The soluble soybean protein in SBM,

The soluble soybean protein in SBM, FSBM and SPC were extracted by the method of Faurobert (1997). One hundred miligram sample mixed thoroughly with 400 μl of protein extraction solution (50 mM Na2CO3, 100 mM NaCl, 0.05% Triton X-100, 0.05% Tween-20, 1 mM PMSF, 1% βmecaptoethanol) for 10 min. The slurry was centrifuged at 7,000×g for 30 min. The supernatant was collected and the protein concentration was measured by the method of Bradford (1976) using BSA as the standard. Soluble protein was fractionated by a Tricine-SDSPAGE system according to the method described by Schagger (2006). The electrophoresis system was based on 10% polyacrylamide separating gels containing 0.1% SDS in Tris- tricine buffer. About 30 μg of extracted soluble protein was loading for each well and the sample was separated at 50-60 mV for 5 h. The protein markers (Invitrogen, USA) with the following molecular weights
Chen et al. (2010) Asian-Aust. J. Anim. Sci. 23(5):598-606
600
include Myosin (210.0 kDa), Bovine serum albumin (78.0 kDa), Glutamic dehydrogenase (55.0 kDa), Alcohol dehydrogenase (45.0 kDa), Carbonic anhydrase (34.0 kDa), Myoglobin (23.0 kDa), Lysozyme (16.0 kDa), Aprotinin (7.0 kDa) and Insulin B chain (4.0 kDa). After electrophoresis, the gel was stained for 30 min using Coomassie Brilliant Blue R-250 and de-stained with acetic acid. Images of the gels were captured with densitometers (Astra 2200, UMAX®) and analysis with software (Gel pro 4.5v, Media Cybernetics®) to calculate relative percentage of each protein band in test samples.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนถั่วเหลืองละลายใน SBM, FSBM และ SPC ถูกสกัดโดยวิธี Faurobert นี้ (1997) ตัวอย่างหนึ่งร้อย Miligram ผสม 400 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาการสกัดโปรตีน (ขนาด 50 มม Na2CO3, 100 มิลลิเมตรโซเดียมคลอไรด์, 0.05% Triton X-100, 0.05% Tween-20 1 มิ PMSF, 1% βmecaptoethanol) เป็นเวลา 10 นาที สารละลายที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 7,000 ×กรัมเป็นเวลา 30 นาที ใสถูกเก็บรวบรวมและความเข้มข้นของโปรตีนโดยวัดจากวิธีการของแบรดฟอนี้ (1976) โดยใช้บีเอสเอเป็นมาตรฐาน โปรตีนที่ละลายน้ำได้ถูก fractionated โดยระบบ Tricine-SDSPAGE ตามวิธีการอธิบายโดย Schagger (2006) ระบบอิเล็กอยู่บนพื้นฐานของ% polyacrylamide 10 แยกเจลที่มี 0.1% SDS ใน tris- บัฟเฟอร์ tricine ประมาณ 30 ไมโครกรัมของโปรตีนที่ละลายน้ำที่สกัดได้เมื่อโหลดสำหรับแต่ละดีและตัวอย่างที่ถูกแยกออก 50-60 MV เพลง 5 H โปรตีนเครื่องหมาย (Invitrogen, สหรัฐอเมริกา) มีดังต่อไปน้ำหนักโมเลกุล
Chen et al, (2010) เอเชีย Aust เจ Anim วิทย์ 23 (5): 598-606
600
รวม myosin (210.0 กิโลดาลตัน), โคเซรั่มอัลบูมิ (78.0 กิโลดาลตัน), กลูตา dehydrogenase (55.0 กิโลดาลตัน) dehydrogenase เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ (45.0 กิโลดาลตัน), คาร์บอ anhydrase (34.0 กิโลดาลตัน) โอโกลบิน (23.0 กิโลดาลตัน) , Lysozyme (16.0 กิโลดาลตัน) Aprotinin (7.0 กิโลดาลตัน) และอินซูลิน B โซ่ (4.0 กิโลดาลตัน) หลังจาก electrophoresis, เจลที่ถูกย้อมเป็นเวลา 30 นาทีโดยใช้ Coomassie สีฟ้าสดใส R-250 และยกเลิกการย้อมด้วยกรดอะซิติก ภาพของเจลที่ถูกจับด้วย densitometers (Astra 2200 UMAX®) และการวิเคราะห์ที่มีซอฟแวร์ (เจลโปร 4.5V สื่อCybernetics®) เพื่อคำนวณเปอร์เซ็นต์ญาติของแต่ละวงโปรตีนในตัวอย่างทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรตีนถั่วเหลืองละลาย SBM และ fsbm SPC ถูกสกัดโดยวิธี faurobert ( 1997 ) หนึ่งร้อย miligram ตัวอย่างละเอียดผสมกับ 400 μล. แก้ปัญหาการสกัดโปรตีน ( 50 มม. Na2CO3 , 100 mM NaCl , 0.05% Triton X-100 , 0.05 % tween-20 1 mM PMSF 1% บีตา mecaptoethanol ) เป็นเวลา 10 นาที คือ ที่ระดับความเข้มข้นที่ 7000 ×กรัมเป็นเวลา 30 นาที ที่รวบรวมและนำโปรตีนคือ วัดโดยวิธี Bradford ( 1976 ) ที่ใช้ BSA เป็นมาตรฐาน ปริมาณโปรตีนที่ถูกพบโดยระบบ sdspage เป็นไตรซีนตามวิธีการที่อธิบายโดย schagger ( 2006 ) ระบบอิเล็กโตรโฟรีซิส อยู่ใน 10% polyacrylamide เจลแยกประกอบด้วย 0.1% SDS ในบริษัทไตรซีน - บัฟเฟอร์ ประมาณ 30 μกรัมสกัดโปรตีนที่ละลายน้ำได้เป็นอย่างดี และโหลดสำหรับแต่ละตัวอย่างแยกที่ 50-60 MV เป็นเวลา 5 ชั่วโมง โปรตีนเครื่องหมาย ( Invitrogen , USA ) ที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่อไปนี้Chen et al . ( 2010 ) เอเชียอื่นๆ เจ ทำให้มีชีวิตชีวา สภาวะโลกร้อน 23 ( 5 ) : 598-606600ประกอบด้วยไมโอซิน ( 210.0 kDa ) , อัลบูมิน ( 78.0 kDa ) , glutamic dehydrogenase ( 55.0 kDa ) , ยาถ่าย ( ปี 4 ) ฉะนี้แล ( ร้อยละ 4 ) ไมโอโกลบิน ( กลุ่มที่ 4 ) , ไลโซไซม์ ( 16.0 kDa ) , โพรทินิน ( 7.0 กิโลดาลตัน ) และอินซูลิน B โซ่ ( 4.0 ) ) หลังจากอิเล็กเจลคือย้อม 30 นาที ใช้เหล่านี้น่าจะเป็น r-250 สีฟ้าสดใสและ de เปื้อนกรดอะซิติก รูปของเจลที่ถูกจับด้วยเห็นควร ( Astra 2200 umax ® ) และการวิเคราะห์ด้วยโปรแกรม ( เจลโปร 4.5v สื่อไซเบอร์เนติกส์® ) เพื่อคำนวณค่าสัมพัทธ์ของแต่ละแถบโปรตีนในตัวอย่างทดสอบ