Membranes were washed andblocked ov

Membranes were washed and
blocked over-night at 4 C with 10% non-fat dry milk/20 in mM
Trizma base, 137 mM NaCl, 0.05% Tween, pH 7.6. Membranes were
probed (3 h at room temperature) with primary antibodies against
CYP1A1 (H-70) (1:1000, sc-20772, rabbit polyclonal, Santa Cruz),
CYP2D4 (1:1000, AB1272, rabbit polyclonal, Millipore), CYP2E1
(1:1000, AB1252, rabbit polyclonal, Millipore), CYP2B1/2B2 (9.14)
(1:500, sc-73546, mouse monoclonal, Santa Cruz) and CYP3A1
(P6) (1:500, sc-53246, mouse monoclonal, Santa Cruz).
Horseradish peroxidase conjugated secondary goat anti-rabbit,
Advansta (1:10000) and goat anti-mouse, Bio-Rad (1:10000),
antibodies were applied, and subsequently visualized with
chemiluminescence (Western Bright ECL, Advansta).
Autoradiograms were processed using ImageJ to determine densitometry
units.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เยื่อถูกล้าง และบล็อกกลางคืนเกินเวลา 4 C ด้วย 10% ไม่ใช่ไขมันแห้ง นม/20 มม.ฐาน ที่ Trizma 137 มม. NaCl, 0.05% โลก pH 7.6 มีเยื่อหุ้มพิสูจน์ (3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง) ด้วยแอนติบอดีหลักกับCYP1A1 (H-70) (1: 1000, sc-20772 กระต่าย โพลีแอนติซานตาครูซ),CYP2D4 (1: 1000, AB1272 กระต่าย โพลีแอนติมิลลิพอร์), CYP2E1(1: 1000, AB1252 กระต่าย โพลีแอนติมิลลิพอร์), CYP2B1/2B2 (9.14)(1: 500 sc-73546 เมาส์ โมโน ซานตาครูซ) และ CYP3A1(P6) (1: 500 sc-53246 เมาส์ โมโน ซานตาครูซ)ดิชฮอสผันแพะรองป้องกันกระต่ายAdvansta (1:10000) และเมาส์ป้องกันแพะ Bio-ล้อ (1:10000),แอนติบอดีถูกใช้ และต่อมาแสดงเป็นภาพด้วยchemiluminescence (ตะวันสว่าง ECL, Advansta)Autoradiograms ถูกประมวลผลที่ใช้ ImageJ กำหนดชมีความหนาแน่นหน่วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เยื่อถูกล้างและ
บล็อกคืนกว่า 4? C ที่มี 10% ที่ไม่มีไขมันนมแห้ง / 20 มิลลิเมตร
ฐาน Trizma 137 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, 0.05% Tween ค่า pH 7.6 เยื่อถูก
ตรวจสอบ (3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง) ที่มีแอนติบอดีปฐมภูมิกับ
CYP1A1 (H-70) (1: 1000 SC-20772, โพลีกระต่าย, Santa Cruz),
CYP2D4 (1: 1000 AB1272, โพลีกระต่ายร์ค) CYP2E1
(1: 1000 AB1252 กระต่ายโพลี, อร์ค) CYP2B1 / 2B2 (9.14)
(1: 500, SC-73546, โมโนโคลนอลเมาส์, Santa Cruz) และ CYP3A1
(P6) (1: 500, SC-53246 เมาส์ โมโนโคลนอล, Santa Cruz).
มะรุม peroxidase ผันแพะรองป้องกันกระต่าย
Advansta (1: 10000) และแพะต่อต้านเมาส์ Bio-Rad (1: 10000)
แอนติบอดีถูกนำไปใช้แล้วก็มองเห็นด้วย
chemiluminescence (ตะวันตกสดใส ECL, Advansta).
Autoradiograms ถูกประมวลผลโดยใช้ ImageJ เพื่อตรวจสอบความหนาแน่นของ
หน่วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เยื่อแผ่นแบบล้าง และบล็อกผ่านคืนที่ 4 C 10% ปลอดไขมันนมแห้ง / 20 มม.trizma ฐาน NaCl 137 มม. 0.05 tween pH 7.6 . เยื่อแผ่นแบบการตรวจสอบ ( 3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ) กับแอนติบอดีหลักกับCYP1A1 ( h-70 ) ( 000 sc-20772 , กระต่าย , ใช้ Santa Cruz )cyp2d4 ( 000 ab1272 โพลี , กระต่าย , CYP2E1 มิลลิ )( ab1252 000 , ใช้ , กระต่าย , CYP2B1 / 2B2 มิลลิ ) ( การจัดการ )( 1 : 500 sc-73546 , เมาส์ , โมโนโคลนอล ซานตาครูซ ) และ cyp3a1( P6 ) ( 1 : 500 sc-53246 , เมาส์ , โมโนโคลนอล , Santa Cruz )เอนไซม์ conjugated แพะมะรุมรองป้องกันกระต่ายadvansta ( 1:10000 ) และแพะป้องกันเมาส์ชีวภาพราด ( 1:10000 )แอนติบอดีที่ใช้ และภายหลังการมองเห็นด้วยเคมีลูมิเนสเซนต์ ( ECL , สดใสตะวันตก advansta )autoradiograms ถูกประมวลผลโดยใช้ ImageJ เพื่อตรวจสอบ densitometryหน่วย