A puzzling observation concerning t

A puzzling observation concerning the mechanism of action of neurotoxic PLA2s had been the lack of correlation between enzymatic activity in vitro and neurotoxicity in vivo and on nerve-muscle preparations. Such lack of correlation was particularly intriguing in the light of evidence that catalytic activity was required for the action of these toxins and that the products of phospholipids hydrolysis, particularly lysophospholipids were able to reproduce the action of b-neurotoxins at the nerve terminal. Cesare Montecucco and colleagues, at the University of Padova, addressed this complex issue in several publications using various b-neurotoxins of variable potency and quaternary structure. A relevant step forward in their studies was the use of granular neurons of the cerebellum in cell culture as a model to investigate the action of neurotoxic PLA2s. It was shown that b-neurotoxins induced well-defined bulgings in axon and dendrite terminals of these neurons, and demonstrated that such alteration was associated with increments in cytosolic Ca2þ levels (Rigoni et al., 2007). Taking advantage of this model, Paoli and colleagues investigated the extent and kinetics of phospholipids hydrolysis by notexin, textilotoxin, taipoxin and b-bungarotoxin in these cells using a sensitive mass spectrometry methodology.
An outstanding finding of this investigation was that these neurotoxins showed a comparable kinetics of lyso- phospholipid release, i.e. of enzymatic activity, in neurons, in contrast with the large differences in activity on phos- pholipids substrates in non-cellular in vitro assays. This observation blurred the apparent contradiction between the need of phospholipids hydrolysis to exert neurotoxicity and the lack of correlation between toxicity and PLA2 activity in vitro, since the four neurotoxins displayed rela- tively similar enzymatic activity on neuronal phospho- lipids. In addition, it was observed that the enzymatic activity of these PLA2s in cell membrane phospholipids was lower than that measured in vitro, thus suggesting a limited but effective hydrolysis of key phospholipids in the neuronal membrane. Secondly, the ratios of lysophospho- lipid derivatives of phosphatidyl choline, phosphatidyl serine and phosphatidyl ethanolamine, in conjunction with the known distribution of these major phospholipids in the various types of membranes in neurons, showed that the majority of phospholipids hydrolysis occurs at the plasma membrane, which represents the main site of action of these b-neurotoxins. According to these findings, the key event in the action of these toxins is, consequently, the hydrolysis of phospholipids at the plasma membrane after binding to their target(s) in neurons. This study signifi- cantly clarified the scenario of the mechanism of action of neurotoxic PLA2s and provided a coherent explanation for the requirement of phospholipids hydrolysis in the onset of presynaptic neurotoxicity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การสังเกตทำให้งงเกี่ยวกับกลไกในการดำเนินการของ neurotoxic PLA2s ได้ขาดความสัมพันธ์ระหว่างกิจกรรมเอนไซม์ในระบบการเพาะเลี้ยงและ neurotoxicity ในสัตว์ทดลอง และเตรียมเส้นประสาทกล้ามเนื้อ เช่นขาดความสัมพันธ์โดยเฉพาะอย่างยิ่งน่านี้หลักฐานว่า ตัวเร่งปฏิกิริยากิจกรรมจำเป็นสำหรับการดำเนินการของสารพิษเหล่านี้ และว่า ผลิตภัณฑ์ของไฮโตรไลซ์ phospholipids, lysophospholipids โดยเฉพาะอย่างยิ่งสามารถทำซ้ำการดำเนินการของ b-neurotoxins ที่หน้าเทอร์มินัลได้ Cesare Montecucco และเพื่อนร่วมงาน มหาวิทยาลัยปา