Durability of direct immunofluoresc

Durability of direct immunofluorescence (DIF) slides
stored at room temperature
Amira Elbendary, MBBCh, MSc,a,b Cheng Zhou, MD,a,c Jonathan Truong, HTL, QIHC, BS,a
and Dirk M. Elston, MDa
New York, New York; Cairo, Egypt; and Beijing, China
Background: Prior studies suggested that direct immunofluorescence (DIF) slides can be stored at room
temperature.
Objectives: We sought to determine the durability of DIF slides stored at room temperature for 5 years.
Methods: This was a retrospective study of 83 DIF slides archived at room temperature during 2010. The
pattern of immunoreactants was compared with those noted in the original report.
Results: Loss of reactivity was limited to cases with weak fluorescence at original diagnosis. Loss of IgG
was noted in 12.5% of cases, IgA in 12%, C3 in 10%, and IgM in 9.75%. Fibrin showed no loss of reactivity.
Background
2.1. ANA test with indirect immunofluorescence imaging
The ANA test used in conjunction with indirect immunofluorescence
is able to detect in the blood serum the presence of
autoantibodies responsible for CTDs. The serum is first diluted and
then incubated on a microscope slide coated with HEp-2 cells,
whose antigens selectively bind to the serum autoantibodies. This
bond can be visualized under the microscope by adding a green fluorescent
tag on the slide. The intensity of the fluorescence signal
provides information about the level of the autoantibodies. When
using the recommended serum dilution of 1:80, these levels can
be grouped into three categories: negative (no fluorescence at all),
intermediate or positive [2]. Depending on the antibody type, the
HEp-2 cells (specifically, only the ones with intermediate or positive
level) will be characterized by distinct patterns of fluorescence.
The ones that are mainly reported in literature are six: homogeneous,
coarse speckled, fine speckled, centromere, nucleolar and
cytoplasmic (Fig. 1).
The physicians analyze the microscope slide in three phases.
First, they detect the mitotic cells, i.e. cells undergoing division,
whose presence guarantees the good quality of the slide. Such cells
Fig. 3. Examples of mitotic cells.
64 S. Tonti et al. / Computerized Medical Imaging and Graphics 40 (2015) 62–69
have very distinct textural characteristics compared to the other
cells of the image (Fig. 3). Second, they classify the fluorescence
intensity level into negative, intermediate or positive (Fig. 2). Third,
only for the intermediate andpositive levels,they categorize eachof
the non-mitotic cells of the slide (namely, the interphase cells) into
one of the six staining patterns of Fig. 1. This ultimately provides
information about the type of CTD affecting the patient.
Most of the techniques for automated mitosis recognition or
fluorescent patterns classification, such as those cited in Section 1,
rely on cell segmentation as a preliminary step, even though they
do not explicitly propose a method for such task. Hence, in the
