2. Materials and methods
2.1. Animals
The experiment was carried out on naïve adult male Albino Swiss mice (25–30 g) purchased from the licensed breeder (Kolacz, Warsaw, Poland). The animals were housed in the environmentally controlled rooms with a 12 h light/dark cycle, in groups of 10 in standard cages under strictly controlled laboratory conditions — temperature maintained at 22–23 °C, relative humidity about 45–55%. Throughout the study, the animals were given ad libitum access to water and food. The experiment began after at least 1-week acclimation period in the laboratory conditions and was conducted between 8 a.m. and 3 p.m. to minimize circadian influences. Each experimental group consisted of 8–12 animals. Procedures involving mice and their care in all the experiments of the present study were approved by the Local Ethics Committee at the Medical University of Lublin (license no 26/2011, 28/2011 and 26/2013) and were performed in accordance with binding European standards related to the experimental studies on animal models. Each mouse was used only once.
2.2. Drug administration
Caffeine (1,3,7-trimethylxanthine; 5 mg/kg, Sigma-Aldrich), moclo-bemide (1.5 mg/kg, Sigma-Aldrich, Poznań, Poland), milnacipran hydrochloride (1.25 mg/kg, Abcam, Cambridge, UK), venlafaxine hydrochloride (1 mg/kg, Sigma-Aldrich, Poznań, Poland) and bupropion hydrochloride (10 mg/kg, Abcam, Cambridge, UK) were dissolved in 0.9% NaCl. The solutions of antidepressants were administered intraperitoneally (ip) 60 min before behavioral testing whereas caffeine solution was administered ip 40 min before the tests. The doses and pretreatment schedules were selected on those reported in the literature and on the basis of the results of our previous experiments [49], [52], [57] and [68]. All solutions were prepared immediately prior to the experiment. Animals from the control groups received ip injections of the vehicle (0.9% saline). The volume of the vehicle or drug solutions for ip administrations was 10 ml/kg.
2. วัสดุและวิธีการ2.1 การสัตว์ทดลองถูกดำเนินบนขำน่าผู้ใหญ่ชาย Albino สวิสหนู (25-30 กรัม) ซื้อจากพันธุ์ที่ได้รับใบอนุญาต (Kolacz วอร์ซอ โปแลนด์) สัตว์มีห้องพักในห้องควบคุมสิ่งแวดล้อมกับ 12 h ไฟ/มืดวงจร กลุ่มของ 10 ในกรงมาตรฐานภายใต้สภาพห้องปฏิบัติการควบคุมอย่างเคร่งครัดซึ่งอุณหภูมิคงที่ 22-23 ° C ความชื้นสัมพัทธ์ประมาณ 45-55% ตลอดการศึกษา สัตว์ได้รับการเข้าถึง ad libitum น้ำและอาหาร ทดลองเริ่มหลังจาก 1 สัปดาห์น้อย acclimation รอบในสภาพห้องปฏิบัติการ และได้ดำเนินการระหว่าง 8.00 น.และ 15.00 น.เพื่อลดอิทธิพล circadian แต่ละกลุ่มการทดลองประกอบด้วยสัตว์ 8 – 12 ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับหนูและดูแลของพวกเขาในการทดลองทั้งหมดของการศึกษาปัจจุบันได้รับการอนุมัติ โดยคณะกรรมการจริยธรรมในท้องถิ่นที่มหาวิทยาลัยแพทย์ Lublin (ใบอนุญาตไม่ที่ 26 2011, 28/2554 และ 26/2013) และได้ดำเนินการตามมาตรฐานยุโรปที่เกี่ยวข้องกับการศึกษาทดลองแบบจำลองสัตว์ผูก ใช้เมาส์แต่ละครั้ง2.2. ยาคาเฟอีน (1,3,7 trimethylxanthine; 5 มก./กก. ซิก Aldrich), moclo-bemide (1.5 mg/kg ซิก Aldrich, Poznań โปแลนด์), milnacipran ไฮโดรคลอไรด์ (1.25 มก./กก. Abcam เคมบริดจ์ สหราชอาณาจักร), venlafaxine ไฮโดรคลอไรด์ (1 mg/kg ซิก-Aldrich, Poznań โปแลนด์) และ bupropion ไฮโดรคลอไรด์ (10 mg/kg, Abcam เคมบริดจ์ สหราชอาณาจักร) ได้ละลายใน 0.9% NaCl โซลูชั่นของ antidepressants ได้จัดการ intraperitoneally (ip) 60 นาทีก่อนทดสอบพฤติกรรมขณะคาเฟอีนโซลูชั่นจัดการ ip 40 นาทีก่อนการทดสอบ เลือกปริมาณและกำหนดการ pretreatment ผู้รายงาน ในวรรณคดี และ ตามผลของเราก่อนหน้านี้ทดลอง [49], [52], [57] และ [68] โซลูชั่นทั้งหมดได้เตรียมทันทีก่อนทดลอง สัตว์กลุ่มควบคุมได้รับฉีด ip ของรถ (น้ำเกลือ 0.9%) ระดับเสียงของยานพาหนะหรือยาโซลูชั่นสำหรับการจัดการ ip ถูก 10 ml/kg
การแปล กรุณารอสักครู่..
