Positive first round ORF24 and ORF2

Positive first round ORF24 and ORF25 PCR products were purified with a DNA Gel Extraction Kit (Dongsheng Biotech,Guangzhou, China) and inserted in a pGEM-T vector (Promega).
After sequencing verification (Shanghai Majorbio Bio-Pharm Technology,Shanghai, China) and quantification by Nanodrop 2000 spectrophotometer, the reconstruction vector was used as a standard reference for sensitivity assay. A 10-fold serial water dilution of positive vector was used as a template for the nested PCR assay described in Section 2.4. The dilution gradients of ORF24 were from 5.6 × 108 to 0.56 virus copies, and gradients of ORF25 were from 1.1 × 109 to 1.1 virus copies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บวก ORF24 รอบแรกและผลิตภัณฑ์ ORF25 PCR บริสุทธิ์กับดีเอ็นเอเจลสกัด Kit (ตงเฉิงไบโอเทค, กว่างโจว, จีน) และแทรกอยู่ในเวกเตอร์ pGEM-T (Promega).
หลังจากการตรวจสอบลำดับ (Shanghai Majorbio Bio-Pharm เทคโนโลยี, เซี่ยงไฮ้, ประเทศจีน ) และการหาปริมาณโดย Nanodrop 2000 spectrophotometer เวกเตอร์ฟื้นฟูถูกนำมาใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงมาตรฐานสำหรับการทดสอบความไว เจือจางน้ำอนุกรม 10 เท่าของเวกเตอร์บวกถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับการทดสอบ PCR ที่ซ้อนกันที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.4 ไล่ระดับสีลดสัดส่วนของ ORF24 จาก 5.6 × 108-0.56 สำเนาไวรัสและการไล่ระดับสีของ ORF25 จาก 1.1 × 109-1.1 สำเนาไวรัส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บวกรอบแรก orf24 orf25 ผลิตภัณฑ์ PCR และมีความบริสุทธิ์ ด้วยการสกัดดีเอ็นเอเจลชุด ( Dongsheng Biotech , กว่างโจว , จีน ) และแทรกอยู่ใน pgem-t เวกเตอร์ ( promega ) .
หลังจากการตรวจสอบ ( เทคโนโลยีไบโอ majorbio Pharm เซี่ยงไฮ้เซี่ยงไฮ้ , จีน ) และปริมาณ โดย nanodrop 2000 Spectrophotometer , การฟื้นฟูเวกเตอร์ที่ใช้เป็นอ้างอิง มาตรฐานสำหรับความไวของการทดสอบ10 พับต่อเนื่องน้ำเจือจางเวกเตอร์บวกถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับซ้อน PCR assay ที่อธิบายไว้ในส่วน 2.4 . การไล่สีของ orf24 จาก 5.6 × 108 ถึง 0.56 ไวรัสสำเนา และไล่ของ orf25 จาก 1.1 × 109 เพื่อสำเนาสำหรับไวรัส