context of an automatization of the IIF ANA test, the accuracy of
cell segmentation heavily affects the whole processing chain.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความทนทานของภาพนิ่งโดยตรง immunofluorescence (DIF)เก็บที่อุณหภูมิห้องAmira Elbendary, MBBCh หลัก a, b เฉิงโจว MD, a, c Jonathan Truong มาตรฐาน QIHC, BS การและ Dirk ม. Elston, MDaนิวยอร์ก นิวยอร์ก ไคโร อียิปต์ ปักกิ่ง จีนพื้นหลัง: ศึกษาก่อนแนะนำว่า สามารถเก็บภาพนิ่งตรง immunofluorescence (DIF) ห้องอุณหภูมิวัตถุประสงค์: เราพยายามที่จะกำหนดอายุการใช้งานภาพนิ่ง DIF เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง 5 ปีวิธีการ: นี้เป็นการศึกษาภาพนิ่ง DIF 83 ที่เก็บถาวรไว้ที่อุณหภูมิห้องในระหว่างปี 2553 คาด ที่รูปแบบของ immunoreactants ถูกเปรียบเทียบกับที่ระบุไว้ในรายงานต้นฉบับผลลัพธ์: สูญเสียเกิดปฏิกิริยาถูกจำกัดกรณีมี fluorescence อ่อนแอที่วินิจฉัยเดิม ขาดทุนของ IgGถูกตั้งข้อสังเกตใน 12.5% ของกรณี อิกะ 12%, C3 ใน 10% และการระบาดของโรคใน 9.75% Fibrin ที่แสดงให้เห็นว่าสูญเสียไม่เกิดปฏิกิริยาพื้นหลัง2.1 ANA ทดสอบกับภาพ immunofluorescence ทางอ้อมการทดสอบ ANA ที่ใช้ร่วมกับอ้อม immunofluorescenceจะตรวจพบในซีรั่มของเลือดของautoantibodies ชอบ CTDs เซรั่มถูกทำให้เจือจางก่อน และแล้ว incubated บนภาพนิ่งกล้องจุลทรรศน์เคลือบเซลล์ HEp-2มี antigens เลือกผูกกับ autoantibodies เซรั่ม นี้ตราสารหนี้สามารถ visualized ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์สีเขียวเพิ่มป้ายบนภาพนิ่ง ความเข้มของสัญญาณ fluorescenceแสดงข้อมูลเกี่ยวกับระดับของ autoantibodies เมื่อใช้เจือจางซีรั่มที่แนะนำของ 1:80 ระดับเหล่านี้สามารถจัดกลุ่มเป็นประเภทที่ 3: ลบ (ไม่มี fluorescence เลย),ปานกลางหรือบวก [2] ขึ้นอยู่กับชนิดของแอนติบอดี การHEp 2 เซลล์ (โดยเฉพาะ เฉพาะคนระดับกลางหรือเป็นบวกระดับ) จะเป็นลักษณะตามรูปแบบที่แตกต่างของ fluorescenceคนที่มีรายงานในวรรณคดีส่วนใหญ่จะหก: เหมือนหยาบออกน้ำตาล ปรับเหตุ centromere, nucleolar และcytoplasmic (Fig. 1)การแพทย์วิเคราะห์ภาพนิ่งกล้องจุลทรรศน์ในระยะที่สามครั้งแรก ตรวจหาเซลล์ mitotic เช่นเซลล์ที่อยู่ในระหว่างการหารสถานะการออนไลน์ที่รับประกันคุณภาพของภาพนิ่ง เซลล์ดังกล่าวFig. 3 ตัวอย่างของเซลล์ mitoticAl. ร้อยเอ็ด Tonti S. 64 / คอมพิวเตอร์กราฟิก 40 และภาพทางการแพทย์ (2015) 62-69มีลักษณะ textural แตกต่างมากเมื่อเทียบกับอื่น ๆเซลล์ของภาพ (Fig. 3) สอง พวกเขาจัดประเภท fluorescence ที่ระดับความเข้มเป็นลบ กลาง หรือบวก (Fig. 2) ที่สามสำหรับระดับกลาง andpositive พวกเขาประเภท eachofภาพนิ่ง (ได้แก่ เซลล์ interphase) ลงในเซลล์ไม่ใช่ mitoticหนึ่งรูปแบบ staining หก Fig. 1 สุดให้ข้อมูลเกี่ยวกับชนิดของ CTD ที่ส่งผลกระทบต่อผู้ป่วยที่สุดของเทคนิคการรู้จำไมโทซิสโดยอัตโนมัติ หรือจัดประเภทรูปแบบฟลูออเรส เช่นอ้างถึงในหมวดที่ 1อาศัยเซลล์แบ่งเป็นขั้นตอนเบื้องต้น แม้ว่าพวกเขาไม่ชัดเจนเสนอวิธีสำหรับงานดังกล่าว ดังนั้น ในการบริบทของการ automatization ANA ถ้าทดสอบ ความถูกต้องของแบ่งเซลล์มากส่งผลต่อห่วงโซ่การประมวลผลทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความคงทนของอิมมูโนโดยตรง (DIF)
ภาพนิ่งเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง
Amira Elbendary, MBBCh, MSc, A, B เฉิงโจว, MD, คโจนาธาน Truong, HTL, QIHC
ชัดมีและเดิร์คเอ็มElston
