Nile red staining was used in the m

Nile red staining was used in the microscopic observation
for a possible accumulation of intracellular PHA by the
isolated strain. Further confirmation of the presence of accumulated granule was made by fluorescence microscopy
(Figure 1). To investigate the effect of carbon sources on the production
of PHA, different carbon sources were provided at 1.5 %
(v/v) of oleic acid, sun flower oil and 60, 30, 20 mM (v/v) of caprylic acid, capric acid and undecylenic acid respectively in
standard PHA mineral medium. Figure 2a shows the time
course of biomass production (CDW) by the isolate with
different carbon sources. The microorganism utilized sun
flower oil, capric acid and oleic acid for growth, and biomass accumulation giving highest yield with oleic acid as substrate
after 96 h of incubation reaching up to 2.1 g/L CDW, followed by the fatty acid groups capric acid with 0.87 g/L
and sun flower oil 0.65 g/L, both after 96 h of cultivation. In
contrast with the other fatty acids tested, caprylic acid and
undecylenic acid were not a good substrate for microbial
growth, and no growth was detected after 96 h of cultivation. Although the strain Pseudomonas fluorescens SC4 used sun
flower oil and capric acid as carbon source in comparison with oleic acid, the selected substrates did not serve for the production of PHA, since no PHA has been detected on sun
flower and only 0.13 g/L was produced by capric acid as
shown on Figure 2b. Among the 5 tested substrates, the fatty
acid oleic oil proved to be the best substrates for PHA
accumulation. On 1.5 % oleic acid, the maximum yield of
PHA was obtained after 96 h of cultivation, with PHA
accumulating up to 0.67 g/L ~ 31.9 wt%. The ability of strain SC4 to utilize cheap carbon sources for PHA accumulation was investigated in 250 mL Erlenmeyer
flasks containing 50 ml of mineral medium in the presence of
linoleic acid. Cultures were incubated at 30
0C and 180 rpm, and samples were taken at different intervals under sterile
conditions for analysis. The figure 3a & b showed that the
strain was able to utilize the tested carbon source for growth. On 1.5% (v/v) linoleic acid, the maximum yield of PHA was obtained after 144 h of cultivation, with biomass reaching 6.7
