. Gamete collectionThe abalone were

. Gamete collection

The abalone were induced to spawn by raising the seawater temperature by 2–3 °C for about 2 h before the ultraviolet (UV) light connected to the water supply system was turned on. Immediately upon commencement of spawning the water supply to the tank was changed from UV irradiated seawater to 1 μm filtered seawater of the same temperature. To collect concentrated sperm the water supply to the tank of male abalone was turned off when spawning peaked; approximately 20 to 30 min after the commencement of spawning. The tank was then emptied and the abalone were left undisturbed in the tank for sperm collection. If abalone dislodged from the tank walls, they were dried with paper towelling and put on a rack with their shell facing down. Sperm was underneath each abalone. Sperm collected from abalone that spawned earlier was stored in a refrigerator (4 °C) until the sperm from 3–5 individuals had been separately collected. Sperm samples of the same volume were then pooled from each male used. The time interval from when the sperm from the first male was collected to when the pooled sperm was used in the subsequent experiments was kept as short as possible and never longer than 2 h. Three sperm pools were established in each experiment using sperm from different males. The sperm concentration was standardized to 5.0 × 108 mL− 1 (unless otherwise specified) after being counted under a light microscope with a hemacytometer. Sperm pools with initial motility above 80% were used in the subsequent experiments.

Eggs from at least three females were gently poured into a sieve set with a 300-μm sieve at the top to remove the large debris and a 90-μm sieve partly immersed in filtered seawater below to retain the eggs. They were gently rinsed and washed into a 250-mL settlement beaker. After 10 to 15 min the density of eggs on the bottom of the beaker was estimated and was approximately 25,000 mL− 1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

. คอลเลกชันพันธุ์หอยเป๋าฮื้อถูกชักนำให้ไข่โดยการเพิ่มอุณหภูมิของน้ำทะเลโดย 2-3 องศาเซลเซียสเป็นเวลาประมาณ 2 ชั่วโมงก่อนที่จะมีรังสีอัลตราไวโอเลต (UV) ที่เชื่อมต่อกับระบบน้ำประปาที่ถูกเปิดอยู่ ทันทีที่เริ่มวางไข่น้ำประปาไปยังถังที่มีการเปลี่ยนแปลงจากการฉายรังสี UV น้ำทะเลถึง 1 ไมครอนกรองน้ำทะเลอุณหภูมิเดียวกัน ในการเก็บรวบรวมสเปิร์มที่มีความเข้มข้นน้ำประปาไปยังถังของหอยเป๋าฮื้อชายถูกปิดเมื่อวางไข่แหลม; ประมาณ 20 ถึง 30 นาทีหลังจากที่เริ่มวางไข่ ถังได้รับการยอบแล้วและหอยเป๋าฮื้อถูกทิ้งในถังที่ไม่ถูกรบกวนในการเก็บรวบรวมสเปิร์ม ถ้าหอยเป๋าฮื้อหลุดออกจากผนังถังที่พวกเขาถูกทำให้แห้งด้วย toweling กระดาษและวางบนชั้นวางที่มีเปลือกของพวกเขาคว่ำลง สเปิร์มเป็นหอยเป๋าฮื้อแต่ละใต้ สเปิร์มที่เก็บได้จากหอยเป๋าฮื้อที่ก่อนหน้านี้ได้รับมาจากกระบอกไม้ไผ่ที่เก็บไว้ในตู้เย็น (4 ° C) จนกระทั่งสเปิร์ม 3-5 บุคคลที่ได้รับการเก็บแยกต่างหาก ตัวอย่างสเปิร์มของปริมาณเดียวกันมารวมกลุ่มกันแล้วจากกันชายใช้ ช่วงเวลาจากเมื่อสเปิร์มจากชายคนแรกที่ถูกเก็บรวบรวมเพื่อรวบรวมเมื่อสเปิร์มที่ใช้ในการทดลองต่อมาถูกเก็บไว้ที่สั้นที่สุดและไม่เคยนานกว่า 2 ชั่วโมง สระว่ายน้ำสามสเปิร์มที่ถูกจัดตั้งขึ้นในการทดลองแต่ละโดยใช้สเปิร์มจากเพศที่แตกต่างกัน ความเข้มข้นของสเปิร์มเป็นมาตรฐาน 5.0 × 108 mL- 1 (ยกเว้นกรณีที่ระบุไว้เป็นอย่างอื่น) หลังจากที่ถูกนับภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสงที่มี hemacytometer สระว่ายน้ำสเปิร์มที่มีการเคลื่อนไหวเริ่มต้นเกินกว่า 80% ถูกนำมาใช้ในการทดลองที่ตามมา. ไข่จากอย่างน้อยสามหญิงถูกเทเบา ๆ ในตะแกรงชุดตะแกรง 300 ไมโครเมตรที่ด้านบนเพื่อเอาเศษซากขนาดใหญ่และตะแกรง 90 ไมครอนแช่บางส่วน ในน้ำทะเลกรองด้านล่างเพื่อเก็บไข่ พวกเขาถูกล้างเบา ๆ และล้างลงในบีกเกอร์นิคม 250 มิลลิลิตร หลังจาก 10-15 นาทีความหนาแน่นของไข่ที่ด้านล่างของบีกเกอร์ที่เป็นที่คาดกันและอยู่ที่ประมาณ 25,000 mL- 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. เซลล์สืบพันธุ์คอลเลกชัน