2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สัตว์ทดลองดำเนินการในผู้ใหญ่ไร้เดียงสาชายเผือกหนูสวิส (25-30 กรัม) ซื้อมาจากพ่อแม่พันธุ์ที่ได้รับอนุญาต (Kolacz, วอร์ซอ, โปแลนด์) สัตว์ที่ถูกเก็บไว้ในห้องควบคุมสิ่งแวดล้อมที่มีแสง 12 ชั่วโมง / รอบมืดในกลุ่ม 10 ในกรงมาตรฐานภายใต้การควบคุมอย่างเคร่งครัดสภาพห้องปฏิบัติการ - อุณหภูมิเก็บรักษาไว้ที่ 22-23 องศาเซลเซียสความชื้นสัมพัทธ์ 45-55% เกี่ยวกับ ตลอดการศึกษาสัตว์ที่ได้รับการเข้าถึงโฆษณา libitum ลงไปในน้ำและอาหาร การทดลองหลังจากที่เริ่มอย่างน้อย 1 สัปดาห์ระยะเวลาปรับตัวในสภาพห้องปฏิบัติการและได้ดำเนินการ 08:00-03:00 เพื่อลดอิทธิพลเป็นกลาง แต่ละกลุ่มทดลองประกอบด้วย 8-12 สัตว์ ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับหนูและดูแลของพวกเขาในการทดลองทั้งหมดของการศึกษาครั้งนี้ได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยในท้องถิ่นที่มหาวิทยาลัยการแพทย์ของริน (ไม่มีใบอนุญาต 26/2011, 28/2011 และ 26/2013) และได้ดำเนินการตามที่มีผลผูกพันยุโรป มาตรฐานที่เกี่ยวข้องกับการศึกษาทดลองในสัตว์ทดลอง เมาส์แต่ละคนได้ใช้เพียงครั้งเดียว. 2.2 การบริหารยาเสพติดคาเฟอีน (1,3,7-trimethylxanthine 5 mg / kg Sigma-Aldrich) moclo-bemide (1.5 mg / kg Sigma-Aldrich, พอซนัน, โปแลนด์), ไฮโดรคลอไร milnacipran (1.25 mg / kg Abcam, เคมบริดจ์, สหราชอาณาจักร), ไฮโดรคลอไร venlafaxine (1 mg / kg Sigma-Aldrich, พอซนัน, โปแลนด์) และไฮโดรคลอไร bupropion (10 mg / kg Abcam เคมบริดจ์สหราชอาณาจักร) ถูกกลืนหายไปใน 0.9% โซเดียมคลอไรด์ แก้ซึมเศร้าถูกยา intraperitoneally ip () 60 นาทีก่อนการทดสอบพฤติกรรมในขณะที่การแก้ปัญหาคาเฟอีนเป็นยาไอพี 40 นาทีก่อนที่จะทดสอบ ปริมาณและตารางเวลาการปรับสภาพได้รับการคัดเลือกในบรรดารายงานในวรรณคดีและบนพื้นฐานของผลการทดลองก่อนหน้านี้ของเรา [49] [52] [57] และ [68] โซลูชั่นทั้งหมดถูกจัดเตรียมไว้ทันทีก่อนที่จะทดลอง สัตว์จากกลุ่มควบคุมได้รับการฉีดไอพีของยานพาหนะ (น้ำเกลือ 0.9%) ปริมาณของยานพาหนะหรือการแก้ปัญหายาเสพติดสำหรับการบริหารทรัพย์สินทางปัญญาคือ 10 มล. / กก.