g/L CDW and PHA accumulating to 2.96 g/L. The nitrogen
source (ammonium sulphate) was completely depleted after approx. 96 h coinciding with the time when the polymer started to be obtained. After 120 h of cultivation there was no
significant increase on biomass (CDW 6.7 g/L) as clarified
on Figure 3a, however comparing the results obtained for PHA production at this point (2.4 g/L), it was possible to
demonstrate an increase on polymer accumulation after this
time. A reasonable explanation for the long delay on cell
growth would be in the case of the used fatty acid; probably
in the beginning of the reaction there was difficult to metabolize the fatty acid due to composition of material. Significant PHA yields are shown in this study when
cultivating the tested strain SC4 in platform shaker, being the PHA accumulation of 26.7 wt%, 37.2 wt%, 38.9 wt% and
44.2 wt% recovered after 72, 96, 120 and 144 h of cultivation
(Figure 3b). Pseudomonas fluorescens SC4 was cultivated for 48 h in a modified mineral medium (as described in the section culture media and inoculum preparation), additional 1 g/L of yeast extract had been supplemented into fermentation to improve nutrient content and fatty acid uptake. Samples have been
taken for biomass and polymer measurement regularly after beginning of the experiment. To increase the production of
PHA, 3-L stirred bioreactor with 1-L working volume was considered using the optimal condition obtained from the Erlenmeyer flask scale (1.5% v/v linoleic acid as sole carbon
source). The CDW and PHA production as function of time
are shown in Figure 4. The batch system reached a steady
state with the CDW (6.75 g/L) and the maximum PHA (3.05
g/L) after 48 h, representing 45.2 wt% of accumulation. The strain started to accumulate biopolymer after 15 h of
fermentation, and increased until the end of the experiment. After the first sampling time (15 h) the polymer content reached 0.41 g/L with CDW 3.01 g/L (13.6 wt%) of CDM
from linoleic acid as a carbon source. The second sampling
lasted 24 h and the values were quantified as 3.95 g/L with
1.44 g/L, respectively CDW and PHA formation. A total
limitation of the nitrogen source was achieved after 18 h of
fermentation, extra ammonium sulphate (0.25 g/L) was added
