- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
Materials and MethodsThai native si
Materials and Methods
Thai native silkworm pupaes
The five varieties of the Thai native silkworm pupaes (Keawsakol, Nangnoi Si Sa Ket,
Somrong, Nangleung, and Noneruesee) were collected during May-July 2007 and May-July 2008
from Queen Sirikit Sericulture Center, Nakhon Rachasima and udonThani in Thailand.
Preparation of oils from the Thai native silkworm pupae
The five varieties of the Thai native silkworms were boiled at 100ºC until floating above the
water level. Then the water was drained, and the worms were roasted until reaching 8% of moisture.
After that, the dried pupae were ground to powder. Oils from the powder were Soxhlet extracted
using a Soxhlet apparatus (Doneanu et al., 1997; Khobkol et al., 2002) and maceration extracted
using petroleum ether as a solvent (Nipha et al., 1997; Doneanu et al., 1997). For the soxhlet method,
the dried pupae powder was boiled with petroleum ether at the ratio of 100 g of the powder to 300 ml
of the solvent for 18 h in a Soxhlet apparatus. The extracted oils were filtered and the solvent was
evaporated by a rotary vacuum evaporator at 40°C. For the maceration methods, the powder was
added into the petroleum ether at the ratio of 100 g of the powder to 750 ml of the solvent. Then, the
mixture was blended for 3 min and shaken at the speed of 200 rpm, 10ºC for 5 days. The extracted
oils were filtered and the solvent was evaporated by a rotary vacuum evaporator at 40ºC. The oil
samples were kept at 4ºC until use.
Determination of linoleic acid content
Linoleic acid (>99%) standard was obtained from Sigma-Aldrich (Chemie GmbH, Steinheim).
Dissolve oils sample (1g) of free fatty acids in methanol and neutralize with the KOH solution.
Evaporate the mixture under nitrogen. Add to the residue 0.1 ml of 2mM 18-crown-6 in acetonitrile
and 0.1 ml 4-bromophenacyl bromide. Heat the mixture at 80 oC for 15 min in mixing gently several
times. Cool the vial. Then, the samples were determined by HPLC (Luna® C18 to micron 250x4.0 nm
Phenomenex USA Column, LC1200 UV/VIS Detector and LC1100 HPLC pump) with the 90%(v/v)
acetonitrile and 10%(v/v) of 0.1%(w/v) Trifluoroacetic acid, injection volume 10 μl, flow rate 1 ml/min
with the UV detector at 210 nm. The linoleic acid contents were calculated by comparing with the
standard linoleic acid (Sigma, Co., St. Louis, USA).
Determination of fatty acids
Fatty acid methyl esters (Aldrich, England) standard solution mixture was used. The extracted
oils were converted to methyl ester in usual manner by refluxing with methanolic sodium hydroxide
solution, boron trifluoride reagent and n-heptane (Official Methods of Analysis, 1997). The fatty acid
composition of the esterified oil was characterized and quantified using Varian Vista 3400 CX gas
chromatograph as described above.HP-INNOWAX (30m ×0.25mm) was used. The initial column
temperature was 210 oC and final temperature was 250 oC. The detector temperature was 300 C.
Hydrogen and air flows were 30 and 300 mL/min, respectively. Sample (0.5 mL of oil solutions1:10 in
hexane) Data were calculated using the normalized peak area percentages of fatty acids.
Free radical scavenging assay
Oil samples at 12.5,25,50,100 and 200 mg/ml and the standard antioxidants : vitamin C ,
vitamin E ,BHT and linoleic acid in the mixture of 95%(v/v) ethanol and 10%(v/v) DMSO (1:1) were
assayed for free radical scavenging activity by the DPPH method (Jung, B. K. et al., 2006). 100 μl of
samples or standards, 25 μl of 2mg/ml DPPH in 95% ethanol and 25 μl of 95%(v/v) ethanol were
mixed in 96-well microplates and incubated at room temperature (25C) for 30 min. The absorbance
was measured at 515 nm. The percentages of DPPH radical scavenging activity were calculated
according to the following equation: % DPPH radical scavenging activity = [A – B] x 100
A
where A is the absorbance of the control reaction (containing all reagents except the test
samples), and B is the absorbance of the test samples. Sample concentrations providing 50%
scavenging activity (SC50) was calculated from the graph plotted between free radical scavenging
inhibition percentages and the sample concentrations.
