The cytokinin dehydrogenases (CKX;

The cytokinin dehydrogenases (CKX; EC 1.5.99.12) are a protein family that maintains the endogenous
levels of cytokinins in plants by catalyzing their oxidative degradation. The CKX family in maize (Zea
mays L.) has thirteen members, only two of which - ZmCKX1 and ZmCKX10 - have previously been
characterized in detail. In this study, nine further maize CKX isoforms were heterologously expressed in
Escherichia coli, purified by affinity and ion-exchange chromatography and biochemically characterized.
ZmCKX6 and ZmCKX9 could only be expressed successfully after the removal of putative sequencespecific
vacuolar sorting signals (LLPT and LPTS, respectively), suggesting that these proteins are localized
to the vacuole. Substrate specificity analyses revealed that the CKX isoforms can be grouped into two
subfamilies: members of the first strongly prefer cytokinin free bases while members of the second
degrade a broad range of substrates. The most active isoform was found to be ZmCKX1. One of the
studied isoforms, ZmCKX6, seemed to encode a nonfunctional enzyme due to a mutation in a conserved
HFG protein domain at the C-terminus. Site-directed mutagenesis experiments revealed that this domain
is essential for CKX activity. The roles of the maize CKX enzymes in the development of maize seedlings
during the two weeks immediately after radicle emergence were also investigated. It appears that
ZmCKX1 is a key regulator of active cytokinin levels in developing maize roots. However, the expression
of individual CKX isoforms in the shoots varied and none of them seemed to have strong effects on the
cytokinin pool.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในทางการค้า dehydrogenases (CKX EC 1.5.99.12) เป็นครอบครัวโปรตีนที่รักษาที่ภายนอกระดับของคลอโรฟิลล์ในพืชโดย catalyzing ลดการออกซิเดชัน ครอบครัว CKX ข้าวโพด (ซีmays L.) มี 13 สมาชิก สองเท่าของที่ - ZmCKX1 และ ZmCKX10 - เคยลักษณะในรายละเอียด ในการศึกษานี้ เก้าต่อข้าวโพด CKX isoforms ถูกแสดงใน heterologouslyEscherichia coli บริสุทธิ์ โดยความสัมพันธ์และแลกเปลี่ยนไอออน chromatography และ biochemically ลักษณะZmCKX6 และ ZmCKX9 อาจเพียงแสดงเรียบร้อยแล้วหลังจากการกำจัด sequencespecific อ้างว่าฝาvacuolar เรียงลำดับสัญญาณ (LLPT และ LPTS ตามลำดับ), การแนะนำว่า โปรตีนเหล่านี้จะถูกปรับเปลี่ยนการแวคิวโอล พื้นผิวที่ความวิเคราะห์เปิดเผยว่า CKX isoforms สามารถจัดกลุ่มเป็นสองไป: ขอสมาชิกในครั้งแรกต้องการฟรีของทางการค้าฐานในขณะที่สมาชิกของสองลดทอนความหลากหลายของพื้นผิว พบ isoform สุดจะ ZmCKX1 หนึ่งของการศึกษา isoforms, ZmCKX6 ดูเหมือนจะ เข้ารหัสเอนไซม์รุ่นเนื่องจากการกลายพันธุ์ในการนำโดเมนโปรตีน HFG ที่ C เทอร์มินัส ไซต์นำ mutagenesis ทดลองเปิดเผยที่โดเมนนี้เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรม CKX บทบาทของเอนไซม์ CKX ข้าวโพดในการพัฒนาของต้นกล้าข้าวโพดในช่วงสองสัปดาห์หลังเกิด radicle ยังตรวจสอบ ปรากฏว่าZmCKX1 คือ เครื่องควบคุมหลักของระดับงานทางการค้าในการพัฒนารากข้าวโพด อย่างไรก็ตาม นิพจน์ของ CKX ละ isoforms หน่อที่แตกต่างกันและไม่มีพวกเขาดูเหมือนจะ มีผลกระทบที่แข็งแกร่งในการสระว่ายน้ำในทางการค้า

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

dehydrogenases ไซโตไคนิ (CKX; EC 1.5.99.12) เป็นครอบครัวโปรตีนที่รักษาภายนอก
ระดับของไซโตไคในพืชโดยการเร่งการย่อยสลายออกซิเดชันของพวกเขา ครอบครัว CKX ในข้าวโพด (Zea
mays L. ) มีสิบสามคนเพียงสองซึ่ง - ZmCKX1 และ ZmCKX10 - ได้รับก่อนหน้านี้
ที่โดดเด่นในรายละเอียด ในการศึกษานี้เก้าข้าวโพดต่อไอโซฟอร์ม CKX ถูกแสดง heterologously ใน
Escherichia coli, บริสุทธิ์โดยความสัมพันธ์และแลกเปลี่ยนไอออนโครมาและคุณสมบัติทางชีวเคมีที่โดดเด่น.
ZmCKX6 และ ZmCKX9 เท่านั้นที่สามารถจะแสดงที่ประสบความสำเร็จหลังจากลบสมมุติ sequencespecific
สัญญาณการเรียงลำดับ vacuolar (LLPT และ LPTS, ตามลำดับ) บอกว่าโปรตีนเหล่านี้จะมีการแปล
ไป vacuole พื้นผิวจำเพาะวิเคราะห์เปิดเผยว่าไอโซฟอร์ม CKX สามารถแบ่งออกเป็นสอง
ครอบครัว: สมาชิกแรกอย่างยิ่งชอบฐานไซโตไคนิฟรีในขณะที่สมาชิกของที่สอง
ที่ทำให้เสื่อมเสียความหลากหลายของพื้นผิว ไอโซฟอร์มใช้งานมากที่สุดพบว่าเป็น ZmCKX1 หนึ่งใน
ไอโซฟอร์มการศึกษา ZmCKX6 ดูเหมือนจะเข้ารหัสเอนไซม์ nonfunctional เนื่องจากการกลายพันธุ์ในป่าสงวน
โดเมนโปรตีน HFG ที่ C-ปลายทาง เว็บไซต์กำกับการทดลองฉับเปิดเผยว่าโดเมนนี้
เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรม CKX บทบาทของเอนไซม์ข้าวโพด CKX ในการพัฒนาของต้นกล้าข้าวโพดเลี้ยงสัตว์
ในช่วงสองสัปดาห์ที่ผ่านมาทันทีหลังจากที่ได้รับการตรวจสอบ radicle เกิดขึ้นยัง ปรากฏว่า
ZmCKX1 เป็นหน่วยงานกำกับดูแลที่สำคัญของไซโตไคนิระดับการใช้งานในการพัฒนารากข้าวโพด แต่การแสดงออก
ของไอโซฟอร์ม CKX ในแต่ละหน่อที่แตกต่างกันและไม่มีพวกเขาดูเหมือนจะมีผลกระทบที่แข็งแกร่งใน
สระว่ายน้ำไซโตไคนิ.
?