Native polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) was conducted
to examine the effect of SC on tyrosinase activity. Tyrosinase,
SC and acetate buffer (0.2 M, pH 4.6) were mixed in a tube
to reach final concentrations of 33 U/mL tyrosinase and 0, 0.3,
0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0 or 5.0 mM SC. The tube was vortexed and theincubated at 25 C for 30 min. Next, bromophenol blue (0.001%, w/
v) and glycerol (0.05%, v/v) were mixed in the tube, and 20 lL of the
mixture was loaded onto the wells of a pre-cast gel. Electrophoresis
was carried out at 4 C using a Mini PROTEAN system (Bio-Rad,
Hercules, CA), with Tris–Glycine (pH 8.3) as a running buffer. After
running electrophoresis, the gel was dipped in a solution containing
0.2 M NaH2PO4, 0.2 M Na2HPO4, 0.1 M citric acid and 20 mM
catechol. The PPO activity was located in the gel, based on its reaction
with catechol.
วิธี electrophoresis เจ polyacrylamide เจ้า (หน้า)ตรวจสอบผลของ SC กิจกรรม tyrosinase Tyrosinaseบัฟเฟอร์ acetate และ SC (0.2 M, pH 4.6) ถูกผสมกันในหลอดถึงความเข้มข้นสุดท้ายของ tyrosinase U/mL 33 และ 0, 0.30.5, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0 หรือ 5.0 มม. SC. หลอดเป็น vortexed และ theincubated ที่ 25 C สำหรับ 30 นาที ถัดไป bromophenol blue (0.001% พร้อมv) และกลีเซอร (0.05%, v/v) ที่ผสมในท่อ และ 20 จะของส่วนผสมถูกโหลดลงในบ่อของเจหล่อก่อน Electrophoresisได้ดำเนินการที่ใช้ระบบมินิ PROTEAN (ไบ-Rad, C 4เฮอร์คิวลิส CA), กับทริสเรทติ้ง – Glycine (pH 8.3) เป็นบัฟเฟอร์ที่ทำ หลังจากทำ electrophoresis เจถูกจุ่มลงในโซลูชันที่ประกอบด้วย0.2 M NaH2PO4, 0.2 M Na2HPO4 กรดซิตริก 0.1 M และ 20 มม.catechol ตั้งอยู่ในเจ ขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาของกิจกรรม PPOมี catechol
การแปล กรุณารอสักครู่..

ข่าวคราวพื้นเมืองอะคริเลต (หน้า)
ได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบผลกระทบของเอสซีกับกิจกรรมไทโรซิเน Tyrosinase,
SC และบัฟเฟอร์อะซิเตท (0.2 M ค่า pH 4.6)
ผสมในหลอดที่จะไปถึงความเข้มข้นสุดท้ายของ33 U / มิลลิลิตรและไทโรซิเน 0, 0.3,
0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0 หรือ 5.0 มิลลิ SC หลอดที่ได้รับการ vortex และ theincubated ที่ 25 C เป็นเวลา 30 นาที ถัดไป bromophenol สีฟ้า (0.001% w /
V) และกลีเซอรอล (0.05% v / v) ถูกผสมในหลอดและ 20 LL
ของส่วนผสมที่ถูกโหลดลงหลุมของเจลก่อนโยน electrophoresis
ได้ดำเนินการที่ 4 C โดยใช้ระบบ Protean มินิ (Bio-Rad,
ดาว, CA) กับทริส-Glycine (pH 8.3) เป็นกันชนทำงาน หลังจากที่ทำงาน electrophoresis เจลที่ถูกจุ่มลงในสารละลายที่มี 0.2 M NaH2PO4 0.2 M Na2HPO4 0.1 M กรดซิตริกและ 20 มิลลิcatechol กิจกรรม PPO ตั้งอยู่ในเจลขึ้นอยู่กับปฏิกิริยากับcatechol
การแปล กรุณารอสักครู่..

พื้นเมือง polyacrylamide gel electrophoresis ( หน้า ) มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของ SC
กิจกรรมไทโรซิเนส . ไท โรซิเนส
SC และอะซิเตทบัฟเฟอร์ ( , 0.2 M pH 4.6 ) มาผสมในท่อ
ถึงความเข้มข้นสุดท้าย 33 U / ml ไทโรซิเนส และ 0 , 0.3 ,
0.5 , 1.0 , 1.5 , 2.0 , 3.0 และ 5.0 มม. ( หลอดและเป็น vortexed theincubated ที่ 25 C เป็นเวลา 30 นาที ถัดไป , โบรโมฟีนสีฟ้า ( 0.001 % W /
5 ) และกลีเซอรอล ( 0.05 % v / v ) มาผสมในท่อ และ 20 จะผสม
โหลดลงในบ่อของเจลหล่อก่อน วิธีดำเนินการที่
4 C ใช้ Mini ซึ่งเปลี่ยนแปลงได้มากระบบชีวภาพราด
, Hercules , CA ) กับบริษัท และไกลซีน ( pH 8.3 ) เป็นวิ่งบัฟเฟอร์ หลังจาก
วิ่งเรส เจลที่ถูกจุ่มลงในสารละลายที่มี
0.2 M nah2po4 0.2 M na2hpo4 0.1 M citric acid และ 20 mm
แคติคอล . PPO กิจกรรมอยู่ในเจล ขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาของแคติคอล
.
การแปล กรุณารอสักครู่..