เป๋าฮื้อถูกชักนำเพื่อวางไข่โดยเพิ่มอุณหภูมิน้ำทะเล โดย 2 – 3 องศา C ประมาณ 2 ชั่วโมงก่อนแสงอัลตราไวโอเลต ( UV ) เชื่อมต่อกับระบบประปาเปิด . ทันทีเมื่อเริ่มวางไข่ในน้ำในถังก็เปลี่ยนจากรังสี UV น้ำทะเล 1 μ M กรองน้ำทะเลอุณหภูมิเดียวกันการเก็บอสุจิเข้มข้นน้ำไปยังถังของชายหอยเป๋าฮื้อถูกปิดเมื่อวางไข่แหลม ; ประมาณ 20 ถึง 30 นาทีหลังจากการเริ่มต้นของการวางไข่ ถังก็น้อยลงและเป๋าฮื้อถูกทิ้งในถังสำหรับเก็บอสุจิ คอลเลกชัน ถ้าหอยกระเด็นออกจากผนังถังพวกเขากำลังแห้งด้วยกระดาษ towelling ใส่แร็คกับเปลือกของพวกเขาหันลง อสุจิอยู่ภายใต้แต่ละชนิด อสุจิที่เก็บจากหอยเป๋าฮื้อที่ spawned ก่อนเก็บในตู้เย็น ( 4 ° C ) จนอสุจิจาก 3 – 5 บุคคลมีการแยกเก็บ สเปิร์มตัวอย่างของปริมาณเดียวกันแล้วรวมจากแต่ละผู้ใช้ช่วงเวลาตั้งแต่อสุจิจากชายแรกคือการรวบรวมเมื่อรวมระยะเวลาที่ใช้ในการทดลองต่อมาให้สั้นที่สุดเท่าที่จะทำได้ และไม่เกิน 2 ชั่วโมงได้สามสเปิร์มสระขึ้นในแต่ละการทดลอง โดยใช้อสุจิจากผู้ชายที่แตกต่างกัน ความเข้มข้นของอสุจิมาตรฐาน 50 × 108 ml − 1 ( เว้นแต่จะระบุเป็นอย่างอื่น ) หลังจากถูกนับด้วยกล้องจุลทรรศน์แสงกับ hemacytometer . อสุจิสระว่ายน้ำกับส่วนเบื้องต้นข้างต้น 80% ถูกใช้ในการทดลองต่อมา .