ที่อยู่ปัญหานี้ซับซ้อนในสิ่งพิมพ์ต่าง ๆ ที่ใช้บี neurotoxins ต่าง ๆ รู้จักตัวแปรและโครงสร้าง quaternary ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องไปในนักศึกษาได้ใช้เป็นรูปแบบการตรวจสอบการดำเนินการของ neurotoxic PLA2s neurons granular ของซีรีเบลลัมในงานเพาะเลี้ยงเซลล์ มันถูกแสดงว่า b neurotoxins เกิด bulgings โดยในเทอร์มินัลแอกซอนและเดนไดรต์ของ neurons เหล่านี้ และแสดงว่า แก้ไขดังกล่าวไม่เกี่ยวข้องกับการเพิ่มขึ้นในระดับ Ca2þ cytosolic (Rigoni et al., 2007) ประโยชน์ของแบบจำลองนี้ Paoli และเพื่อนร่วมงานสอบสวนขอบเขตและจลนพลศาสตร์ของไฮโตรไลซ์ phospholipids โดย notexin, textilotoxin, taipoxin และ bungarotoxin b ในเซลล์เหล่านี้โดยใช้วิธีสำคัญรเมทAn outstanding finding of this investigation was that these neurotoxins showed a comparable kinetics of lyso- phospholipid release, i.e. of enzymatic activity, in neurons, in contrast with the large differences in activity on phos- pholipids substrates in non-cellular in vitro assays. This observation blurred the apparent contradiction between the need of phospholipids hydrolysis to exert neurotoxicity and the lack of correlation between toxicity and PLA2 activity in vitro, since the four neurotoxins displayed rela- tively similar enzymatic activity on neuronal phospho- lipids. In addition, it was observed that the enzymatic activity of these PLA2s in cell membrane phospholipids was lower than that measured in vitro, thus suggesting a limited but effective hydrolysis of key phospholipids in the neuronal membrane. Secondly, the ratios of lysophospho- lipid derivatives of phosphatidyl choline, phosphatidyl serine and phosphatidyl ethanolamine, in conjunction with the known distribution of these major phospholipids in the various types of membranes in neurons, showed that the majority of phospholipids hydrolysis occurs at the plasma membrane, which represents the main site of action of these b-neurotoxins. According to these findings, the key event in the action of these toxins is, consequently, the hydrolysis of phospholipids at the plasma membrane after binding to their target(s) in neurons. This study signifi- cantly clarified the scenario of the mechanism of action of neurotoxic PLA2s and provided a coherent explanation for the requirement of phospholipids hydrolysis in the onset of presynaptic neurotoxicity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สังเกตงงเกี่ยวกับกลไกการออกฤทธิ์ของ PLA2s อัมพาตได้รับการขาดความสัมพันธ์ระหว่างกิจกรรมของเอนไซม์ในหลอดทดลองและพิษต่อระบบประสาทในร่างกายและการเตรียมการของเส้นประสาทกล้ามเนื้อ ขาดดังกล่าวของความสัมพันธ์ที่เป็นที่น่าสนใจโดยเฉพาะอย่างยิ่งในแง่ของหลักฐานว่าการเร่งปฏิกิริยาที่จำเป็นสำหรับการดำเนินการของสารพิษเหล่านี้และว่าผลิตภัณฑ์ของฟอสโฟจองจำโดยเฉพาะอย่างยิ่ง lysophospholipids มีความสามารถในการทำซ้ำการกระทำของ B-neurotoxins ที่สถานีประสาท Cesare Montecucco และเพื่อนร่วมงานที่มหาวิทยาลัย Padova จ่าหน้านี้ปัญหาที่ซับซ้อนในหลายสิ่งพิมพ์โดยใช้ neurotoxins ขต่าง ๆ ของตัวแปรและความแข็งแรงโครงสร้างสี่ ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องไปข้างหน้าในการศึกษาของพวกเขาคือการใช้เซลล์เม็ดของสมองในการเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นแบบอย่างในการตรวจสอบการกระทำของอัมพาต PLA2s มันก็แสดงให้เห็นว่า B-neurotoxins ชักนำ bulgings ดีที่กำหนดไว้ในขั้วซอนและประสาทของเซลล์ประสาทเหล่านี้และแสดงให้เห็นว่าการเปลี่ยนแปลงดังกล่าวมีความสัมพันธ์กับการเพิ่มขึ้นในระดับ cytosolic Ca2þ (Rigoni et al., 2007) การใช้ประโยชน์จากรูปแบบนี้เปาและเพื่อนร่วมงานการตรวจสอบขอบเขตและจลนศาสตร์ของฟอสโฟจองจำโดย notexin, textilotoxin, taipoxin และ B-bungarotoxin ในเซลล์เหล่านี้โดยใช้วิธีการมวลสารที่มีความสำคัญ.