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 .
สัตว์ทดลองในนาไตได้ผู้ชายสวิสหนูเผือก ( 25 – 30 กรัม ) ซื้อจากพ่อแม่พันธุ์ที่ได้รับใบอนุญาต ( kolacz , วอร์ซอ , โปแลนด์ ) สัตว์ที่ถูกขังในสิ่งแวดล้อมควบคุมบุหรี่กับ 12 H แสง / มืดรอบ ในกลุ่มของ 10 ในกรงมาตรฐานภายใต้การควบคุมอย่างเคร่งครัดสภาพห้องปฏิบัติการอุณหภูมิไว้ที่ 22 – 23 ° Cความชื้นสัมพัทธ์ประมาณ 45 - 55 บาท ตลอดการศึกษา สัตว์ที่ได้รับอย่างเต็มที่ การเข้าถึงน้ำและอาหาร การทดลองเริ่มต้นขึ้นหลังจากระยะเวลาอย่างน้อย 1-week acclimation ในสภาพห้องปฏิบัติการและดำเนินการระหว่าง 8 โมงเช้า และ 3 ทุ่ม เพื่อลดอิทธิพลที่เป็นกลาง . แต่ละกลุ่มทดลองจำนวน 8 – 12 สัตว์ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับหนูและดูแลของพวกเขาในการทดลองของการศึกษาครั้งนี้ ได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรม ท้องถิ่น ณ มหาวิทยาลัยแพทย์ของ Lublin ( ใบอนุญาตไม่ 26 / 2554 28 / 2554 26 / 2013 ) และมีการปฏิบัติตามมาตรฐานยุโรป ผูกสัมพันธ์กับการศึกษาทดลองในรูปแบบสัตว์ เมาส์แต่ละถูกใช้เพียงครั้งเดียว
2.2 . ยา
คาเฟอีน ( 1 , 3 ,7-trimethylxanthine ; 5 mg / kg ) moclo ซิกม่า Aldrich bemide ( 1.5 มก. / กก. ซิกม่า Aldrich พอซนาน ประเทศโปแลนด์ ) , มิลนาซิพลาน ไฮโดรคลอไรด์ ( 1.25 มก. / กก. ABCAM , เคมบริดจ์ , อังกฤษ ) , เวนลาแฟ็กซีน ไฮโดรคลอไรด์ ( 1 มิลลิกรัม / กิโลกรัม ซิกม่า Aldrich พอซนาน ประเทศโปแลนด์ ไฮโดรคลอไรด์ ( 10 ) และบูโพรเพียนมิลลิกรัม / กิโลกรัม ABCAM , เคมบริดจ์ , UK ) ถูกละลายใน 0.9% NaCl .โซลูชั่นของ antidepressants ศึกษาพบ ( IP ) 60 นาทีก่อนการทดสอบและแก้ปัญหาพฤติกรรมคาเฟอีนใช้ IP 40 นาทีก่อนการทดสอบ ปริมาณและตารางการเลือกในที่รายงานในวรรณคดี และบนพื้นฐานของผลก่อนการทดลอง [ 49 ] , [ 52 ] , [ 57 ] และ [ 68 ]โซลูชั่นทั้งหมดถูกเตรียมไว้ทันที ก่อนการทดลอง สัตว์จากกลุ่มควบคุมได้รับ IP การฉีดของยานพาหนะ ( 0.9% น้ำเกลือ ) ปริมาณของยานพาหนะหรือโซลูชั่นสำหรับการบริหารยา IP เป็นกิโลกรัม 10 ml .
การแปล กรุณารอสักครู่..