into system after 24 h to enhance cell metabolism. After 36 h
of cultivation the CDW was quantified as 5.72 g/L with 41 wt% of PHA accumulation. Regarding the nitrogen
evolution, the extra addition of nitrogen was completely
consumed by the cells after 36 h of cultivation. Nuclear magnetic resonance analyses of the biopolymer produced in mineral medium supplemented with Linoleic
acid showed a qualitative evaluation of structural comp

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ย้อมสีไนล์สีแดงใช้ในการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์สำหรับสะสมเป็นไปได้ของผาภายในเซลล์โดยการสายพันธุ์ที่แยก ยืนยันต่อการปรากฏตัวของสะสมเม็ดทำ โดยกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง(รูปที่ 1) การตรวจสอบผลของแหล่งคาร์บอนในการผลิตของผา แหล่งคาร์บอนที่แตกต่างกันได้ที่ 1.5%(v/v) ของกรดโอเลอิก น้ำมันปาล์ม และ 60, 30, 20 มม. (v/v) ของกรด caprylic, capric กรด และกรด undecylenic ในตามลำดับมาตรฐานผาแร่ปานกลาง รูปที่ 2a แสดงเวลาหลักสูตรของการผลิตชีวมวล (CDW) โดย isolate ด้วยแหล่งคาร์บอนที่แตกต่างกัน จุลินทรีย์ที่ใช้แสงอาทิตย์น้ำมัน capric กรด และกรดโอเลอิก เจริญเติบโตและสะสมของชีวมวลที่ให้ผลผลิตสูงสุด ด้วยกรดโอเลอิกเป็นพื้นผิวหลังจาก h 96 ของบ่ม ถึงถึง 2.1 แยก CDW ตาม ด้วยกรด capric กลุ่มกรดไขมันกับ 0.87 g/Lและน้ำมันดอกทานตะวัน 0.65 g/L, h 96 ทั้งสองหลังการเพาะปลูก ในทดสอบความแตกต่างกับกรดไขมันอื่น ๆ กรด caprylic และกรด undecylenic ไม่ได้กับพื้นผิวที่ดีสำหรับจุลินทรีย์เติบโต และการเจริญเติบโตไม่ตรวจพบหลังจาก 96 ชั่วโมงการเพาะปลูก แม้ว่าสายพันธุ์ Pseudomonas fluorescens SC4 ใช้ซันน้ำมันและกรด capric เป็นแหล่งคาร์บอนเมื่อเปรียบเทียบกับกรดโอเลอิก พื้นผิวที่เลือกไม่มีบริการสำหรับการผลิตของผา ตั้งแต่ผาไม่พบบนดวงอาทิตย์ดอกไม้และเพียง 0.13 แยกผลิต โดย capric กรดเป็นแสดงในรูปที่ 2b ทดสอบพื้นผิว ไขมันที่ในหมู่ 5กรดโอเลอิคน้ำมันพิสูจน์แล้วว่าเป็นพื้นผิวที่ดีที่สุดสำหรับผาสะสม จาก 1.5% กรดโอเลอิก ผลผลิตสูงสุดของผาที่ได้รับหลังจาก 96 ชั่วโมงการเพาะปลูก มีผาสะสมถึง 0.67 แยก ~ 31.9 wt % รับการตรวจสอบความสามารถของสายพันธุ์ SC4 จะใช้แหล่งคาร์บอนราคาถูกสำหรับสะสมผา 250 ml Erlenmeyerขวดบรรจุ 50 มิลลิลิตรสารแร่ในประเทศของกรดไลโนเลอิก วัฒนธรรมที่ได้รับการกกน.0C และ 180 รอบต่อนาที และตัวอย่างถ่ายในช่วงเวลาที่แตกต่างกันภายใต้การเป็นหมันเงื่อนไขสำหรับการวิเคราะห์ รูป 3a & b แสดงให้เห็นว่าการสายพันธุ์ก็สามารถที่จะใช้แหล่งคาร์บอนผ่านการทดสอบการเจริญเติบโต บน 1.5% (v/v) กรดไลโนเลอิก ผลผลิตสูงสุดของผาได้รับหลังจากชมการเพาะปลูก 144.