Recently, in a new study (Carrera et al., 2010), we proposed a novel
strategy for the extensive characterization and de novo sequencing of all
PRVBs isoforms for all commercial species fromtheMerlucciidae family,
organisms whose genome remains unsequenced. This strategy is based
on the integration of a classical bottom-up proteomics approach with
accurate Mr determination by Fourier-transform ion-cyclotron resonance
(FTICR)-MS of intact proteins and selected tandem mass spectrometry
(MS/MS) ion monitoring (SMIM) of peptide mass gaps. For
each PRVB,mass spectra obtained by LC-ESI-IT-MS/MSfromtwo digests
(trypsin, Glu-C) were followed by database searching using Sequest
(Eng, McCormack, & Yates, 1994) and de novo sequenced manually
with the help of two programs PEAKS (Ma et al., 2003) and DeNovoX
(Thermo Electron Co.) (Scigelova et al., 2007). The deduced peptide sequences
were arranged and the theoretical Mr for the resulting sequences
was calculated. Experimental Mr for each PRVB was
measured with high mass accuracy by FTICR-MS (0.05–4.47 ppm).
The masses of several missing peptide gaps were estimated by
เมื่อเร็ว ๆ นี้ในการศึกษาใหม่ (Carrera et al., 2010) เราเสนอนวนิยาย
กลยุทธ์สำหรับตัวละครอย่างกว้างขวางและโนโวลำดับของทุก
PRVBs ไอโซฟอร์มสำหรับการขยายพันธุ์การค้าทุกคนในครอบครัว fromtheMerlucciidae,
สิ่งมีชีวิตที่มีจีโนมยังคง unsequenced กลยุทธ์นี้จะขึ้นอยู่
กับการรวมของวิธีการโปรตีนจากล่างขึ้นบนคลาสสิกที่มี
ความมุ่งมั่นที่ถูกต้องโดยนายฟูริเยร์-เปลี่ยนไอออน cyclotron กำทอน
(FTICR) -MS ของโปรตีนเหมือนเดิมและเลือกตีคู่มวลสาร
(MS / MS) ตรวจสอบไอออน (SMIM) ช่องว่างของมวลเปปไทด์ สำหรับ
แต่ละ PRVB, สเปกตรัมมวลที่ได้จากการ LC-ESI-IT-MS / MSfromtwo ย่อยสลาย
(trypsin, Glu-C) ตามมาด้วยการค้นหาโดยใช้ฐานข้อมูล Sequest
(Eng, McCormack และเยตส์ 1994) และโนโวติดใจด้วยตนเอง
ด้วยความช่วยเหลือ สองโปรแกรม PEAKS (Ma et al., 2003) และ DeNovoX
(เทอร์โมอิเลคตรอน จำกัด ) (Scigelova et al., 2007) อนุมานลำดับเปปไทด์
ถูกจัดและทฤษฎีนายสำหรับลำดับผล
ที่คำนวณได้ สำหรับการทดลองนาย PRVB แต่ละ
วัดที่มีความแม่นยำสูงโดยมวล FTICR-MS (0.05-4.47 ppm).
ฝูงของช่องว่างที่ขาดหายไปเปปไทด์หลายคนโดยประมาณ
การแปล กรุณารอสักครู่..
เมื่อเร็วๆ นี้ ในการศึกษาใหม่ ( Carrera et al . , 2010 ) , เรานำเสนอกลยุทธ์ใหม่สำหรับลักษณะที่กว้างขวางและ
prvbs อีกครั้งจัดลำดับของทุกไอโซฟอร์มทุกสายพันธุ์ทางการค้า fromthemerlucciidae ครอบครัว
สิ่งมีชีวิตที่มีโครโมโซมยังคง unsequenced . กลยุทธ์นี้ใช้ในการรวมวิธีการ
ประโยคคลาสสิกกับโปรตีโอมิกส์ถูกต้องนายปณิธาน โดยการแปลงฟูรีเยไอออน cyclotron แนนซ์
( fticr ) - MS ของโปรตีนครบถ้วน และเลือกตีคู่มวลสาร
( MS / MS ) การตรวจสอบไอออน ( smim ) ของเปปไทด์มวลช่องว่าง สำหรับ
แต่ละ prvb มวลจะมีค่าโดย lc-esi-it-ms / msfromtwo digests
( ทริป glu-c , ) ตามมาด้วยการค้นหาฐานข้อมูลที่ใช้ sequest
( Eng & McCormack , , เยตส์ , 1994 ) และอีกครั้งนี้ด้วยตนเอง
ด้วยความช่วยเหลือของโปรแกรมสองโปรแกรมยอด ( ma et al . , 2003 ) และ denovox
( Thermo Electron Co . ) ( scigelova et al . , 2007 ) ได้ลำดับเปปไทด์
จัดและนายเชิงทฤษฎีสำหรับผลลำดับ
คือการคำนวณ ทดลองคุณสำหรับแต่ละ prvb คือ
วัดความถูกต้องมวลสูง โดย fticr-ms ( 0.05 ppm ( 4.47 )
มวลชนหลายเปปไทด์โดยประมาณ โดยช่องว่างที่หายไป
การแปล กรุณารอสักครู่..