Tyrosinase inhibition assay
Oil samples at 200, 100, 50, 25 and 12.5 mg/ml and the standard antioxidants: vitamin C and
kojic acid were mixed with 5% (v/v) DMSO and assayed by the modified dopachrome method using
tyrosine as a substrate as previously described (Long et al., 2000). Briefly, 40 l of samples or
standards, 40 l of 0.1 mg/ml L-tyrosine, 50 l of 0.1 mg/ml mushroom tyrosinase and 80 l of 0.1M
phosphate buffer were added in 96-well microplates. The 5% (v/v) DMSO solution was used as a
negative control. The mixture was incubated at 37C for 60 min. Before and after incubation, the
amount of dopachrome produced in the reaction mixture was measured at 450 nm. The experiment
was done in triplicate. The percentages of tyrosinase inhibition were calculated according to the
following equation: % inhibition activity = [(A-B) - (C-D)] x 100
(A-B)
where A is the absorbance of the blank after incubation, B is the absorbance of the blank
before incubation, C is the absorbance of the sample after incubation, and D is the absorbance of the
sample before incubation. Sample concentrations providing 50% inhibition (IC50) were calculated
from the graph plotted between tyrosinase inhibition activity percentages and the concentrations
Thai native silkworm pupaes
The five varieties of the Thai native silkworm pupaes (Keawsakol, Nangnoi Si Sa Ket,
Somrong, Nangleung, and Noneruesee) were collected during May-July 2007 and May-July 2008
from Queen Sirikit Sericulture Center, Nakhon Rachasima and udonThani in Thailand.
Preparation of oils from the Thai native silkworm pupae
The five varieties of the Thai native silkworms were boiled at 100ºC until floating above the
water level. Then the water was drained, and the worms were roasted until reaching 8% of moisture.
After that, the dried pupae were ground to powder. Oils from the powder were Soxhlet extracted
using a Soxhlet apparatus (Doneanu et al., 1997; Khobkol et al., 2002) and maceration extracted
using petroleum ether as a solvent (Nipha et al., 1997; Doneanu et al., 1997). For the soxhlet method,
the dried pupae powder was boiled with petroleum ether at the ratio of 100 g of the powder to 300 ml
of the solvent for 18 h in a Soxhlet apparatus. The extracted oils were filtered and the solvent was
evaporated by a rotary vacuum evaporator at 40°C. For the maceration methods, the powder was
added into the petroleum ether at the ratio of 100 g of the powder to 750 ml of the solvent. Then, the
mixture was blended for 3 min and shaken at the speed of 200 rpm, 10ºC for 5 days. The extracted
oils were filtered and the solvent was evaporated by a rotary vacuum evaporator at 40ºC. The oil
samples were kept at 4ºC until use.
Determination of linoleic acid content
Linoleic acid (>99%) standard was obtained from Sigma-Aldrich (Chemie GmbH, Steinheim).
Dissolve oils sample (1g) of free fatty acids in methanol and neutralize with the KOH solution.
Evaporate the mixture under nitrogen. Add to the residue 0.1 ml of 2mM 18-crown-6 in acetonitrile
and 0.1 ml 4-bromophenacyl bromide. Heat the mixture at 80 oC for 15 min in mixing gently several
times. Cool the vial. Then, the samples were determined by HPLC (Luna® C18 to micron 250x4.0 nm
Phenomenex USA Column, LC1200 UV/VIS Detector and LC1100 HPLC pump) with the 90%(v/v)
acetonitrile and 10%(v/v) of 0.1%(w/v) Trifluoroacetic acid, injection volume 10 μl, flow rate 1 ml/min
with the UV detector at 210 nm. The linoleic acid contents were calculated by comparing with the
standard linoleic acid (Sigma, Co., St. Louis, USA).