ภาคตะวันออกเฉียงเหนือนิวยอร์กนิวยอร์ก; กรุงไคโรประเทศอียิปต์; และกรุงปักกิ่งประเทศจีนมา: การศึกษาก่อนที่จะชี้ให้เห็นว่าอิมมูโนโดยตรง (DIF) ภาพนิ่งสามารถเก็บไว้ที่ห้องอุณหภูมิ. วัตถุประสงค์: เราพยายามที่จะตรวจสอบความทนทานของภาพนิ่ง DIF ที่เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 ปี. วิธีการ: นี่คือการศึกษาย้อนหลังของ 83 สไลด์ DIF เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องในระหว่างปี 2010 รูปแบบของ immunoreactants เมื่อเทียบกับผู้ที่ระบุไว้ในรายงานต้นฉบับ. ผล: การสูญเสียของการเกิดปฏิกิริยาถูก จำกัด ให้กรณีที่มีการเรืองแสงที่อ่อนแอในการวินิจฉัยเดิม การสูญเสียของ IgG ได้ระบุไว้ใน 12.5% ​​ของกรณี IgA ใน 12% C3 ใน 10% และ IgM ใน 9.75% ไฟบรินที่แสดงให้เห็นการสูญเสียของการเกิดปฏิกิริยาไม่มี. พื้นหลัง2.1 ทดสอบ ANA กับภาพอิมมูโนอ้อมการทดสอบANA ใช้ร่วมกับอิมมูโนอ้อมสามารถตรวจสอบในซีรั่มเลือดปรากฏตัวของautoantibodies รับผิดชอบในการ CTDs ซีรั่มเป็นเจือจางครั้งแรกและจากนั้นบ่มบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์เคลือบด้วย HEP-2 เซลล์ที่มีแอนติเจนเลือกผูกกับautoantibodies ซีรั่ม นี้พันธบัตรสามารถมองเห็นภายใต้กล้องจุลทรรศน์โดยการเพิ่มสีเขียวเรืองแท็กบนภาพนิ่ง ความเข้มของสัญญาณเรืองแสงให้ข้อมูลเกี่ยวกับระดับของ autoantibodies ที่ เมื่อใช้เจือจางซีรั่มที่แนะนำของ 1:80 ระดับเหล่านี้สามารถแบ่งออกได้เป็นสามประเภท: ลบ (เรืองแสงที่ไม่ทั้งหมด) กลางหรือบวก [2] ขึ้นอยู่กับชนิดของแอนติบอดีที่เซลล์ HEP-2 (เฉพาะเพียงคนที่มีระดับกลางหรือบวกระดับ) จะโดดเด่นด้วยรูปแบบที่แตกต่างของแสง. คนที่จะมีการรายงานส่วนใหญ่ในวรรณคดีหก: เป็นเนื้อเดียวกันจุดด่างดำหยาบจุดด่างดำปรับ, centromere, คลีโอและนิวเคลียส(รูปที่ 1).. แพทย์วิเคราะห์สไลด์กล้องจุลทรรศน์ในสามขั้นตอน. ครั้งแรกพวกเขาตรวจสอบเซลล์ทิคส์เซลล์เช่นการผ่าตัดส่วนที่มีการแสดงตนรับประกันคุณภาพที่ดีของภาพนิ่ง เซลล์ดังกล่าวรูป 3. ตัวอย่างของเซลล์ทิคส์. 64 เอสทอนไทน์ et al, / คอมพิวเตอร์ภาพทางการแพทย์และกราฟิกที่ 40 (2015) 62-69 มีลักษณะเนื้อสัมผัสที่แตกต่างกันมากเมื่อเทียบกับคนอื่น ๆเซลล์ของภาพ (รูปที่. 3) ประการที่สองพวกเขาแยกประเภทเรืองแสงระดับความรุนแรงลงไปในเชิงลบหรือบวกกลาง (รูปที่. 2) ประการที่สามเพียงระดับ andpositive กลางที่พวกเขาจัดหมวดหมู่ eachof เซลล์ที่ไม่ใช่ทิคส์ของภาพนิ่ง (กล่าวคือเซลล์ระหว่างเฟส) ลงในหนึ่งในหกรูปแบบการย้อมสีของรูป 1. ในท้ายที่สุดนี้ให้ข้อมูลเกี่ยวกับประเภทของCTD มีผลกระทบต่อผู้ป่วย. ที่สุดของเทคนิคสำหรับการรับรู้เซลล์อัตโนมัติหรือการจำแนกรูปแบบการเรืองแสงเช่นที่อ้างถึงในมาตรา 1, พึ่งพาการแบ่งส่วนมือถือเป็นขั้นตอนเบื้องต้นถึงแม้ว่าพวกเขาทำไม่ได้อย่างชัดเจนนำเสนอวิธีการสำหรับงานดังกล่าว ดังนั้นในบริบทของ automatization ของการทดสอบ IIF ANA ความถูกต้องของการแบ่งส่วนของเซลล์อย่างหนักส่งผลกระทบต่อห่วงโซ่การประมวลผลทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความทนทานของวิธีโดยตรง ( DIF ) ภาพนิ่ง

เก็บไว้ที่อุณหภูมิ ห้อง elbendary mbbch ร่า , MSC , A , B เฉิงโจว , MD , C , โจนาธาน เจือง htl qihc BS , , , ,

และเดิร์คม. อิลสตั้น ( นิวยอร์ก , นิวยอร์ก ; ไคโร อียิปต์ และ ปักกิ่ง , จีน
ประวัติ : การศึกษาก่อน แนะนำวิธีทางตรง ( DIF ) ภาพนิ่งสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง
u
เราพยายามที่จะตรวจสอบความทนทานของภาพนิ่ง DIF เก็บรักษาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 ปี .
