The efficiency of gene targeting by

The efficiency of gene targeting by integration
through homologous recombination (homologous integration,
HI) in the human pathogen Cryptococcus neoformans
remains unsatisfactory. In order to achieve a much more
efficient gene targeting system in C. neoformans, a new
double knockout strain in genes involved in the nonhomologous
end joining (NHEJ) pathway was constructed.
HI frequency was elevated by as much as approximately
fivefold in the single or double knockout strains in NHEJ
genes, and the frequency depended on the gene targeted.
None of the NHEJ gene knockouts showed significant
differences in regular growth, sensitivity to DNA-damaging
drugs or UV, and virulence compared to the wild-type
control, suggesting that the NHEJ pathway does not play a
significant role in these biological stresses in C. neoformans.
It was also suggested that the genes analyzed in this
study are components of a single NHEJ pathway, as the
mutants (including the double mutant) displayed the same
phenotypes.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประสิทธิภาพของยีนเป้าหมายโดยรวมผ่าน homologous recombination (homologous รวมHI) ในการศึกษามนุษย์ Cryptococcus neoformansอยู่เฉย ๆ เพื่อให้บรรลุอีกมากมายระบบการกำหนดเป้าหมายประสิทธิภาพยีนใน C. neoformans ใหม่คู่ชนะน็อกโดยเทคนิคสายพันธุ์ในยีนที่เกี่ยวข้องในการ nonhomologousสิ้นสุดการเข้าร่วมทางเดิน (NHEJ) ถูกสร้างขึ้นสวัสดี ความถี่ถูกยกระดับโดยมากเป็นประมาณfivefold เดียวหรือสองสายพันธุ์น่าพิศวงใน NHEJยีน และความถี่ขึ้นอยู่กับยีนที่เป็นเป้าหมายไม่มี knockouts ยีน NHEJ แสดงให้เห็นว่าสำคัญความแตกต่างในการเจริญเติบโตปกติ ความไวในการทำลายดีเอ็นเอยา หรือรังสียูวี และเมื่อเทียบกับป่าชนิด virulenceควบคุม การแนะนำว่า ทางเดิน NHEJ ไม่เล่นตัวบทบาทสำคัญในความเครียดเหล่านี้ชีวภาพใน C. neoformansเขายังแนะนำว่า วิเคราะห์ยีนนี้การศึกษาเป็นส่วนประกอบของทาง NHEJ มีวันเดินเดียว เป็นการสายพันธุ์ (mutant คู่รวม) แสดงว่าฟี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประสิทธิภาพของยีนที่กำหนดเป้าหมายโดยบูรณาการผ่านการรวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกัน (บูรณาการคล้ายคลึงกัน, ฮาวาย) ในการติดเชื้อ Cryptococcus neoformans มนุษย์ยังคงเป็นที่น่าพอใจ เพื่อที่จะประสบความสำเร็จมากขึ้นยีนที่มีประสิทธิภาพระบบการกำหนดเป้าหมายใน neoformans ซีใหม่สายพันธุ์ที่น่าพิศวงคู่ในยีนที่เกี่ยวข้องในnonhomologous ปลายเข้าร่วม (NHEJ) ทางเดินที่ถูกสร้างขึ้น. HI ความถี่สูงขึ้นได้มากถึงประมาณห้าเท่าในเดียวหรือสายพันธุ์ที่น่าพิศวงคู่ใน NHEJ ยีนและความถี่ขึ้นอยู่กับยีนเป้าหมาย. ไม่มี knockouts ยีน NHEJ แสดงให้เห็นอย่างมีนัยสำคัญที่แตกต่างกันในการเจริญเติบโตปกติความไวในการทำลายดีเอ็นเอยาเสพติดหรือรังสียูวีและความรุนแรงเมื่อเทียบกับป่าประเภทควบคุมบอกว่าทางเดิน NHEJ ไม่ได้เล่นบทบาทสำคัญในความเครียดทางชีวภาพเหล่านี้ในneoformans ซี. นอกจากนี้ยังชี้ให้เห็นว่ายีนที่วิเคราะห์ในการศึกษาเป็นส่วนหนึ่งของทางเดิน NHEJ เดียวเป็นมนุษย์กลายพันธุ์(รวมทั้งคู่กลายพันธุ์) ที่แสดงเดียวกันphenotypes .

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประสิทธิภาพของยีนเป้าหมายโดยรวม
ผ่านการโฮโมโลกัส ( ฟังก์ชันการรวม
สวัสดี ) ในมนุษย์เชื้อโรคบ้อหุ้น
ยังคงไม่เป็นที่น่าพอใจ เพื่อให้บรรลุประสิทธิภาพมากขึ้น
ยีนเป้าหมายในระบบ C neoformans สายพันธุ์ใหม่ , คู่มหัศจรรย์
ในยีนที่เกี่ยวข้องในตอนท้าย nonhomologous
เข้าร่วม ( nhej ) ทางเดินที่ถูกสร้างขึ้น .
หวัดดี ความถี่สูงโดยมากเป็นประมาณ
3 ในเดียวหรือสองสายพันธุ์ โดยใน nhej
ยีน และ ความถี่ขึ้นอยู่กับยีนเป้าหมาย ไม่มีของยีน knockouts nhej

เห็นความแตกต่างในการเจริญเติบโตปกติ ความไวของดีเอ็นเอเสียหาย
ยาเสพติดหรือ UV และความรุนแรงเมื่อเทียบกับการควบคุมของ
แนะนำว่า nhej ทางเดินไม่ได้เล่น
บทบาทใน neoformans เน้นชีวภาพเหล่านี้ใน C .
ก็ยังพบว่า ยีนที่ใช้ในการศึกษานี้เป็นส่วนประกอบของทางเดิน nhej

เดียว เป็นพวกกลายพันธุ์ ( รวมทั้ง double mutant ) การแสดงฟีโนไทป์เดียวกัน