Determination of fatty acids
Fatty acid methyl esters (Aldrich, England) standard solution mixture was used. The extracted
oils were converted to methyl ester in usual manner by refluxing with methanolic sodium hydroxide
solution, boron trifluoride reagent and n-heptane (Official Methods of Analysis, 1997). The fatty acid
composition of the esterified oil was characterized and quantified using Varian Vista 3400 CX gas
chromatograph as described above.HP-INNOWAX (30m ×0.25mm) was used. The initial column
temperature was 210 oC and final temperature was 250 oC. The detector temperature was 300 C.
Hydrogen and air flows were 30 and 300 mL/min, respectively. Sample (0.5 mL of oil solutions1:10 in
hexane) Data were calculated using the normalized peak area percentages of fatty acids.
Free radical scavenging assay
Oil samples at 12.5,25,50,100 and 200 mg/ml and the standard antioxidants : vitamin C ,
vitamin E ,BHT and linoleic acid in the mixture of 95%(v/v) ethanol and 10%(v/v) DMSO (1:1) were
assayed for free radical scavenging activity by the DPPH method (Jung, B. K. et al., 2006). 100 μl of
samples or standards, 25 μl of 2mg/ml DPPH in 95% ethanol and 25 μl of 95%(v/v) ethanol were
mixed in 96-well microplates and incubated at room temperature (25C) for 30 min. The absorbance
was measured at 515 nm. The percentages of DPPH radical scavenging activity were calculated
according to the following equation: % DPPH radical scavenging activity = [A – B] x 100
A
where A is the absorbance of the control reaction (containing all reagents except the test
samples), and B is the absorbance of the test samples. Sample concentrations providing 50%
scavenging activity (SC50) was calculated from the graph plotted between free radical scavenging
inhibition percentages and the sample concentrations.
Tyrosinase inhibition assay
Oil samples at 200, 100, 50, 25 and 12.5 mg/ml and the standard antioxidants: vitamin C and
kojic acid were mixed with 5% (v/v) DMSO and assayed by the modified dopachrome method using
tyrosine as a substrate as previously described (Long et al., 2000). Briefly, 40 l of samples or
standards, 40 l of 0.1 mg/ml L-tyrosine, 50 l of 0.1 mg/ml mushroom tyrosinase and 80 l of 0.1M
phosphate buffer were added in 96-well microplates. The 5% (v/v) DMSO solution was used as a
negative control. The mixture was incubated at 37C for 60 min. Before and after incubation, the
amount of dopachrome produced in the reaction mixture was measured at 450 nm. The experiment
was done in triplicate. The percentages of tyrosinase inhibition were calculated according to the
following equation: % inhibition activity = [(A-B) - (C-D)] x 100
(A-B)
where A is the absorbance of the blank after incubation, B is the absorbance of the blank
before incubation, C is the absorbance of the sample after incubation, and D is the absorbance of the
sample before incubation. Sample concentrations providing 50% inhibition (IC50) were calculated
