Stocks of ferricWT (as a negative c

Stocks of ferricWT (as a negative control), T111H, and L75H CtrHbs
were prepared either from lyophilized protein, or, in the case of L75H
CtrHb, from freshly purified protein. A 5-fold excess of cyanide was
added to each sample, followed by 20–30 min incubation at room
temperature to ensure saturation of the heme site. An excess of DT
(200- to 500-fold for optical samples or 3- to 13-fold for NMR samples)
was then added to the solutions. Cyanomet CtrHb samples were
incubated for ~3–8 h (WT and T111H) or ~0.5–2 h (L75H) and then
oxidized by exposure to air or potassium ferricyanide. Aliquots of thetotal samples were saved at different stages of the process for optical
characterization.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หุ้นของ ferricWT (เป็นตัวควบคุมเชิงลบ) T111H และ CtrHbs L75H
ได้จัดทำอย่างใดอย่างหนึ่งจากโปรตีนแห้งหรือในกรณีของ L75H
CtrHb จากโปรตีนบริสุทธิ์สดใหม่ ส่วนที่เกิน 5 เท่าของไซยาไนด์ที่ถูก
เพิ่มเข้ามาในแต่ละตัวอย่างตามด้วย 20-30 นาทีบ่ม ณ ห้อง
อุณหภูมิเพื่อให้แน่ใจว่าการอิ่มตัวของเว็บไซต์ heme ส่วนที่เกินจาก DT
(200 ถึง 500 เท่าสำหรับตัวอย่างแสงหรือ 3 ถึง 13 เท่าสำหรับตัวอย่าง NMR)
จากนั้นก็เข้ามาอยู่ในการแก้ปัญหา ตัวอย่าง Cyanomet CtrHb ถูก
บ่ม ~ 3-8 ชั่วโมง (น้ำหนักและ T111H) หรือ ~ 0.5-2 ชั่วโมง (L75H) แล้ว
ออกซิไดซ์โดยการสัมผัสกับอากาศหรือโพแทสเซียม ferricyanide aliquots ตัวอย่าง thetotal ถูกบันทึกไว้ในแต่ละขั้นตอนของกระบวนการในการออปติคอล
ตัวละคร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หุ้นของ ferricwt ( เป็นตัวควบคุมเชิงลบ ) , t111h และ l75h ctrhbs
เตรียมจากโปรตีน โปรตีน หรือในกรณีของ l75h
ctrhb จากโปรตีนบริสุทธิ์สด . ผู้อื่นเป็นส่วนเกินของไซยาไนด์
เพิ่มแต่ละตัวอย่าง ตามด้วย 20 – 30 นาที บ่มที่อุณหภูมิห้อง
ให้ความอิ่มตัวของฮีมเว็บไซต์ ส่วนเกินของ DT
( 200 - 500 พับแสง ตัวอย่าง หรือ 3 - 13 พับสำหรับตัวอย่าง NMR )
จากนั้นเพิ่มโซลูชั่น cyanomet ตัวอย่าง ctrhb )
) ~ 3 – 8 H ( WT และ t111h ) หรือ H ( ~ 0.5 - 2 l75h ) แล้ว โดยการสัมผัสกับอากาศ
ออกซิไดซ์หรือโพแทสเซียมเฟอร์ริกไซนาไนด์ . เฉยๆของกลุ่มตัวอย่างจำนวนถูกบันทึกไว้ในแต่ละขั้นตอนของกระบวนการแสง
ตัวละคร