การค้นพบที่โดดเด่นของการตรวจสอบนี้คือการที่เหล่านี้แสดงให้เห็น neurotoxins เทียบเคียง จลนศาสตร์ของการปล่อยเรียม lyso- คือกิจกรรมของเอนไซม์ในเซลล์ประสาทในทางตรงกันข้ามกับความแตกต่างขนาดใหญ่ในกิจกรรมบนพื้นผิว phos- pholipids ไม่ใช่โทรศัพท์มือถือที่ตรวจในหลอดทดลอง ข้อสังเกตนี้เบลอขัดแย้งระหว่างความต้องการของฟอสโฟจองจำออกแรงพิษต่อระบบประสาทและการขาดความสัมพันธ์ระหว่างความเป็นพิษและกิจกรรม PLA2 ในหลอดทดลองตั้งแต่สี่ neurotoxins แสดงสัมพันธ์ลำดับเอนไซม์ที่คล้ายกันในไขมัน phospho- เส้นประสาท นอกจากนี้ยังพบว่ากิจกรรมของเอนไซม์ PLA2s เหล่านี้ในฟอสโฟเซลล์เมมเบรนที่ต่ำกว่าที่วัดได้ในหลอดทดลองจึงบอกจองจำ จำกัด แต่มีประสิทธิภาพในการ phospholipids สำคัญในเยื่อหุ้มเซลล์ประสาท ประการที่สองอัตราส่วนของไขมัน lysophospho- อนุพันธ์ของโคลีน Phosphatidyl, Phosphatidyl ซีรีนและเอทานอ Phosphatidyl ร่วมกับการจัดจำหน่ายที่รู้จักกันของ phospholipids สำคัญเหล่านี้ในประเภทต่างๆของเยื่อหุ้มเซลล์ประสาทในแสดงให้เห็นว่าส่วนใหญ่ของฟอสโฟย่อยสลายเกิดขึ้นในเยื่อหุ้มพลาสม่า ซึ่งหมายถึงเว็บไซต์หลักของการดำเนินการเหล่านี้ B-neurotoxins ตามผลการวิจัยเหล่านี้เหตุการณ์ที่สำคัญในการดำเนินการของสารพิษเหล่านี้ดังนั้นการย่อยสลายของ phospholipids ที่เยื่อหุ้มหลังจากที่ผูกพันกับเป้าหมายของพวกเขา (s) ในเซลล์ประสาท ด้วยกันทางสถิติการศึกษาครั้งนี้ชี้แจงสถานการณ์ของกลไกการออกฤทธิ์ของ PLA2s อัมพาตและให้คำอธิบายที่สอดคล้องกันสำหรับความต้องการของฟอสโฟจองจำในการโจมตีของ presynaptic พิษต่อระบบประสาท

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

งงการสังเกตเกี่ยวกับกลไกของการกระทำของ pla2s โทอินได้ไม่มีความสัมพันธ์ระหว่างกิจกรรมในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลองและในประเส้นประสาทกล้ามเนื้อการเตรียมเอนไซม์ .ขาด เช่น ความสัมพันธ์เป็นเรื่องที่น่าสนใจในแง่ของหลักฐานที่ฤทธิ์เป็นจำเป็นสำหรับการกระทำของสารพิษเหล่านี้และผลิตภัณฑ์ของกลุ่มเป้าหมายย่อย โดยเฉพาะ lysophospholipids สามารถทำซ้ำการกระทำของ b-neurotoxins ที่หน้าสถานี เซ montecucco และเพื่อนร่วมงานที่มหาวิทยาลัยของ ปาโดวาแก้ไขปัญหาที่ซับซ้อนนี้ในสิ่งพิมพ์หลายที่ใช้ b-neurotoxins ต่างๆของความแรงและตัวแปรโครงสร้าง quaternary . ที่เกี่ยวข้องก้าวไปข้างหน้าในการศึกษาของพวกเขาคือการใช้เม็ดเซลล์ประสาทสมองในการเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นแบบจำลองเพื่อศึกษาการโทอิน pla2s .