กับชีวมวลถึง 6.7แยก CDW และผาสะสมไป 2.96 g/l ไนโตรเจนแหล่งที่มา (แอมโมเนียมซัลเฟต) แก้ไขจนหมดหลังจากประมาณ 96 ชม. coinciding กับเวลาที่ลิเมอร์เริ่มจะได้รับ หลังจาก 120 ชม.ของการเพาะปลูกมีไม่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในชีวมวล (CDW 6.7 g/L) ชี้แจงบนรูป 3a การเปรียบเทียบผลได้รับการผลิตผาที่จุดนี้ (2.4 g/L), อย่างไรก็ตาม มันเป็นไปได้ที่จะแสดงให้เห็นถึงการเพิ่มขึ้นในพอลิเมอร์สะสมหลังจากนี้ครั้ง คำอธิบายที่เหมาะสมสำหรับการหน่วงเวลานานบนเซลล์เจริญเติบโตจะเป็นในกรณีของกรดไขมันใช้ คงในการเริ่มต้นของปฏิกิริยา ได้ยากต่อการเผาผลาญกรดไขมันเนื่องจากองค์ประกอบของวัสดุ แสดงผลผาสำคัญในที่นี้ศึกษาเมื่อเพาะปลูกสายพันธุ์ทดสอบ SC4 ในวัติแพลตฟอร์ม การสะสมผา 26.7 wt % 37.2 wt % 38.9 wt % และ44.2 wt %กู้คืนหลังจาก 72, 96, 120 และ 144 h ของการเพาะปลูก(รูปที่ 3b) Pseudomonas fluorescens SC4 ปลูกสำหรับ 48 ชั่วโมงในการแก้ไขแร่กลาง (ตามที่อธิบายไว้ในส่วนวัฒนธรรมสื่อและการเตรียม inoculum) มีการเสริมเพิ่ม 1 แยกสารสกัดจากยีสต์ในการหมักเพื่อเพิ่มปริมาณสารอาหารและดูดซึมกรดไขมัน ตัวอย่างได้ใช้สำหรับวัดชีวมวลและพอลิเมอร์อย่างสม่ำเสมอหลังจากจุดเริ่มต้นของการทดสอบ การเพิ่มการผลิตผา bioreactor กวน 3 L 1 ลิตรทำงานด้วยเป็นการใช้เงื่อนไขที่เหมาะสมที่ได้จากเครื่องชั่ง Erlenmeyer ขวด (1.5% v/v ไลโนเลอิกกรดเป็นคาร์บอนแต่เพียงผู้เดียวแหล่ง) ผลิต CDW และผาเป็นฟังก์ชันของเวลาจะแสดงในรูปที่ 4 ระบบชุดถึงความมั่นคงรัฐ CDW (6.75 g/L) และผาสูง (3.05g/L) หลังจาก 48 ชั่วโมง แทน 45.2 wt %ของสะสม สายพันธุ์เริ่มต้นสะสม biopolymer หลัง h 15 ของหมัก และเพิ่มขึ้นจนถึงจุดสิ้นสุดของการทดลอง หลังจากสุ่มตัวอย่างครั้งแรก (15 ชั่วโมง) เนื้อโพลิเมอร์ถึง 0.41 แยกกับ CDW 3.01 แยก (13.6 wt %) ของ CDMจากกรดไลโนเลอิกเป็นแหล่งคาร์บอน การสุ่มตัวอย่างสองกินเวลา 24 ชม.และค่าถูกวัดเป็น 3.95 g/L ด้วย1.44 แยก ลำดับ CDW และผาก่อตัว ทั้งหมดข้อจำกัดของแหล่งไนโตรเจนสำเร็จหลังจาก h 18 ของเพิ่มหมัก เพิ่มเติมแอมโมเนียมซัลเฟต (0.25 กรัม/ลิตร)เข้าสู่ระบบหลังจาก 24 ชั่วโมงเพื่อเพิ่มการเผาผลาญเซลล์ หลังจากชม. 36การเพาะปลูก CDW ถูกวัดเป็น 5.72 แยก 41 wt %ของสะสมผา เกี่ยวกับไนโตรเจนวิวัฒนาการ เสริมนอกเหนือจากไนโตรเจนได้อย่างสมบูรณ์บริโภค โดยเซลล์หลังจาก 36 ชั่วโมงของการเพาะปลูก เรโซแนนซ์แม่เหล็กนิวเคลียร์วิเคราะห์การ biopolymer ผลิตแร่ปานกลางเสริม ด้วยไลโนเลอิกแสดงให้เห็นว่าการประเมินผลเชิงคุณภาพของคอมพ์โครงสร้างกรด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม่น้ำไนล์ย้อมสีแดงที่ใช้ในกล้องจุลทรรศน์
