To observe the antibody responses i

To observe the antibody responses induced by recombinant A subgroup avian leukosis virus (ALV-A) gp85
protein vaccine plus CpG-ODN adjuvant and the protection of maternal antibodies (MAbs) for the
hatched chickens against early infection, the gp85 gene was amplified from the proviral cDNA of ALVA-SDAU09C1
strain using PCR and the recombinant plasmid containing target gene was constructed
and expressed in Escherichia Coli. The expressed product was confirmed using SDS–PAGE and western
blot that it is about 46 KD of recombinant protein. The purified recombinant proteins combining with
CpG-ODN adjuvant or Freund’s adjuvant were inoculated into the breeder hens, the ALV-A antibodies
in serum and in egg-yolk were detected; the fertilized eggs from the vaccinated hens with different titers
of egg-yolk antibody were hatched and then challenged with 104.2/0.1 mL TCID50 of ALV-A-SDAU09C1
strain, all the hatched chickens were weekly detected for the viremias and the cloacal swab P27 antigen
and pathological lesions; the neutralizing test of antisera in vitro was conducted. The results showed that
the recombinant gp85 proteins combining with CpG-ODN adjuvant could induce the breeder hens to produce
better antibody responses than gp85 protein with Freund’s adjuvant or without adjuvant; the MAbs
with higher titers induced by CpG-ODN + gp85 proteins could obviously decrease the ratios of viremias
(13% vs 33%), cloacal detoxification (20% vs 67%) and death (0% vs 22%) caused by ALV-A infection than
those by gp85 protein without adjuvant. The results of the neutralizing test indicated that the antisera
from the hatched chickens could neutralize the ALV-A-SDAU09C1 strain in vitro, but which depends
on the antibody titers. The results of IFA confirmed that the serum antibody could combine with the
ALV in DF1 cells. It can be concluded that the prepared ALV-A gp85 subunit vaccine combining with
CpG-ODN adjuvant could induce the breeder hens to produce better neutralizing antibody responses
and protect 80% of their offspring chickens against early infection.