from the graph plotted between tyrosinase inhibition activity percentages and the concentrations
0/5000
Materials and MethodsThai native silkworm pupaesThe five varieties of the Thai native silkworm pupaes (Keawsakol, Nangnoi Si Sa Ket,Somrong, Nangleung, and Noneruesee) were collected during May-July 2007 and May-July 2008from Queen Sirikit Sericulture Center, Nakhon Rachasima and udonThani in Thailand.Preparation of oils from the Thai native silkworm pupaeThe five varieties of the Thai native silkworms were boiled at 100ºC until floating above thewater level. Then the water was drained, and the worms were roasted until reaching 8% of moisture.After that, the dried pupae were ground to powder. Oils from the powder were Soxhlet extractedusing a Soxhlet apparatus (Doneanu et al., 1997; Khobkol et al., 2002) and maceration extractedusing petroleum ether as a solvent (Nipha et al., 1997; Doneanu et al., 1997). For the soxhlet method,the dried pupae powder was boiled with petroleum ether at the ratio of 100 g of the powder to 300 mlof the solvent for 18 h in a Soxhlet apparatus. The extracted oils were filtered and the solvent wasevaporated by a rotary vacuum evaporator at 40°C. For the maceration methods, the powder wasadded into the petroleum ether at the ratio of 100 g of the powder to 750 ml of the solvent. Then, themixture was blended for 3 min and shaken at the speed of 200 rpm, 10ºC for 5 days. The extractedoils were filtered and the solvent was evaporated by a rotary vacuum evaporator at 40ºC. The oilsamples were kept at 4ºC until use.Determination of linoleic acid contentLinoleic acid (>99%) standard was obtained from Sigma-Aldrich (Chemie GmbH, Steinheim).Dissolve oils sample (1g) of free fatty acids in methanol and neutralize with the KOH solution.Evaporate the mixture under nitrogen. Add to the residue 0.1 ml of 2mM 18-crown-6 in acetonitrileand 0.1 ml 4-bromophenacyl bromide. Heat the mixture at 80 oC for 15 min in mixing gently severaltimes. Cool the vial. Then, the samples were determined by HPLC (Luna® C18 to micron 250x4.0 nmPhenomenex USA Column, LC1200 UV/VIS Detector and LC1100 HPLC pump) with the 90%(v/v)acetonitrile and 10%(v/v) of 0.1%(w/v) Trifluoroacetic acid, injection volume 10 μl, flow rate 1 ml/minwith the UV detector at 210 nm. The linoleic acid contents were calculated by comparing with thestandard linoleic acid (Sigma, Co., St. Louis, USA).Determination of fatty acidsFatty acid methyl esters (Aldrich, England) standard solution mixture was used. The extractedoils were converted to methyl ester in usual manner by refluxing with methanolic sodium hydroxidesolution, boron trifluoride reagent and n-heptane (Official Methods of Analysis, 1997). The fatty acidcomposition of the esterified oil was characterized and quantified using Varian Vista 3400 CX gaschromatograph as described above.HP-INNOWAX (30m ×0.25mm) was used. The initial columntemperature was 210 oC and final temperature was 250 oC. The detector temperature was 