สำหรับการสะสมเป็นไปได้ของ PHA เซลล์จาก
สายพันธุ์ที่แยก ยืนยันการปรากฏตัวของเม็ดสะสมถูกสร้างขึ้นโดยใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง
(รูปที่ 1) เพื่อศึกษาผลของแหล่งคาร์บอนในการผลิต
ของ PHA แหล่งคาร์บอนที่แตกต่างกันมีให้ที่ 1.5%
(v / v) ของกรดโอเลอิก, น้ำมันดอกทานตะวันและ 60, 30, 20 มิลลิเมตร (v / v) ของกรดไขมัน, capric กรดและกรด Undecylenic ตามลำดับใน
กลาง PHA แร่มาตรฐาน รูปที่ 2a แสดงเวลาที่
แน่นอนของการผลิตพลังงานชีวมวล (CDW) โดยแยกกับ
แหล่งคาร์บอนที่แตกต่างกัน จุลินทรีย์ใช้ดวงอาทิตย์
น้ำมันดอกไม้กรด capric และกรดโอเลอิกสำหรับการเจริญเติบโตและการสะสมสารชีวมวลให้ผลผลิตสูงสุดด้วยกรดโอเลอิกเป็นสารตั้งต้น
หลังจาก 96 ชั่วโมงของการบ่มเอื้อมมือขึ้นไป 2.1 กรัม / ลิตร CDW ตามด้วยกลุ่มกรดไขมันกรด capric กับ 0.87 กรัม / ลิตร
และน้ำมันดอกทานตะวัน 0.65 กรัม / ลิตรทั้งหลัง 96 ชั่วโมงของการเพาะปลูก ใน
ทางตรงกันข้ามกับกรดไขมันอื่น ๆ การทดสอบกรดไขมันและ
กรด Undecylenic ไม่ได้พื้นผิวที่ดีสำหรับจุลินทรีย์
เจริญเติบโตและการเจริญเติบโตไม่ถูกตรวจพบหลังจาก 96 ชั่วโมงของการเพาะปลูก แม้ว่าความเครียด Pseudomonas fluorescens SC4 ใช้ดวงอาทิตย์
น้ำมันดอกไม้และกรด capric เป็นแหล่งคาร์บอนในการเปรียบเทียบกับกรดโอเลอิกพื้นผิวที่เลือกไม่ได้ทำหน้าที่ในการผลิต PHA เนื่องจากไม่มี PHA ได้รับการตรวจพบบนดวงอาทิตย์
ดอกไม้และมีเพียง 0.13 กรัม / ลิตรเป็น ผลิตโดยกรด capric เป็น
ที่แสดงในรูปที่ 2b ในบรรดา 5 พื้นผิวการทดสอบไขมัน
กรดโอเลอิกน้ำมันพิสูจน์แล้วว่าเป็นพื้นผิวที่ดีที่สุดสำหรับการ PHA
สะสม ในกรดโอเลอิก 1.5% อัตราผลตอบแทนสูงสุดของ
PHA ได้หลังจาก 96 ชั่วโมงของการเพาะปลูกด้วย PHA
สะสมถึง 0.67 กรัม / ลิตร ~ 31.9% โดยน้ำหนัก ความสามารถของสายพันธุ์ SC4 การใช้ประโยชน์จากแหล่งคาร์บอนราคาถูกสำหรับการสะสม PHA ถูกสอบสวนใน 250 มล Erlenmeyer
ขวดมี 50 มล. ของกลางแร่ในที่ที่มี
กรดไลโนเลอิก วัฒนธรรมที่ถูกบ่มวันที่ 30
0C และ 180 รอบต่อนาทีและถูกนำตัวอย่างในช่วงเวลาที่แตกต่างกันภายใต้หมัน
เงื่อนไขสำหรับการวิเคราะห์ เครื่อง 3A รูป & B พบว่า
สายพันธุ์ก็สามารถที่จะใช้ประโยชน์จากแหล่งคาร์บอนทดสอบสำหรับการเจริญเติบโต 1.5% (v / v) กรดไลโนเลอิกผลผลิตสูงสุดของ PHA ได้รับหลังจาก 144 ชั่วโมงของการเพาะปลูกที่มีชีวมวลถึง 6.7
กรัม / ลิตร CDW และ PHA สะสม 2.96 กรัม / ลิตร ไนโตรเจน
แหล่งที่มา (แอมโมเนียมซัลเฟต) คือการหมดลงอย่างสมบูรณ์หลังจากประมาณ 96 ชั่วโมงประจวบกับเวลาที่ลิเมอร์เริ่มต้นที่จะได้รับ หลังจาก 120 ชั่วโมงของการเพาะปลูกก็ไม่มี
การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในชีวมวล (CDW 6.7 กรัม / ลิตร) ชี้แจง
ในรูป 3a แต่เมื่อเปรียบเทียบกับผลที่ได้รับสำหรับการผลิต PHA ที่จุดนี้ (2.4 กรัม / ลิตร) มันเป็นไปได้ที่จะ
แสดงให้เห็นถึงการเพิ่มขึ้นของ การสะสมพอลิเมอหลังจากนี้
เวลา คำอธิบายที่เหมาะสมสำหรับการใช้เวลานานในเซลล์
เจริญเติบโตจะเป็นในกรณีของกรดไขมันที่ใช้; อาจจะเป็น
จุดเริ่มต้นของการเกิดปฏิกิริยาที่มีก็ยากที่จะเผาผลาญกรดไขมันเนื่องจากองค์ประกอบของวัสดุ อัตราผลตอบแทน PHA อย่างมีนัยสำคัญที่แสดงอยู่ในการศึกษาครั้งนี้เมื่อ
ปลูกฝัง SC4 สายพันธุ์ทดสอบในแพลตฟอร์มปั่นเป็นสะสม PHA 26.7% โดยน้ำหนัก 37.2 น้ำหนัก%, 38.9% โดยน้ำหนักและ
44.2% โดยน้ำหนักกู้คืนหลังจาก 72, 96, 120 และ 144 ชั่วโมงของการเพาะปลูก
(รูปที่ 3b) Pseudomonas fluorescens SC4 ได้รับการปลูกฝังเป็นเวลา 48 ชั่วโมงในกลางแร่ปรับเปลี่ยน (ตามที่อธิบายไว้ในส่วนสื่อวัฒนธรรมและการเตรียมหัวเชื้อ) อีก 1 กรัม / ลิตรของสารสกัดจากยีสต์ได้รับการเสริมเข้าไปในการหมักเพื่อปรับปรุงปริมาณสารอาหารและการดูดซึมกรดไขมัน ตัวอย่างที่ได้รับการ
ดำเนินการสำหรับชีวมวลและพอลิเมอวัดเป็นประจำหลังจากการเริ่มต้นของการทดลอง เพื่อเพิ่มการผลิตของ
PHA 3-L หมักแบบกวนที่มีปริมาณการทำงาน 1-L ได้รับการพิจารณาโดยใช้เงื่อนไขที่ดีที่สุดที่ได้รับจากขวดขนาด Erlenmeyer (กรดไลโนเลอิก v / V 1.5% เป็นคาร์บอน
แหล่งที่มา) CDW และ PHA ผลิตเป็นหน้าที่ของเวลา
จะแสดงในรูปที่ 4 ระบบชุดถึงความมั่นคง
ของรัฐกับ CDW (6.75 กรัม / ลิตร) และ PHA สูงสุด (3.05
กรัม / ลิตร) หลังจาก 48 ชั่วโมงคิดเป็น 45.2% ของน้ำหนัก ขุม สายพันธุ์เริ่มต้นที่จะสะสม biopolymer หลังจาก 15 ชั่วโมงของ
การหมักและเพิ่มขึ้นจนถึงจุดสิ้นสุดของการทดลอง หลังจากเวลาการสุ่มตัวอย่างครั้งแรก (15 ชั่วโมง) เนื้อหาพอลิเมอถึง 0.41 กรัม / ลิตรกับ CDW 3.01 กรัม / ลิตร (13.6% โดยน้ำหนัก) ของ CDM
จากกรดไลโนเลอิกเป็นแหล่งคาร์บอน กลุ่มตัวอย่างที่สอง
กินเวลา 24 ชั่วโมงและค่านิยมที่ถูกวัดเป็น 3.95 กรัม / ลิตรกับ
1.44 กรัม / ลิตรตามลำดับ CDW และการก่อ PHA รวม
ข้อ จำกัด ของแหล่งไนโตรเจนก็ประสบความสำเร็จหลังจาก 18 ชั่วโมงของ
การหมักปุ๋ยแอมโมเนียมซัลเฟตพิเศษ (0.25 กรัม / ลิตร) ถูกเพิ่ม
เข้าไปในระบบหลังจาก 24 ชั่วโมงเพื่อเพิ่มการเผาผลาญของเซลล์ หลังจาก 36 ชั่วโมง
ของการเพาะปลูก CDW ถูกวัดเป็น 5.72 กรัม / ลิตรกับ 41% โดยน้ำหนักของการสะสม PHA เกี่ยวกับไนโตรเจน
วิวัฒนาการนอกจากนี้พิเศษของไนโตรเจนสมบูรณ์
บริโภคโดยเซลล์หลังจาก 36 ชั่วโมงของการเพาะปลูก วิเคราะห์แม่เหล็กนิวเคลียร์ของโพลิเมอร์ชีวภาพที่ผลิตในกลางเสริมด้วยแร่ไลโนเลอิ