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สังเกตที่แอนติบอดี ตอบสนองเกิดจากวททชไวรัสนก leukosis กลุ่มย่อย gp85 (ALV-A)วัคซีนโปรตีนรวม ทั้งประเมินประเภทวัสดุสิ้นเปลือง-ODN และป้องกันแม่แอนตี้ (MAbs) สำหรับการขีดไก่กับต้นเชื้อ ยีน gp85 ถูกขยายจาก cDNA proviral ของ ALVA SDAU09C1ต้องใช้โดยใช้ PCR และเป้าหมาย recombinant plasmid ที่มียีนที่สร้างและแสดงใน Escherichia Coli แสดงผลิตภัณฑ์ได้รับการยืนยันโดยใช้ SDS – หน้าและตะวันตกทำลายเป็นประมาณ 46 KD recombinant โปรตีน Recombinant โปรตีนบริสุทธิ์ที่รวมกับประเภทวัสดุสิ้นเปลือง-ODN ประเมินหรือประเมินของ Freund ถูก inoculated เป็นไก่พันธุ์ แอนตี้ ALV Aในซีรั่ม และไข่แดงพบ fertilized ไข่จากไก่ vaccinated กับ titers ที่แตกต่างกันไข่แดงแอนติบอดีถูกฟัก และท้าทายแล้ว ด้วยมล 104.2/0.1 TCID50 ของ ALV-A-SDAU09C1สายพันธุ์ ทุกสัปดาห์พบไก่ขีด viremias และตรวจหาหยอดทวารร่วมกวาด P27และทางพยาธิวิทยา ได้ ดำเนินการทดสอบ neutralizing ของ antisera เพาะเลี้ยง ผลลัพธ์พบว่าrecombinant gp85 โปรตีนรวมกับประเภทวัสดุสิ้นเปลือง-ODN ประเมินอาจก่อให้เกิดไก่พันธุ์การผลิตแอนติบอดีตอบสนองที่ดีกว่า gp85 โปรตีน Freund ของประเมิน หรือ ไม่ ประเมิน MAbsกับ titers สูงที่เกิดจากประเภทวัสดุสิ้นเปลือง-ODN + gp85 โปรตีนสามารถชัดลดอัตราส่วนของ viremias(13% เทียบกับ 33%), ตาย (0% เทียบกับ 22%) เกิดจากการติดเชื้อ ALV A มากกว่าและหยอดทวารร่วมล้างพิษ (20% เทียบกับ 67%)ผู้ โดย gp85 โปรตีนโดยไม่ต้องประเมิน ผลลัพธ์ของการทดสอบ neutralizing ระบุที่ที่ antiseraจากไก่ขีดสามารถแก้ ALV-A-SDAU09C1 สายพันธุ์การเพาะเลี้ยง แต่ที่ขึ้นบน titers แอนติบอดี ผลลัพธ์ของ IFA ยืนยันว่า แอนติบอดีในซีรั่มอาจรวมกับการALV ในเซลล์ DF1 จึงสามารถสรุปได้ที่วัคซีนย่อย gp85 ALV A เตรียมไว้รวมกับประเมินประเภทวัสดุสิ้นเปลือง-ODN อาจก่อให้เกิดไก่พันธุ์การตอบสนองของแอนติบอดี neutralizing ดีและป้องกัน 80% ของไก่ลูกหลานของพวกเขาต่อต้านการติดเชื้อก่อน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จะสังเกตเห็นการตอบสนองของแอนติบอดีที่เกิดจาก recombinant กลุ่มย่อยไวรัส leukosis นก (ALV-) gp85
วัคซีนโปรตีนบวกเสริม CpG-ODN และการป้องกันของแอนติบอดีของมารดา (โคลน) สำหรับ
ไก่ฟักต่อการติดเชื้อในช่วงต้นยีน gp85 ถูกขยายจาก cDNA proviral ของ ALVA-SDAU09C1
ความเครียดโดยใช้วิธี PCR และพลาสมิดที่มียีน recombinant เป้าหมายถูกสร้าง
และแสดงใน Escherichia Coli แสดงผลิตภัณฑ์ได้รับการยืนยันโดยใช้ระบบ SDS-PAGE และตะวันตก
blot ว่ามันเป็นเรื่องเกี่ยวกับ 46 KD ของโปรตีน โปรตีนบริสุทธิ์รวมกับ
เสริม CpG-ODN หรือเสริม Freund ถูกเชื้อเข้าสู่ไก่พ่อแม่พันธุ์, แอนติบอดี ALV-
ในซีรั่มและในไข่แดงที่ถูกตรวจพบ ไข่จากแม่ไก่ที่มีการฉีดวัคซีนเชื้อที่แตกต่างกัน
ของแอนติบอดีไข่แดงถูกฟักและท้าทายแล้วกับ 104.2 / 0.1 มิลลิลิตร TCID50 ของ ALV-A-SDAU09C1
ความเครียดทั้งหมดไก่ฟักตรวจพบรายสัปดาห์สำหรับ viremias และไม้กวาด cloacal แอนติเจน P27
และรอยโรคพยาธิวิทยา; ทดสอบ neutralizing ของ antisera ในหลอดทดลองได้ดำเนินการ ผลการศึกษาพบว่า
โปรตีน gp85 recombinant รวมกับเสริม CpG-ODN สามารถเหนี่ยวนำให้เกิดไก่พ่อแม่พันธุ์ในการผลิต