300 C.Hydrogen and air flows were 30 and 300 mL/min, respectively. Sample (0.5 mL of oil solutions1:10 inhexane) Data were calculated using the normalized peak area percentages of fatty acids.Free radical scavenging assayOil samples at 12.5,25,50,100 and 200 mg/ml and the standard antioxidants : vitamin C ,vitamin E ,BHT and linoleic acid in the mixture of 95%(v/v) ethanol and 10%(v/v) DMSO (1:1) wereassayed for free radical scavenging activity by the DPPH method (Jung, B. K. et al., 2006). 100 μl ofsamples or standards, 25 μl of 2mg/ml DPPH in 95% ethanol and 25 μl of 95%(v/v) ethanol weremixed in 96-well microplates and incubated at room temperature (25C) for 30 min. The absorbancewas measured at 515 nm. The percentages of DPPH radical scavenging activity were calculatedaccording to the following equation: % DPPH radical scavenging activity = [A – B] x 100Awhere A is the absorbance of the control reaction (containing all reagents except the testsamples), and B is the absorbance of the test samples. Sample concentrations providing 50%scavenging activity (SC50) was calculated from the graph plotted between free radical scavenginginhibition percentages and the sample concentrations.Tyrosinase inhibition assayOil samples at 200, 100, 50, 25 and 12.5 mg/ml and the standard antioxidants: vitamin C andkojic acid were mixed with 5% (v/v) DMSO and assayed by the modified dopachrome method usingtyrosine as a substrate as previously described (Long et al., 2000). Briefly, 40 l of samples orstandards, 40 l of 0.1 mg/ml L-tyrosine, 50 l of 0.1 mg/ml mushroom tyrosinase and 80 l of 0.1Mphosphate buffer were added in 96-well microplates. The 5% (v/v) DMSO solution was used as anegative control. The mixture was incubated at 37C for 60 min. Before and after incubation, theamount of dopachrome produced in the reaction mixture was measured at 450 nm. The experimentwas done in triplicate. The percentages of tyrosinase inhibition were calculated according to thefollowing equation: % inhibition activity = [(A-B) - (C-D)] x 100(A-B)where A is the absorbance of the blank after incubation, B is the absorbance of the blankbefore incubation, C is the absorbance of the sample after incubation, and D is the absorbance of thesample before incubation. Sample concentrations providing 50% inhibition (IC50) were calculatedfrom the graph plotted between tyrosinase inhibition activity percentages and the concentrations
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุและวิธีการไหมพื้นเมือง pupaes ห้าพันธุ์ของ pupaes ไหมพื้นเมืองไทย (Keawsakol, แน่งน้อยศรีสะเกษสำโรง, Nangleung และ Noneruesee) ถูกเก็บในช่วงเดือนพฤษภาคมถึงเดือนกรกฎาคมปี 2007 และเดือนพฤษภาคมถึงกรกฎาคม 2008 จากสมเด็จพระราชินีสิริกิติ์หม่อนไหมศูนย์จังหวัด นครราชสีมาและอุดรธานีในประเทศไทย. เตรียมของน้ำมันจากดักแด้ไหมพื้นเมืองห้าพันธุ์ของหนอนไหมพื้นเมืองของไทยถูกต้มที่100ºCจนลอยข้างต้นระดับน้ำ จากนั้นน้ำได้ระบายและเวิร์มที่ถูกคั่วจนกว่าจะถึง 8% ของความชื้น. หลังจากนั้น pupae แห้งมาบดเป็นผง