2.1. ChemicalsSodium dodecyl sulfat

2.1. Chemicals
Sodium dodecyl sulfate (SDS), cetyltrimethyl ammonium
bromide (CTAB), polyoxyethylene lauryl ether
(Brij30), polyoxyethylene sorbitan monooleate
(Tween80) and other chemicals used were of biochemical
or analytical grade purchased in China.
2.2. Microorganism and cultivation
S. cerevisiae WSH-J701 [8] was used in this study. The
strain was maintained by monthly subcultivated on
shints consisted of 10% malt extract with 2% agar. The
culture from a fresh slant was inoculated into a 250-ml
flask containing 30-ml medium, incubated at 10 8C for
20 h on a reciprocal shaker with the rotation speed of
200 rpm to produce precultures. These were then
inoculated into the same medium with an inoculum
size of 1.0% (v/v) for GSH fermentation. The fermentation
was performed under the same conditions used in
preculture except that the culture time was 12 h. The
medium contained (per l): 30 glucose, 9 peptone, 4.1
KH2PO4, 2.4 MgSO4, 2.4 NaCl, 0.2 ZnCl2, and 0.2 g
CaCl2. The initial pH of the medium was adjusted to
5.0.
2.3. Analytical methods
About 25 ml culture broth was centrifuged at 5000
rpm for 20 min and washed twice with distilled water to
collect wet cells. The biomass concentration was measured
by drying the wet cells at 105 8C to a constant
weight. In addition, wet cells were extracted with 40%
(v/v) ethanol at 30 8C for 2 h and centrifuged at 5000
rpm for 20 min and the supernatant obtained used for
GSH assay. GSH concentration was determined according
to the method described by Cohn et al. [13]. Total
GSH concentration was defined as extracellular GSH
concentration plus is intracellular GSH concentration,
the latter can be obtained by multiplying the intracellular
GSH content by biomass concentration.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1. เคมีภัณฑ์Dodecyl โซเดียมซัลเฟต (SDS), แอมโมเนีย cetyltrimethylโบรไมด์ (CTAB), อีเทอร์ lauryl polyoxyethylene(Brij30), polyoxyethylene sorbitan monooleate(Tween80) และสารอื่น ๆ ใช้ของชีวเคมีหรือเกรดวิเคราะห์ซื้อในประเทศจีน2.2. จุลินทรีย์และเพาะปลูกS. cerevisiae WSH-J701 [8] ถูกใช้ในการศึกษานี้ ที่ต้องใช้ถูกดูแล โดย subcultivated ในเดือนshints ประกอบด้วย 10% มอลต์สกัดกับ agar 2% ที่วัฒนธรรมจากเอียงสดถูก inoculated ไปเป็น 250 mlหนาวที่ประกอบด้วยกลาง 30 ml, incubated ที่ 8C 10 สำหรับ20 h ในเชคเกอร์ซึ่งกันและกันกับการหมุนความเร็วของรอบต่อนาที 200 ผลิต precultures เหล่านี้ได้แล้วinoculated เป็นสื่อเดียวกันกับ inoculumขนาด 1.0% (v/v) สำหรับหมัก GSH หมักมีดำเนินการภายใต้เงื่อนไขเดียวกันกับที่ใช้ในpreculture แต่เวลาวัฒนธรรมถูก 12 h.สื่อที่มีอยู่ (ต่อลิตร): น้ำตาลกลูโคส 30, 9 peptone, 4.1KH2PO4, 2.4 MgSO4, 2.4 NaCl, 0.2 ZnCl2 และ 0.2 gCaCl2 มีปรับ pH เริ่มต้นกลาง5.02.3 การวิเคราะห์วิธีประมาณ 25 ml ซุปวัฒนธรรมถูก centrifuged ที่ 5000รอบต่อนาทีสำหรับ 20 นาที และล้าง ด้วยน้ำกลั่นครั้งเก็บเซลล์เปียก เป็นวัดความเข้มข้นของชีวมวลโดยแห้งเซลล์เปียกที่ 8C 105 กับค่าคงน้ำหนัก นอกจากนี้ เซลล์เปียกถูกสกัด ด้วย 40%เอทานอล (v/v) ที่ 30 8C 2 h และ centrifuged ที่ 5000รอบต่อนาที 20 นาทีและ supernatant รับใช้GSH วิเคราะห์ ความเข้มข้นของ GSH กำหนดตามวิธีการอธิบายโดยคอห์น et al. [13] ผลรวมความเข้มข้นของ GSH ถูกกำหนดเป็น extracellular GSHบวกความเข้มข้นมีความเข้มข้นของ GSH intracellularหลังได้ ด้วยการคูณที่ intracellularเนื้อหา GSH โดยความเข้มข้นของชีวมวล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 สารเคมี
โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต (SDS) cetyltrimethyl แอมโมเนียม
โบรไมด์ (CTAB) อีเทอร์ lauryl polyoxyethylene
(Brij30) polyoxyethylene ซอร์ monooleate
(Tween80) และสารเคมีอื่น ๆ ที่ใช้เป็นของชีวเคมี
เกรดหรือการวิเคราะห์ซื้อในประเทศจีน.
2.2 จุลินทรีย์และการเพาะปลูก
S. cerevisiae WSH-J701 [8] ถูกนำมาใช้ในการศึกษานี้
สายพันธุ์ที่ได้รับการเก็บรักษาไว้โดยรายเดือน subcultivated ใน
shints ประกอบด้วยสารสกัดจากมอลต์ 10% กับวุ้น 2%
วัฒนธรรมจากเอียงสดเชื้อเป็น 250 มล.
ขวดที่มีขนาดกลาง 30 มลบ่มที่อุณหภูมิ 10 8C สำหรับ
20 ชั่วโมงในเครื่องปั่นซึ่งกันและกันกับความเร็วในการหมุนของ
200 รอบต่อนาทีในการผลิต precultures เหล่านี้ถูกแล้ว
เชื้อเป็นสื่อเดียวกับเชื้อ
ขนาดของ 1.0% (v / v) สำหรับการหมัก GSH การหมัก
ที่ได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขเดียวกันที่ใช้ในการ
preculture ยกเว้นว่าเวลาวัฒนธรรม 12 ชั่วโมง
ขนาดกลางที่มีอยู่ (ต่อลิตร): 30 กลูโคส 9 เปปโตน 4.1
KH2PO4 2.4 MgSO4 2.4 โซเดียมคลอไรด์, 0.2 ZnCl2 และ 0.2 กรัม
CaCl2 pH เริ่มต้นของกลางได้รับการปรับให้
5.0.
2.3 วิธีการวิเคราะห์
เกี่ยวกับน้ำซุปวัฒนธรรม 25 มลถูกหมุนเหวี่ยงที่ 5000
รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีและล้างสองครั้งด้วยน้ำกลั่นเพื่อ
เก็บเซลล์เปียก ความเข้มข้นของชีวมวลที่ได้รับการวัด
โดยการทำให้แห้งเซลล์เปียกที่ 105 8C เพื่อคง
น้ำหนัก นอกจากนี้เซลล์เปียกถูกสกัดด้วย 40%
(v / v) เอทานอลวันที่ 30 8C เป็นเวลา 2 ชั่วโมงและหมุนเหวี่ยงที่ 5000
รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีและสารละลายที่ได้ใช้สำหรับการ
ทดสอบ GSH ความเข้มข้นของ GSH ถูกกำหนดตาม
วิธีที่อธิบายโดย Cohn และคณะ [13] รวม
เข้มข้น GSH ถูกกำหนดเป็นสาร GSH
เข้มข้นบวกคือความเข้มข้นของ GSH เซลล์
หลังสามารถรับได้โดยการคูณภายในเซลล์
เนื้อหา GSH โดยความเข้มข้นของชีวมวล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . สารเคมี
โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต ( SDS )
cetyltrimethyl แอมโมเนียมโบรไมด์ ( ctab ) พอลีออกซีเอทิลีน Lauryl Ether
( brij30 ) พอลีออกซีเอทิลีนซอบิแทนโมโนโอลิ
( tween80 ) และสารเคมีอื่น ๆเกี่ยวกับการซื้อในประเทศจีนหรือเกรด
.
2.2 . จุลินทรีย์และการเพาะปลูก
S . cerevisiae wsh-j701 [ 8 ] เป็นเครื่องมือที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้
สายพันธุ์รักษา โดยในเดือน subcultivated
shints ประกอบด้วยสารสกัดจากมอลต์ 10 % 2 % วุ้น
วัฒนธรรมจากเอียงสดเป็นเชื้อลงในขวดบรรจุ 30 ml 250 ml .
) บ่มที่อุณหภูมิ 10 8C สำหรับ
20 H ในแบบปั่นกับความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาทีเพื่อผลิต precultures
. เหล่านี้แล้ว
เชื้อตัวกลางเดียวกันกับเชื้อ
ขนาด 1.0 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) ชนิดหมัก การหมัก
ได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขเดียวกันที่ใช้ใน
พันธุ์ยกเว้นว่าวัฒนธรรมเวลา 12 ชั่วโมง
สื่อที่มีอยู่ ( ต่อลิตร ) : 30 กลูโคส , 9 extract , 4.1
kh2po4 2.4 MgSO4 ใ 2.4 โซเดียมคลอไรด์ 0.2 zncl2 และ CaCl2 0.2 กรัม

พีเอชเริ่มต้นของอาหารปรับ
5.0
2.3 วิธีการวิเคราะห์
ประมาณ 25 ml วัฒนธรรม broth คือระดับที่ 5 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที
และล้างด้วยน้ำกลั่น 2 ครั้ง

เก็บเซลล์เปียก กำหนดความเข้มข้นวัด
โดยการอบแห้งเซลล์เปียกที่ 105 8C กับน้ำหนักคงที่

นอกจากนี้ เซลล์เปียกได้ แยกกับ 40 %
( v / v ) เอทานอลที่ 30 8C 2 H และระดับที่ 5 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีและ

น่านได้รับใช้กลุ่มการทดสอบ ความเข้มข้นของ GSH พิจารณาตาม
วิธีการอธิบายโดยโคน et al . [ 13 ]
รวมความเข้มข้นของ GSH และความเข้มข้นของ GSH
หมายถึงเซลล์พลัส GSH สมาธิ
หลังได้ โดยการนำเนื้อหา GSH
จากชีวมวลเซลล์ความเข้มข้น