ตอบสนองแอนติบอดีดีกว่าโปรตีน gp85 กับเสริมของ Freund หรือไม่มีการเสริม; โคลน
กับ titers ที่สูงขึ้นเกิดจาก CpG-ODN + gp85 โปรตีนอย่างเห็นได้ชัดสามารถลดอัตราส่วนของ viremias
(13% เทียบกับ 33%), การล้างพิษ cloacal (20% เทียบกับ 67%) และความตาย (0% เทียบกับ 22%) ที่เกิดจากการ ALV- การติดเชื้อกว่า
เหล่านั้นโดยโปรตีน gp85 โดยไม่ต้องเสริม ผลการทดสอบ neutralizing ชี้ให้เห็นว่า antisera
จากไก่ฟักสามารถแก้ความเครียด ALV-A-SDAU09C1 ในหลอดทดลอง แต่ที่ขึ้นอยู่
ในระดับแอนติบอดี ผลของการปรึกษาทางการเงินอิสระยืนยันว่าแอนติบอดีในซีรั่มสามารถรวมกับ
คลี่คลายในเซลล์ DF1 มันสามารถสรุปได้ว่าเตรียม ALV-วัคซีน subunit gp85 รวมกับ
เสริม CpG-ODN สามารถเหนี่ยวนำให้เกิดไก่พ่อแม่พันธุ์ในการผลิตที่ดีขึ้นตอบสนองแอนติบอดี neutralizing
และป้องกัน 80% ของไก่ลูกหลานของพวกเขาจากการติดเชื้อในช่วงต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อสังเกตการตอบสนองของภูมิคุ้มกันแบบกลุ่มย่อยสวนสวรรค์ไวรัส ( alv-a ) gp85
วัคซีนเสริมโปรตีนพลัส odn CPG และคุ้มครองมารดาแอนติบอดีสำหรับ
ฟักไก่จากการติดเชื้อในวัยเด็ก gp85 ยีนที่ถูกขยายจากดีเอ็นเอโพรไวรัลดีสายพันธุ์ alva-sdau09c1
โดยใช้พลาสมิดที่มียีนดีเอ็นเอและยีนเป้าหมาย สร้าง
และแสดงใน Escherichia coli แสดงสินค้าที่ได้รับการยืนยันการใช้ SDS หน้า ) และตะวันตก
เปรอะเปื้อนเป็นประมาณ 46 กิโลดาลตันของรีคอมบิแนนท์โปรตีน รีคอมบิแนนท์โปรตีนบริสุทธิ์รวมกับ
CPG odn เสริมหรือ Freund เป็นผู้ช่วยเป็นเชื้อพันธุ์แม่ไก่ , alv-a แอนติบอดี
ในซีรั่ม และในไข่แดงพบ ;มีไข่จากไก่ที่ฉีดวัคซีนโดย
แอนติบอดีไข่ฟักและท้าทายกับ 104.2 / 0.1 ml tcid50 ของ alv-a-sdau09c1
ความเครียดทั้งหมดฟักไก่รายสัปดาห์ที่ตรวจพบใน viremias และ cloacal กวาด p27 แอนติเจน
และรอยโรคทางพยาธิวิทยา ; neutralizing ทดสอบแอนติในหลอดทดลองเป็น ผลการศึกษาพบว่า
การรีคอมบิแนนท์โปรตีนรวมกับ gp85 CPG odn เสริมอาจทำให้พันธุ์ไก่เพื่อผลิตแอนติบอดีต่อโปรตีน gp85
ที่ดีกว่ากับ Freund เป็นผู้ช่วยหรือโดยไม่เหลือ ; แอนติบอดีที่สูงและ CPG โดย
odn gp85 โปรตีนสามารถเห็นได้ชัดลดอัตราส่วนของ viremias
( 13% vs 33 % )cloacal การล้างพิษ ( 20% และ 67% ) และความตาย ( 0 % ต่อ 22% ) เกิดจากการติดเชื้อ alv-a กว่า
โดยโปรตีน gp85 โดยไม่มีผู้ช่วย ผลของการทดสอบพบว่าเซลล์แอนติ
จากฟักไก่สามารถแก้เมื่อย alv-a-sdau09c1 ในหลอดทดลอง แต่ที่ขึ้นอยู่กับ
เมื่อแอนติบอดีไตเตอร์ . ผลของไอเอฟเอ ยืนยันว่า ระดับแอนติบอดีสามารถรวมกับ
ภาษีมูลค่าเพิ่มใน df1 เซลล์ สรุปได้ว่า เตรียม alv-a gp85 subunit วัคซีนรวมกับ
CPG odn adjuvant สามารถชักนำให้เกิดพันธุ์แม่ไก่สร้าง neutralizing แอนติบอดีตอบสนองดีกว่า
และปกป้อง 80% ของลูกหลานของเขาไก่จากการติดเชื้อก่อน