พบว่า การกำหนด b-neurotoxins bulgings เดนไดรต์แอกซอน และในขั้วประสาทเหล่านี้ และแสดงให้เห็นว่าการเปลี่ยนแปลงดังกล่าวมีความสัมพันธ์กับการเพิ่มขึ้นในระดับþ cytosolic แคลเซียม ( ริโกนี่ et al . , 2007 ) การใช้ประโยชน์จากรูปแบบนี้ เป๋าลี่และเพื่อนร่วมงานตรวจสอบขอบเขตและจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์โดย notexin textilotoxin ด , ,และ taipoxin b-bungarotoxin ในเซลล์เหล่านี้ใช้เป็นมวลสารที่มีวิธีการการค้นหา
โดดเด่นอยู่ที่ที่เหล่านี้ให้กับบุคคล lyso - ปล่อยป ได้แก่ กิจกรรมเอนไซม์ในเซลล์ ในทางตรงกันข้ามกับความแตกต่างขนาดใหญ่ในกิจกรรม phos - pholipids พื้นผิวไม่เซลล์ในหลอดทดลอง ) .การสังเกตนี้เบลอความแตกต่างที่ชัดเจนระหว่างความต้องการของกลุ่มเป้าหมาย การโหมประและไม่มีความสัมพันธ์ระหว่างความเป็นพิษและ pla2 กิจกรรมในหลอดทดลอง ตั้งแต่สี่ที่แสดงจริง - เอนไซม์ที่คล้ายกันมีการ phospho - ลิปิด นอกจากนี้พบว่าเอนไซม์เหล่านี้ pla2s ในเยื่อหุ้มเซลล์ phospholipids ต่ำกว่าวัดในหลอดทดลอง ดังนั้น จะกัด แต่ประสิทธิภาพการย่อยสลายของ phospholipids ที่สําคัญในเยื่อหุ้มของเซลล์ประสาท . ประการที่สอง อัตราส่วนของไขมัน lysophospho อนุพันธ์ phosphatidyl choline phosphatidyl และ phosphatidyl เช่นเดียวกับเอนไซม์ ,ร่วมกับ รู้จักการกระจายของ phospholipids สาขาเหล่านี้ในประเภทต่างๆของ membranes ในเซลล์ประสาท พบว่าส่วนใหญ่ของ phospholipids การย่อยเกิดขึ้นในเยื่อหุ้มเซลล์ซึ่งเป็นเว็บไซต์หลักของการกระทำของ b-neurotoxins เหล่านี้ ตามข้อมูลเหล่านี้เหตุการณ์สำคัญในการกระทําของสารพิษเหล่านี้ จากนั้นการย่อยสลายของ phospholipids ที่เยื่อหุ้มเซลล์หลังจากที่ผูกพันกับเป้าหมายของพวกเขา ( s ) ในเซลล์ประสาท การศึกษานี้ได้ชี้แจงสถานการณ์ของ signifi - ลดลงอย่างมีนัยสําคัญเมื่อกลไกของการกระทำของ pla2s โทอิน และให้คำอธิบายที่สอดคล้องกับความต้องการของกลุ่มเป้าหมายย่อยในการโจมตีของ presynaptic ประ .