Results and discussion
Hairy root cultures establishment and confirmation of transformation
In our preliminary study, the leaves from ex vitro mature plants and various ages of in vitro seedlings (7, 14, and 21 days old) were used as the initial explants to establish the hairy root cultures. The results showed that hairy roots could not be produced by culturing the mature leaves and explants older than 7 days (data not show). Therefore, 7-day-old seedlings were used for the co-cultivation with A. rhizogenes on MS medium supplemented with AS during the induction step. The leaves and epicotyls (infected with A. rhizogenes ATCC 43057) and cotyledons (infected with A. rhizogenes ATCC 15834) showed significantly higher responses for hairy root induction than other treatments (p = 0.05) after co-cultivation on semi-solid MS medium supplemented with 100 lM AS (Table 1). Previous studies indicated that the A. rhizogenes strain influenced the hairy root induction in addition to the explant parts (Pietrosiuk et al. 2006; Thimmaraju et al. 2008). Hairy roots were induced in young explants of Pueraria sp. when co-cultivated with the agropine-type strain (Shi and Kintzios 2003; Udomsuk et al. 2009), as observed in the present study. An appropriate concentration of AS promotes hairy root induction(Geng etal.2012),andthepercentageofhairy root induction was enhanced with the supplementation of 100 lM AS. The highest frequency of hairy root induction was 58.33 %, which was achieved when the leaves infected with ATCC 43057 were cultured on MS supplemented with 100 lM AS. Conversely, we found that 200 lM AS sup- pressed hairy root induction (Table 1). AS is a well-known phenolic compound that is involved in the T-DNA trans- duction of Agrobacterium
ผลและการอภิปราย
วัฒนธรรมรากขนจัดตั้งและนักโทษไฟ rmation ของการเปลี่ยนแปลง
ในการศึกษาเบื้องต้นของเราใบจากอดีตการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชเติบโตและทุกเพศทุกวัยต่าง ๆ ในหลอดทดลองต้นกล้า (7, 14, และ 21 วันเก่า) ถูกนำมาใช้เป็นชิ้นเริ่มต้นที่จะสร้างขน รากวัฒนธรรม ผลการศึกษาพบว่ารากขนไม่สามารถผลิตโดยการเพาะเลี้ยงใบแก่และชิ้นส่วนเก่ากว่า 7 วัน (ข้อมูลไม่แสดง) ดังนั้นต้นกล้า 7 วันเก่าที่ใช้ในการเพาะปลูกร่วมกับ A. rhizogenes บน MS กลางเสริมด้วย AS ในขั้นตอนการเหนี่ยวนำ ใบและ epicotyls (ติดเชื้อเอ rhizogenes ATCC 43057) และใบเลี้ยง (ติดเชื้อเอ rhizogenes ATCC 15834) พบว่ามีนัยสำคัญที่สูงขึ้นอย่างมีการตอบสนองในการชักนำรากขนกว่าการรักษาอื่น ๆ (p = 0.05) หลังจากร่วมการเพาะปลูกบนอาหารสูตร MS กึ่งของแข็ง เสริมด้วย LM 100 AS (ตารางที่ 1) ศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าเอ rhizogenes สายพันธุ์ในชั้น uenced เหนี่ยวนำรากขนนอกเหนือไปจากชิ้นส่วนชิ้น (Pietrosiuk et al, 2006;.. Thimmaraju et al, 2008) รากขนถูกเหนี่ยวนำให้เกิดในชิ้นหนุ่มกวาวเครือ SP เมื่อร่วมกับการเพาะปลูกสายพันธุ์ agropine ชนิด (ชิและ Kintzios 2003. อุดมสุข et al, 2009) เป็นที่สังเกตในการศึกษาในปัจจุบัน ความเข้มข้นที่เหมาะสมของ AS ส่งเสริมการเหนี่ยวนำรากขน (เกิง etal.2012), การเหนี่ยวนำราก andthepercentageofhairy ถูกปรับปรุงด้วยการเสริม LM 100 AS ความถี่สูงสุดของการเหนี่ยวนำรากขนเป็น 58.33% ซึ่งก็ประสบความสำเร็จเมื่อใบที่ติดเชื้อ ATCC 43057 เพาะเลี้ยงบน MS เสริมด้วย LM 100 AS ในทางกลับกันเราพบว่า 200 LM AS สนับสนุนกดเหนี่ยวนำรากขน (ตารางที่ 1) AS เป็นสารประกอบฟีนอลที่รู้จักกันดีว่ามีส่วนเกี่ยวข้องใน T-DNA ของทรานส์ duction Agrobacterium
การแปล กรุณารอสักครู่..