น้ำมันจากผงเป็นวิธีการสกัดแบบสกัดโดยใช้เครื่องมือวิธีการสกัดแบบ (Doneanu et al, 1997;.. Khobkol, et al, 2002) และยุ่ยสกัดโดยใช้ปิโตรเลียมอีเทอร์เป็นตัวทำละลาย (นิภา, et al, 1997;.. Doneanu, et al, 1997) . สำหรับวิธีการวิธีการสกัดแบบ, ผงดักแด้แห้งต้มกับปิโตรเลียมอีเทอร์ในอัตราส่วน 100 กรัมของผง 300 มิลลิลิตรของตัวทำละลายเป็นเวลา18 ชั่วโมงในเครื่องมือวิธีการสกัดแบบ น้ำมันสกัดถูกกรองและตัวทำละลายที่ถูกระเหยด้วยเครื่องระเหยแบบหมุนสูญญากาศที่ 40 ° C สำหรับวิธีการยุ่ยผงที่ถูกเพิ่มเข้าไปในอีเธอร์ปิโตรเลียมในอัตรา 100 กรัมของผง 750 มล. ของตัวทำละลาย จากนั้นส่วนผสมที่ถูกผสมเป็นเวลา 3 นาทีและเขย่าที่ความเร็ว 200 รอบต่อนาทีของที่ 10 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วัน ที่สกัดน้ำมันถูกกรองและตัวทำละลายที่ระเหยได้โดยสูญญากาศเครื่องระเหยแบบหมุนที่40ºC น้ำมันตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ที่4ºCจนถึงการใช้งาน. การหาปริมาณกรดไลโนเลอิกกรดไลโนเลอิ (> 99%) มาตรฐานที่ได้รับจาก Sigma-Aldrich (Chemie GmbH, Steinheim). ละลายตัวอย่างน้ำมัน (1 กรัม) ของกรดไขมันอิสระในเมทานอลและต่อต้าน ด้วยโซลูชั่น KOH. ระเหยผสมภายใต้ไนโตรเจน เพิ่มไปยังตกค้าง 0.1 มิลลิลิตร 2mm 18 มงกุฎ-6 ใน acetonitrile และ 0.1 มล. 4 bromophenacyl โบรไมด์ ส่วนผสมความร้อนที่ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาทีในการผสมเบา ๆ หลายครั้ง ที่น่าสนใจขวด จากนั้นกลุ่มตัวอย่างที่ถูกกำหนดโดยวิธี HPLC (Luna® C18 เพื่อไมครอน 250x4.0 นาโนเมตรPhenomenex สหรัฐอเมริกาคอลัมน์ LC1200 UV / VIS ตรวจจับและ LC1100 ปั๊ม HPLC) กับ 90% (v / v) acetonitrile และ 10% (v / v) 0.1% (w / v) กรด TRIFLUOROACETIC ปริมาณการฉีด 10 ไมโครลิตรอัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาทีกับเครื่องตรวจจับรังสียูวีที่210 นาโนเมตร เนื้อหากรดไลโนเลอิกถูกคำนวณโดยการเปรียบเทียบกับกรดไลโนเลอิกมาตรฐาน (ซิกม่า จำกัด เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา). การกำหนดของกรดไขมันไขมันเมทิลเอสเตอร์ของกรด (ดิช, อังกฤษ) ผสมสารละลายมาตรฐานที่ใช้ ที่สกัดน้ำมันเปลี่ยนเมทิลเอสเตอร์ในลักษณะปกติโดยกรดที่มีโซเดียมไฮดรอกไซเมทานอลการแก้ปัญหาสารโบรอนtrifluoride และ n-heptane (Official วิธีการวิเคราะห์, 1997) กรดไขมันองค์ประกอบของน้ำมัน esterified ก็มีลักษณะและปริมาณการใช้ Varian Vista 3400 CX ก๊าซ chromatograph ตามที่อธิบายไว้ above.HP-INNOWAX (30m × 0.25mm) ถูกนำมาใช้ คอลัมน์เริ่มต้นที่อุณหภูมิ 210 องศาเซลเซียสเป็นอุณหภูมิและสุดท้ายคือ 250 องศาเซลเซียส เครื่องตรวจจับอุณหภูมิ 300 C. ไฮโดรเจนและกระแสอากาศ 30 และ 300 มิลลิลิตร / นาทีตามลำดับ ตัวอย่าง (0.5 มิลลิลิตรน้ำมัน solutions1: 10 ในเฮกเซน) ข้อมูลคำนวณโดยใช้อัตราร้อยละพื้นที่สูงสุดปกติของกรดไขมัน. ฟรีทดสอบการต้านอนุมูลตัวอย่างน้ำมันที่ 12.5,25,50,100 และ 200 mg / ml และสารต้านอนุมูลอิสระมาตรฐาน: วิตามินซี วิตามินอีบาทและกรดไลโนเลอิกในส่วนผสม 95% (v / v) เอทานอล 10% (v / v) DMSO (1: 1) ได้รับassayed สำหรับต้านอนุมูลอิสระโดยวิธี DPPH (จุง BK et al, ., 2006) 100 ไมโครลิตรของตัวอย่างหรือมาตรฐาน25 ไมโครลิตรของ 2mg / ml DPPH ในเอทานอล 95% และ 25 ไมโครลิตร 95% (v / v) เอทานอลได้รับการผสมใน96 หลุม microplates และบ่มที่อุณหภูมิห้อง (25C) เป็นเวลา 30 นาที . การดูดกลืนแสงวัดที่ 515 นาโนเมตร ร้อยละของกิจกรรมต้านอนุมูล DPPH