pre-ในของเหลวสูตร MS (0, 1 และ 2 วัน) กับจำนวนของชิ้นส่วนที่ตอบสนอง (RE) ได้รับการประเมิน ในขั้นตอนต่อไปชิ้นมีตามีการถ่ายโอนไปยัง MS ขนาดกลางที่มี Gibberellic Acid (GA3) (0, 0.5 และ 1 มิลลิกรัม L-1) และขนาดและจำนวนของหน่อซึ่งได้รับการผลิตโดยRE วัดแล้ว เปอร์เซ็นต์สูงสุดของชิ้นส่วนการตอบสนอง (90%) ได้รับโดยใช้ 2.5 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 BAP ร่วมกับ0.05 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 NAA ซึ่งมี 2 วันช่วงก่อนวัฒนธรรมของ epicotyls เพื่อให้เติบโตในความมืดแน่นอนเป็นเวลา 4 สัปดาห์ ตามด้วย10 วันในช่วงแสง 16 ชั่วโมง (56 ไมโครโมลของ m-2 s -1) จำนวนสูงสุดของยอดการพัฒนาที่ดีเป็น 4.2 ยอดต่อชิ้นและได้รับการที่มีขนาดกลางที่มี0.5 มิลลิกรัม L-1 GA3 โปรโตคอลเหล่านี้เหมาะในการเชื่อมโยงกับ Citrus aurantium พันธุกรรม Agrobacterium พึ่งการเปลี่ยนแปลง
การแปล กรุณารอสักครู่..