วิธีการศึกษา การศึกษาย้อนหลังของ 83 DIF ภาพนิ่งเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องระหว่าง 2010
รูปแบบ immunoreactants เมื่อเทียบกับบรรดาที่ระบุไว้ในรายงานต้นฉบับ
ผล : การสูญเสียของเฉพาะกรณีมีการเรืองแสงที่อ่อนแอ การวินิจฉัยต้นฉบับ การสูญเสียของ IgG
เป็นข้อสังเกตใน 12.5 % ของรายกลุ่มใน 12 % C3 10 % , และ IgM ใน 9.75 % ไฟบริน ไม่พบการสูญเสียต่อ

สำหรับพื้นหลัง . ทดสอบการถ่ายภาพอนาวิธีทางอ้อม

น่าทดสอบใช้ร่วมกับวิธีทางอ้อมสามารถตรวจพบในเลือด การปรากฏตัวของ
จำรูญรับผิดชอบ ctds . เซรั่มปรับลดและ
เป็นครั้งแรกแล้วบ่มในกล้องจุลทรรศน์สไลด์ที่เคลือบด้วย hep-2 เซลล์
ที่มีแอนติเจนเลือกผูกกับเซรั่มจำรูญ . พันธบัตรนี้
สามารถมองเห็นภายใต้กล้องจุลทรรศน์โดยการเพิ่มแท็กสีเขียวเรืองแสง
บนสไลด์ ความเข้มของการเรืองแสงสัญญาณ
ให้ข้อมูลเกี่ยวกับระดับของจำรูญ . เมื่อใช้แนะนำเซรั่ม
2
1:80 ระดับเหล่านี้สามารถจะแบ่งออกเป็นสามประเภท : ลบ ( ไม่มีการเรืองแสงที่ทั้งหมด ) ,
กลางหรือบวก [ 2 ] ขึ้นอยู่กับชนิดของแอนติบอดี ,
เซลล์ hep-2 ( โดยเฉพาะ เพียงคนระดับกลาง หรือระดับบวก
) จะโดดเด่นด้วยรูปแบบที่แตกต่างกันของ fluorescence .
คนส่วนใหญ่รายงานในวรรณคดีมีหก : เป็นเนื้อเดียวกัน
หยาบละเอียดสีแสด เซนโตรเมียร์ , จุดทั้งนี้ ( รูปที่ 1 ) และ
.
หมอวิเคราะห์กล้องจุลทรรศน์สไลด์เป็น 3 ช่วง
ครั้งแรก พวกเขาตรวจสอบเซลล์ไมโทติก คือ เซลล์รับกอง
แสดงตนซึ่งรับประกันคุณภาพของภาพนิ่ง เช่นเซลล์
รูปที่ 3 ตัวอย่างของเส้นใยเซลล์ .
64 s tonti et al . / ภาพทางการแพทย์ด้วยคอมพิวเตอร์กราฟิก 40 ( 2015 ) 62 – 69
มีลักษณะเนื้อสัมผัสที่แตกต่างกันมากเมื่อเทียบกับเซลล์อื่น ๆ
ของภาพ ( รูปที่ 3 ) สอง เขาจัดระดับความเข้มในการ
ลบ หรือ บวก กลาง ( รูปที่ 2 ) 3
ให้เชิงบวกระดับกลาง พวกเขาจัดหมวดหมู่ของ
ไม่ไมโทติกเซลล์ของภาพนิ่ง ( คือ อินเตอร์เฟสเซลล์ ) เป็นหนึ่งในหกของการย้อมสี
รูปแบบของรูปที่ 1สุดนี้ให้ข้อมูลเกี่ยวกับชนิดของ CTD

ต่อผู้ป่วย ส่วนใหญ่ของเทคนิคอัตโนมัติเซลล์รับรู้หรือ
เรืองแสงรูปแบบหมวดหมู่ เช่นที่กล่าวถึงในมาตราที่ 1
พึ่งแบ่งเซลล์เป็นขั้นตอนเบื้องต้น แม้ว่าพวกเขา
ไม่ได้อย่างชัดเจนนำเสนอวิธีการสำหรับงานดังกล่าว ดังนั้น ในบริบทของ
automatization ของข้อสอบ อนา ทดสอบความถูกต้องของการแบ่งเซลล์มาก
มีผลต่อห่วงโซ่การประมวลผลทั้งหมด