ถูกคำนวณตามสมการต่อไปนี้:% ต้านอนุมูลอิสระ DPPH = [A - B] x 100 ที่เป็นการดูดกลืนแสงของการเกิดปฏิกิริยาควบคุม (ที่มีสารเคมีทั้งหมดยกเว้นการทดสอบตัวอย่าง) และ B คือการดูดกลืนแสงของตัวอย่างทดสอบ ความเข้มข้นของตัวอย่างให้ 50% ต้าน (SC50) ที่คำนวณได้จากกราฟพล็อตระหว่างขับอนุมูลอิสระเปอร์เซ็นต์การยับยั้งและความเข้มข้นของตัวอย่าง. ทดสอบการยับยั้ง Tyrosinase ตัวอย่างน้ำมันที่ 200, 100, 50, 25 และ 12.5 mg / ml และสารต้านอนุมูลอิสระมาตรฐาน: วิตามินซีและกรดโคจิกถูกผสมกับ5% (v / v) DMSO และ assayed โดยวิธี dopachrome ปรับเปลี่ยนโดยใช้ไทโรซีนเป็นสารตั้งต้นตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(Long et al., 2000) สั้น ๆ , 40 lของตัวอย่างหรือมาตรฐาน40 l 0.1 mg / ml L-tyrosine 50 l 0.1 mg / ไทโรซิเนเห็ดมล. และ 80 lของ 0.1M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ถูกเพิ่มเข้ามาใน 96 หลุม microplates 5% (v / v) การแก้ปัญหา DMSO ใช้เป็นที่ควบคุมเชิงลบ ส่วนผสมที่ถูกบ่มที่37C 60 นาที ก่อนและหลังการบ่มที่ปริมาณของ dopachrome ผลิตในผสมปฏิกิริยาวัดที่ 450 นาโนเมตร การทดลองได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่า เปอร์เซ็นต์การยับยั้งไทโรซิเนถูกคำนวณตามสมการต่อไปนี้: กิจกรรมการยับยั้ง% = [(AB) - (CD)] x 100 (AB) ซึ่งเป็นการดูดกลืนแสงของว่างหลังจากการบ่ม, B คือการดูดกลืนแสงของว่างก่อนบ่ม C มีการดูดกลืนแสงของกลุ่มตัวอย่างหลังจากการบ่มและ D เป็นการดูดกลืนแสงของตัวอย่างก่อนการบ่ม ความเข้มข้นของตัวอย่างให้ยับยั้ง 50% (IC50) จะถูกคำนวณจากพล็อตกราฟระหว่างร้อยละฤทธิ์ยับยั้งเอนไซม์tyrosinase และความเข้มข้น
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุและวิธีการ pupaes
ไทยไหมพื้นเมืองห้าพันธุ์ของคนไทย pupaes ( keawsakol ไหมพื้นเมืองพันธุ์นางน้อยศรีสะเกษ ,
สำโรง nangleung , และ noneruesee ) ได้รวบรวมในช่วงเดือนพฤษภาคม กรกฎาคม 2007 และกรกฎาคม 2008
จากศูนย์หม่อนไหมฯ ราชินี นครราชสีมา และอุดรธานี ประเทศไทย .
การเตรียมน้ำมันจาก ดักแด้หนอนไหมพื้นเมือง
ภาษาไทยห้าพันธุ์ของหนอนไหมพื้นเมืองมาต้มที่ 100 º C จนลอยอยู่เหนือ
ระดับน้ำ แล้วน้ำระบาย และหนอนที่ถูกย่างจนไปถึง 8 % ความชื้น
หลังจากนั้น ดักแด้แห้งดินผง น้ำมันจากเนื้อผงถูกสกัดโดยใช้เครื่องมือ 1
1 ( doneanu et al . , 1997 ; khobkol et al . , 2002 ) และระยะเวลาสกัด
โดยใช้ปิโตรเลียมอีเทอร์เป็นตัวทำละลาย ( nipha et al . , 1997 ; doneanu et al . , 1997 ) สำหรับวิธี Soxhlet
ดักแด้แห้ง , ผงต้มกับปิโตรเลียมอีเทอร์ในอัตราส่วน 100 กรัมของผง 300 ml
ของตัวทำละลาย 18 H ใน 1 เครื่อง สกัดน้ํามันถูกกรองและระเหยตัวทำละลายคือ
โดยระเหยแบบสุญญากาศ ที่อุณหภูมิ 40 องศา ให้ยุ่ยวิธีการ , ผง
เพิ่มลงในปิโตรเลียมอีเธอร์ ในอัตราส่วน 100 กรัมของผง 750 ml ของตัวทำละลาย งั้น
ผสมผสม 3 นาทีและเขย่าที่ความเร็ว 200 รอบต่อนาที 10 ºองศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วัน สกัดน้ํามันถูกกรองและตัวทำละลาย
นำมาระเหยโดยระเหยแบบสุญญากาศที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสºน้ำมัน
จำนวนไว้ที่ 4 º C จนกระทั่งใช้ ปริมาณกรดไลโนเลอิก
ไทยไหมพื้นเมืองห้าพันธุ์ของคนไทย pupaes ( keawsakol ไหมพื้นเมืองพันธุ์นางน้อยศรีสะเกษ ,
สำโรง nangleung , และ noneruesee ) ได้รวบรวมในช่วงเดือนพฤษภาคม กรกฎาคม 2007 และกรกฎาคม 2008
จากศูนย์หม่อนไหมฯ ราชินี นครราชสีมา และอุดรธานี ประเทศไทย .
