Thirty female guinea fowls were pla

Thirty female guinea fowls were placed in individual cages (conditions were similar to those used for the males). The two best freezing methods (based on in vitro assessment of frozen-thawed sperm) were tested with artificial insemination (as an in vivo qualification method). Ten females (controls) were inseminated with fresh, diluted semen, whereas the remaining 20 were inseminated with frozen/thawed semen from slow and pellet method (10 birds per protocol). Artificial insemination was done within 10 minutes after thawing thrice weekly for 3 weeks using 250–300 million spermatozoa/hen/AI. The fertility of 300 incubated eggs was checked by candling at the 10th day of incubation. The rate of the true fertility (normal and dead embryos) was determined. Embryos that had died in the oviduct were detected by propidium iodide staining of the germinal disc. Egg yolks were separated from the albumen and placed into 0.9% NaCl solution. After visual fertility examination germinal discs seeming to be infertile were removed from the vitelline membrane, put into 0.9% NaCl solution and stained on a slide with propidium iodide (PI; P4170, Sigma-Aldrich Ltd, Budapest, Hungary). In case of fertile egg, propidium iodide (DNA-specific fluorescent dye of red color) stains the nucleus of the dividing embryonic cells which appear in lighting points [21].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นกหญิงสามสิบถูกวางไว้ในแต่ละกรง (เงื่อนไขก็เหมือนกับที่ใช้สำหรับเพศชาย) สองวิธีการแช่แข็งที่ดีที่สุด (ตามการประเมินเตรียมแช่แข็งตัวอสุจิในหลอดทดลอง) ที่ทดสอบกับเทียม (เป็นวิธีการคุณสมบัติในร่างกาย) หญิงสิบ (ควบคุม) ได้มีชู้กับสด เจือจางน้ำเชื้อ ในขณะ 20 ที่เหลือก็มีชู้ ด้วยน้ำเชื้อแช่แข็ง/เตรียมจากช้าและเม็ดวิธี (10 นกต่อโพรโทคอล) เทียมทำภายใน 10 นาทีหลังจากละลายสามครั้งต่อสัปดาห์ 3 สัปดาห์ใช้ 250 – 300 ล้านตัวอสุจิ/ไก่/ไอ พันธุ์ของรับการกกไข่ถูกตรวจสอบ โดย candling ที่วัน 10 ของการกกไข่ พิจารณาอัตราการเจริญพันธุ์แท้ (ตัวอ่อนปกติ และตาย) ตรวจพบตัวอ่อนที่เสียชีวิตใน oviduct propidium ไอโอไดด์เปรอะเปื้อนของดิสก์ germinal ไข่แดงแยกออกจากการ albumen และวางเป็น 0.9% NaCl โซลูชัน หลังจากตรวจสอบภาพความอุดมสมบูรณ์ germinal ดิสก์ด้วยจะมีบุตรยากถูกลบออกจากเยื่อ vitelline ใส่ลงในโซลูชัน 0.9% NaCl และย้อมสีบนภาพนิ่งกับไอโอไดด์ propidium (PI P4170, Ltd Sigma Aldrich บูดาเปสต์ ฮังการี) ในกรณีที่ไข่ ไอโอไดด์ propidium (เฉพาะดีเอ็นเอเรืองแสงย้อมสีแดง) คราบนิวเคลียสของเซลล์ตัวอ่อนแบ่งซึ่งปรากฏในไฟจุด [21]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สามสิบนกตะเภาเพศหญิงถูกวางไว้ในกรงของแต่ละบุคคล (ตามเงื่อนไขที่คล้ายกับที่ใช้สำหรับเพศชาย) ทั้งสองที่ดีที่สุดวิธีการแช่แข็ง (จากการประเมินผลในหลอดทดลองของตัวอสุจิแช่แข็งละลาย) ได้รับการทดสอบด้วยการผสมเทียม (เป็นวิธีการคุณสมบัติในร่างกาย) สิบหญิง (ควบคุม) ได้รับการผสมเทียมสดน้ำอสุจิเจือจางในขณะที่เหลืออีก 20 ได้รับการผสมเทียมกับแช่แข็ง / น้ำอสุจิละลายจากวิธีช้าและเม็ด (10 นกต่อ Protocol) การผสมเทียมได้กระทำภายใน 10 นาทีหลังจากที่ละลายสามครั้งทุกสัปดาห์เป็นเวลา 3 สัปดาห์โดยใช้ 250-300000000 อสุจิ / ไก่ / เอไอ อุดมสมบูรณ์ 300 ฟักไข่ได้รับการตรวจสอบโดย candling ในวันที่ 10 ของการบ่ม อัตราของความอุดมสมบูรณ์ที่แท้จริง (ตัวอ่อนปกติและตาย) ถูกกำหนด ตัวอ่อนที่เสียชีวิตในท่อนำไข่ที่ถูกตรวจพบโดยการย้อมสี propidium ไอโอไดด์ของแผ่นดิสก์เชื้อโรค ไข่แดงถูกแยกออกจากไข่ขาวและวางลง 0.9% วิธีการแก้ปัญหาโซเดียมคลอไรด์ หลังจากการตรวจสอบความอุดมสมบูรณ์ของภาพแผ่นเชื้อโรคดูเหมือนจะเป็นที่มีบุตรยากที่ถูกถอดออกจากเมมเบรน vitelline ที่ใส่ลงไป 0.9% NaCl วิธีการแก้ปัญหาและการย้อมสีบนภาพนิ่งกับ propidium ไอโอไดด์ A (PI; P4170, Sigma-Aldrich Ltd, บูดาเปสต์, ฮังการี) ในกรณีของไข่อุดมสมบูรณ์ propidium ไอโอไดด์ (DNA เฉพาะสีย้อมเรืองแสงสีแดง) คราบนิวเคลียสของการแบ่งเซลล์ตัวอ่อนซึ่งปรากฏอยู่ในจุดแสงสว่าง [21]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

30 หญิงไก่ต๊อกถูกวางไว้ในกรงแต่ละ ( เงื่อนไขคือคล้ายกับที่ใช้สำหรับผู้ชาย ) สองที่ดีที่สุดวิธีการแช่แข็ง ( ตามการประเมินของอสุจิแช่แข็งที่ละลายแล้ว ในการทำการทดสอบด้วยการผสมเทียม ( เป็นวิธีคุณสมบัติ vivo ) หญิงสิบ ( การควบคุม ) ทำการผสมเทียมด้วยน้ำเชื้อสดเจือจาง ส่วนที่เหลืออีก 20 คนผสมเทียมด้วยน้ำเชื้อแช่แข็ง / ละลายจากวิธีที่ช้าและเม็ด ( 10 นกต่อพิธีสาร ) การผสมเทียมเสร็จภายใน 10 นาทีหลังจากละลายสามสัปดาห์เป็นเวลา 3 สัปดาห์ใช้ 250 – 300 ล้าน 5 / ไก่ / AI ความอุดมสมบูรณ์ของ 300 บ่มไข่ถูกตรวจสอบโดยโปรแกรมสปาในวันที่ 10 ของการบ่ม อัตราของความอุดมสมบูรณ์ที่แท้จริง ( ปกติและตาย ? ) คือกำหนด ตัวอ่อนที่ตายในท่อนำไข่ ตรวจพบได้โดย propidium ไอโอไดด์การย้อมสีของแผ่นดิสก์เชื้อโรค . ไข่แดงแยกจากไข่ขาวและวางไว้ในสารละลาย NaCl 0.9% หลังจากการตรวจสอบภาพความอุดมสมบูรณ์ของเชื้อโรคที่เป็นแผ่นเสริมถูกเอาออกจากแผ่นใส่เข้าไปในไข่ที่สมบูรณ์ , สารละลาย NaCl 0.9% และเปื้อนบนสไลด์ที่มี propidium ไอโอไดด์ ( ปี่ ; p4170 ซิกม่า Aldrich , กัด , บูดาเปสต์ , ฮังการี ) ในกรณีของอุดมสมบูรณ์ ไข่ propidium ไอโอไดด์ ( DNA เฉพาะสีย้อมเรืองแสงสีแดง ) ทำให้นิวเคลียสของเซลล์ที่แบ่งตัวปรากฏในแสงจุด [ 21 ]