SHV, TEM, CTX-M single PCR amplific

SHV, TEM, CTX-M single PCR amplification
To confirm the results obtained by the multiplex
PCR amplification, three single PCR amplification assays
were carried out targeting the SHV, TEM and
CTX-M genes, respectively, using 10 pmol of each
gene-specific primer as given in Table 2 and a HotStarTaq-Master
mix (Qiagen) in a final reaction volume of
25 ml. PCR amplification conditions were as follows:
initial denaturation step at 95 æC for 15 min; 30 cycles
of denaturation at 94 æC for 30 s, annealing at 56 æC for
blaSHV, 50 æC for blaTEM, and 58 æC for CTX-M U1/

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

SHV, TEM กระบือเดียว CTX-Mเมื่อต้องการยืนยันผลลัพธ์ที่ได้จากการมัลติเพล็กซ์กระบือ สามเดี่ยว assays ขยาย PCRดำเนินการกำหนดเป้าหมาย SHV, TEM และCTX M ยีน ตามลำดับ โดยใช้ 10 pmol ของแต่ละไพรเมอร์ของยีนเฉพาะที่กำหนดในตารางที่ 2 และแบบ HotStarTaqผสม (Qiagen) ในปฏิกิริยาสุดท้ายระดับ25 ml. PCR ขยายเงื่อนไขดังต่อไปนี้:ขั้นตอนการแปรสภาพเริ่มต้นที่ 95 æC 15 นาที 30 รอบการแปรสภาพที่ æC 94 30 s หลอมที่ 56 æC สำหรับblaSHV, æC 50 สำหรับ blaTEM และ æC 58 สำหรับ U1 CTX-M /

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

SHV, TEM, CTX-M เดียวขยาย PCR
เพื่อยืนยันผลที่ได้รับจาก multiplex
PCR ขยายสามเดียว PCR ตรวจขยาย
ได้ดำเนินการกำหนดเป้าหมาย SHV, TEM และ
ยีน CTX-M ตามลำดับโดยใช้ 10 pmol ของแต่ละ
ยีนเฉพาะ ไพรเมอร์ตามที่กำหนดในตารางที่ 2 และ HotStarTaq-Master
ผสม (Qiagen) ในปริมาณปฏิกิริยาสุดท้ายของ
25 มล. PCR เงื่อนไขขยายมีดังนี้
ขั้นตอน denaturation เริ่มต้นที่ 95 AEC นาน 15 นาที; 30 รอบ
ของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 94 AEC เป็นเวลา 30 วินาที, การอบที่ 56 AEC สำหรับ
blaSHV โดย 50 AEC สำหรับ blaTEM และ 58 AEC สำหรับ CTX-M U1 /

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

shv TEM ( , , ) ctx-m เดี่ยวเพื่อยืนยันผลที่ได้จากระบบมัลติเพล็กซ์( 3 ) , ( PCR ) เดี่ยวครั้งนี้เป้าหมาย shv tem , และยีน , ctx-m ตามลำดับ โดยใช้ 10 pmol ของแต่ละยีนที่เฉพาะเจาะจงเช่นตามที่ กำหนดในรางที่ 2 และอาจารย์ hotstartaqผสม ( เพิ่ม ) ในสุดท้ายปฏิกิริยา ปริมาณของ25 มล. ) ( เงื่อนไข ดังนี้เริ่มต้น ( ขั้นตอนที่ 95 æเป็นเวลา 15 นาที ; 30 รอบของ ( ที่ 94 æเป็นเวลา 30 วินาที annealing ที่ 56 æ C สำหรับblashv 50 æ C blatem และ 58 æ ctx-m U1 C /