การเตรียมน้ำมันจาก ดักแด้หนอนไหมพื้นเมือง
ภาษาไทยห้าพันธุ์ของหนอนไหมพื้นเมืองมาต้มที่ 100 º C จนลอยอยู่เหนือ
ระดับน้ำ แล้วน้ำระบาย และหนอนที่ถูกย่างจนไปถึง 8 % ความชื้น
หลังจากนั้น ดักแด้แห้งดินผง น้ำมันจากเนื้อผงถูกสกัดโดยใช้เครื่องมือ 1
1 ( doneanu et al . , 1997 ; khobkol et al . , 2002 ) และระยะเวลาสกัด
โดยใช้ปิโตรเลียมอีเทอร์เป็นตัวทำละลาย ( nipha et al . , 1997 ; doneanu et al . , 1997 ) สำหรับวิธี Soxhlet
ดักแด้แห้ง , ผงต้มกับปิโตรเลียมอีเทอร์ในอัตราส่วน 100 กรัมของผง 300 ml
ของตัวทำละลาย 18 H ใน 1 เครื่อง สกัดน้ํามันถูกกรองและระเหยตัวทำละลายคือ
โดยระเหยแบบสุญญากาศ ที่อุณหภูมิ 40 องศา ให้ยุ่ยวิธีการ , ผง
เพิ่มลงในปิโตรเลียมอีเธอร์ ในอัตราส่วน 100 กรัมของผง 750 ml ของตัวทำละลาย งั้น
ผสมผสม 3 นาทีและเขย่าที่ความเร็ว 200 รอบต่อนาที 10 ºองศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วัน สกัดน้ํามันถูกกรองและตัวทำละลาย
นำมาระเหยโดยระเหยแบบสุญญากาศที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสºน้ำมัน
จำนวนไว้ที่ 4 º C จนกระทั่งใช้ ปริมาณกรดไลโนเลอิก
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- หมายถึง สารไฮโดรคอลลอยด์ที่ทำให้เกิดเจล
- Known as the land of million elephants,
- Interaction orientation
- แปลภาษาอังกฤษเป็นไทย ออนไลน์ แปลภาษา แปล
- At ahoy ashrams mothers keep fast from s
- It was the pose of posture of the obedie
- อย่างที่หวังไว้
- The accounting discipline can be divided
- Have you dinner?
- แต่แค่กินอบ่างเดียวยังไม่พ่อ
- Highlights•Citral water-in-oil emulsion
- Qualification
- เกษตรเพาะปลูกสวนยาง
- เมื่อคืนจำไม่ได้
- I sent your money Check your account inf
- We also included: produced in BC, not ma
- When did Gloria to Cardiff
- completely
- Some is generally used in positive sente
- ที่ได้ยิน
- It is necessary for contemporary E-comme
- ได้มีการจัดทำโฆษณาสินค้า โดยเสนอเนื้อหาท
- The accounting discipline can be divided
- Acknowledgments