กรดแสดงให้เห็นว่าการประเมินคุณภาพของ comp โครงสร้าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปลานิลสีแดงย้อมที่ใช้ในการสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์เพื่อที่สุดการสะสมเซลล์ของผาโดยแยกสายพันธุ์ การยืนยันต่อไปของการแสดงตนของทรายที่สะสมได้ด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์( รูปที่ 1 ) เพื่อศึกษาผลของแหล่งคาร์บอนต่อการผลิตของผา , แหล่งคาร์บอนที่แตกต่างกันมีให้ที่ 1.5 เปอร์เซ็นต์( v / v ) ของกรดโอเลอิก , Sun น้ำมันดอกไม้และ 60 , 30 , 20 มิลลิเมตร ( v / v ) ลิคและกรดคาปริก undecylenic ตามลำดับในกรดผา แร่มาตรฐานขนาดกลาง รูปที่ 2A แสดงเวลาหลักสูตรการผลิตมวลชีวภาพ ( CDW ) โดยแยกกับแหล่งคาร์บอนที่แตกต่างกัน จุลินทรีย์ที่ใช้ดวงอาทิตย์น้ำมันดอกไม้ กรดคาพริกและกรดโอเลอิก การเจริญเติบโต และการให้ผลผลิต การสะสมมวลชีวภาพสูงสุดที่มีกรดโอเลอิกเป็นสับสเตรทหลังจากบ่มถึง 96 ชั่วโมงถึง 2.1 กรัม / ลิตร CDW รองลงมา คือ กลุ่มกรดไขมันคาพริกกรด 0.87 กรัม / ลิตรและน้ำมันดอกทานตะวัน 0.65 กรัมต่อลิตร ทั้งหลัง 96 H ของการเพาะปลูก ในเทียบกับอื่น ๆกรดไขมัน กรดคาพริลิก และทดสอบundecylenic กรดไม่ได้ตั้งต้นที่ดีสำหรับจุลินทรีย์การเติบโต และไม่มีการตรวจพบหลังจาก 96 H ของการเพาะปลูก ถึงแม้ว่าสายพันธุ์ Pseudomonas fluorescens sc4 ใช้ดวงอาทิตย์และกรดคาปริกน้ำมันดอกไม้เป็นแหล่งคาร์บอนในการเปรียบเทียบกับกรดโอเลอิก เลือกพื้นผิวที่ไม่ได้ใช้ในการผลิต PHA เนื่องจากไม่มีผาได้รับการตรวจพบในดวงอาทิตย์ดอกไม้และเพียง 0.13 กรัม / ลิตรที่ผลิตจากกรดคาปริกแสดงในรูปที่ 2B ในหมู่ 5 ทดสอบพื้นผิว , ไขมันน้ำมันกรดโอเลอิกพิสูจน์ให้เป็นที่ดีที่สุดพื้นผิวสำหรับผาการสะสม บน 1.5 % กรดโอเลอิก และให้ผลผลิตสูงสุดของผาได้หลัง 96 H ของการเพาะปลูก กับผาสะสมถึง 0.67 กรัม / ลิตร ~ 31.9 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก ความสามารถของ sc4 สายพันธุ์ที่จะใช้แหล่งคาร์บอนราคาถูกสำหรับการสะสม PHA ถูกสอบสวนในเออร์เลนเมเยอร์ 250 ml .ขวดบรรจุ 50 ml ของแร่ขนาดกลาง ต่อหน้ากรดไลโนเลอิก วัฒนธรรมที่อุณหภูมิ 30อัล 180 รอบต่อนาทีและตัวอย่างถ่ายที่แตกต่างกันช่วงเวลาภายใต้ปลอดเชื้อเงื่อนไขสำหรับการวิเคราะห์ รูปที่ 3A & B พบว่าความเครียดสามารถใช้ทดสอบแหล่งคาร์บอนสำหรับการเจริญเติบโต บน 1.5 % ( v / v ) กรดไขมันให้ผลของผาได้หลังจาก 144 H ระบบถึง 6.7 ของการเพาะปลูกกรัม / ลิตรและ CDW ผาสะสมไนโตรเจน 2.96 กรัม / ลิตรแหล่งที่มา ( แอมโมเนียมซัลเฟต ) คือหมดแล้วหลังจากที่ประมาณ 96 H ประจวบกับเวลาที่พอลิเมอร์เริ่มที่จะได้รับ หลังจาก 120 H เพาะไม่มีเพิ่มอย่างมีนัยสำคัญต่อชีวมวล ( CDW 6.7 กรัม / ลิตรเป็นพยนต์ในรูปที่ 3A , อย่างไรก็ตามการเปรียบเทียบผลลัพธ์ที่ได้กับการผลิตผา ณจุดนี้ ( 5 กรัม / ลิตร มันเป็นไปได้แสดงให้เห็นถึงการสะสมเพิ่มขึ้นบนพอลิเมอร์ หลังจาก นี้เวลา คำอธิบายที่สมเหตุสมผลสำหรับการล่าช้าในเซลล์การเจริญเติบโตจะเป็นในกรณีของการใช้กรดไขมัน อาจในการเริ่มต้นของปฏิกิริยานั้นก็ยากที่จะเผาผลาญกรดไขมันเนื่องจากองค์ประกอบของวัสดุ ผลผลิตผาสําคัญแสดงในการศึกษานี้เมื่อปลูกทดสอบสายพันธุ์ sc4 ในเครื่องปั่น แพลตฟอร์ม เป็นผาสะสม 26.7 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก 37.2 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก , 38.9 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก และ44.2 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนักหาย หลัง 72 , 83 , 120 และ 144 H ของการเพาะปลูก( รูปที่ 3B ) Pseudomonas fluorescens sc4 ถูกปลูก 48 ชั่วโมง โดยแร่ขนาดกลาง ( ตามที่อธิบายในส่วนวัฒนธรรมสื่อและการเตรียมเชื้อ ) , เพิ่มเติม 1 กรัม / ลิตรสารสกัดจากยีสต์ในการหมักได้เสริมเพื่อเพิ่มธาตุอาหาร และกรดไขมันต่างๆ . ตัวอย่างได้ถ่ายน้ำหนักและการวัดพอลิเมอร์เป็นประจำหลังจากที่เริ่มต้นของการทดลอง เพื่อเพิ่มการผลิตของผา , 3-l กวนแบบ 1-l ทำงานกับปริมาณถือว่าโดยใช้สภาวะที่เหมาะสมได้จากเออร์เลนเมเยอร์ ( ขวดขนาด 1.5 % v / v กรด linoleic เป็นคาร์บอนแต่เพียงผู้เดียวแหล่งที่มา ) ที่ CDW และการผลิตผาเป็นฟังก์ชันของเวลาแสดงในรูปที่ 4 ระบบชุดได้มั่นคงรัฐกับ CDW ( 6.75 กรัม / ลิตร ) และสูงสุด ( 3.05 ผาg / L ) หลังจาก 48 ชั่วโมง แทน 45.2 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนักของการสะสม ความเครียดเริ่มสะสมแบบหลัง 15 H จากการหมักและเพิ่มขึ้น จนสิ้นสุดการทดลอง หลังแรก จำนวนเวลา ( 15 ชั่วโมง ) พอลิเมอร์ถึง 0.41 กรัม / ลิตร CDW 3.01 กรัม / ลิตร ( 13.6 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก ) ที่จากกรดไขมันเป็นแหล่งคาร์บอน . ตัวอย่างที่สองเวลา 24 ชั่วโมง และ ค่าปริมาณ 3.95 กรัม / ลิตรเป็น1.44 กรัมต่อลิตร CDW และการพัฒนาผา . รวมข้อจำกัดของแหล่งไนโตรเจนพบว่าหลังจาก 18 H จากการหมัก , ซัลเฟตแอมโมเนียมเสริม ( 0.25 กรัม / ลิตร ) เพิ่มในระบบหลังจาก 24 ชั่วโมงเพื่อเพิ่มการเผาผลาญของเซลล์ หลังจาก 36 ชม.เพาะที่ CDW ถูก quantified เป็น 5.72 กรัม / ลิตร 41 เปอร์เซ็นต์สะสมของผา . เกี่ยวกับไนโตรเจนวิวัฒนาการ นอกจากนี้พิเศษของไนโตรเจนทั้งหมดใช้โดยเซลล์หลังจาก 36 ชั่วโมงของการเพาะปลูก นิวเคลียร์แมกเนติกเรโซแนนซ์การวิเคราะห์แร่แบบที่ผลิตในอาหารสูตร MS ที่เสริมด้วยที่สุดกรดมีการประเมินเชิงคุณภาพของโครงสร้าง .