2.3.2. Lipoxygenase activityThe lip

2.3.2. Lipoxygenase activity
The lipoxygenase (LOX) activity was determined by the modified
methods of Kong et al. (2008), by measuring the UV absorption
from the formation of conjugated dienes from linoleic acid. Briefly,
the flour was blended with 50 volumes of deionised water in a
blender for 25 min to extract soluble proteins, including lipoxygenase.
The mixture was centrifuged at 2000g for 15 min and the
supernatant was collected. Before use, 1 ml of supernatant was diluted
with 50 ml of distilled water. The lipoxygenase substrate was
prepared by suspending 1.5 ml of linoleic acid (Sigma Chemical Co.,
St. Louis, MO. Assay >99.0% (GC)) in a borate buffer (50 mM, pH
9.0). The suspension was neutralised by the addition of 1 ml of a
5 mM NaOH solution, shaken with 10 ll of Tween-20, then diluted
to 2.24 mM with a borate buffer (50 mM, pH 9.0) before use. For
the assay, 0.3 ml of diluted supernatant of enzyme extract was
added to 2 ml of linoleic acid substrate suspension, and the mixture
was shaken and incubated in 30 C water for 3 min. The reaction
was terminated by the addition of 5 ml of ethanol; then, 5 ml
of distilled water were added to the mixture before the measurement.
The conjugated diene oxidation products were determined
by measuring absorbance at 234 nm, using a spectrophotometer
(UV-2401PC, Shimadzu, Kyoto, Japan). The residual enzymatic
activity was expressed as U/g. One unit (U) of activity was defined
as the increase in OD per min at 234 nm.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3.2 กิจกรรม Lipoxygenaseกำหนดกิจกรรม lipoxygenase (LOX) โดยการปรับเปลี่ยนวิธีของฮ่องกงและ al. (2008), โดยวัดการดูดซึมรังสียูวีจากการก่อตัวของ dienes กลวงจากกรด linoleic สั้น ๆแป้งที่ผสมกับน้ำ deionised ในปริมาณ 50 ตัวเบลนเดอร์ในนาทีที่ 25 การแยกโปรตีนที่ละลายน้ำ รวม lipoxygenaseส่วนผสมถูก centrifuged ที่ g 2000 สำหรับ 15 นาทีและsupernatant รวบรวม ก่อนใช้ 1 ml ของ supernatant ผสมด้วยน้ำกลั่น 50 มล พื้นผิว lipoxygenase มีโดยระงับ 1.5 มิลลิลิตรของกรด linoleic (ซิกเคมี Co.เซนต์ เดือนวิเคราะห์ > 99.0% (GC)) ในบัฟเฟอร์ borate (50 มม. pH9.0) . การระงับมี neutralised ด้านนอก 1 ml ของการ5 มม. NaOH โซลูชัน เขย่ากับ 10 จะ Tween-20 แล้ว ทำให้เจือจางมม. 2.24 กับ borate บัฟเฟอร์ (50 มม. pH 9.0) ก่อนใช้ สำหรับวิเคราะห์ 0.3 ml ของ supernatant แตกออกของสารสกัดเอนไซม์ได้เพิ่ม 2 ml กรด linoleic พื้นผิวระงับ และส่วนผสมเขย่า และ incubated ในน้ำ 30 C นาที 3 ปฏิกิริยาถูกยกเลิก โดยการเพิ่ม 5 ml ของเอทานอล แล้ว 5 mlน้ำกลั่นถูกเพิ่มลงในส่วนผสมก่อนการประเมินมีกำหนดผลิตภัณฑ์ออกซิเดชัน diene กลวงโดยการวัด absorbance ที่ 234 nm ใช้กับเครื่องทดสอบกรดด่าง(UV 2401PC, Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น) ในส่วนที่เหลือจากเอนไซม์ในระบบกิจกรรมที่แสดงเป็น U/g หนึ่งหน่วย (U) ของกิจกรรมที่กำหนดเป็นการเพิ่มขึ้นของ OD ต่อนาทีที่ 234 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3.2 กิจกรรม lipoxygenase
lipoxygenase (LOX)
กิจกรรมถูกกำหนดโดยการปรับเปลี่ยนวิธีการของฮ่องกงet al, (2008)
โดยการวัดการดูดซึมรังสียูวีจากการก่อตัวของdienes ผันจากกรดไลโนเลอิก สั้น ๆ ,
แป้งถูกผสมกับ 50 ปริมาณน้ำ deionised
ในเครื่องปั่นสำหรับ25 นาทีในการสกัดโปรตีนที่ละลายน้ำได้รวมทั้ง lipoxygenase.
ส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 2000 g นาน 15
นาทีและใสถูกเก็บรวบรวม ก่อนที่จะใช้ 1
มิลลิลิตรของสารละลายเจือจางด้วย50 มล. น้ำกลั่น สารตั้งต้น lipoxygenase
ถูกจัดทำขึ้นโดยการระงับ1.5 มล. ของกรดไลโนเลอิก (ซิกม่า Chemical Co. ,
เซนต์หลุยส์. Assay> 99.0% (GC)) ในบัฟเฟอร์ borate (ที่ 50 มิลลิค่า pH
9.0) ระงับถูกลบล้างโดยนอกเหนือจาก 1
มิลลิลิตรเป็นวิธีการแก้ปัญหาNaOH 5 มิลลิสั่น 10 LL ของ Tween-20 เจือจางแล้ว
2.24 มิลลิกับบัฟเฟอร์ borate (50 มิลลิค่า pH 9.0) ก่อนการใช้งาน สำหรับการทดสอบที่ 0.3 มิลลิลิตรสารละลายเจือจางของสารสกัดจากเอนไซม์ที่ถูกเพิ่มเข้ามาใน2 มิลลิลิตรของการระงับพื้นผิวกรดไลโนเลอิกและส่วนผสมที่ถูกเขย่าและบ่มใน30? C น้ำเป็นเวลา 3 นาที ปฏิกิริยาถูกยกเลิกโดยนอกเหนือจาก 5 มล. เอทานอล; แล้ว 5 มล. ของน้ำกลั่นที่ถูกเพิ่มส่วนผสมก่อนที่วัด. diene ผันผลิตภัณฑ์ซิเดชั่นได้รับการพิจารณาโดยการวัดการดูดกลืนแสงที่234 นาโนเมตรโดยใช้ spectrophotometer (UV-2401PC, Shimadzu เกียวโตญี่ปุ่น) เอนไซม์ที่เหลือกิจกรรมได้รับการแสดงเป็น U / กรัม หนึ่งหน่วย (U) ของกิจกรรมถูกกำหนดเป็นเพิ่มขึ้นในOD ต่อนาทีที่ 234 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3.2 . กิจกรรมของเอนไซม์กลูตาเมตออกซิเดส
ภาค ( LOX ) กิจกรรมที่กำหนดโดยการแก้ไข
วิธีฮ่องกง et al . ( 2008 ) โดยวัดการดูดกลืนแสงยูวี
จากการก่อตัวของ conjugated อีนจากกรดไลโนเลอิก สั้น ๆ ,
แป้งผสมกับ 50 ของปริมาณน้ำใน deionised
เครื่องปั่นสำหรับ 25 นาทีเพื่อสกัดโปรตีนที่ละลายน้ำได้ ได้แก่ ภาค .
ส่วนผสมคือระดับที่ 2000g 15 นาทีและ
น่านรวบรวม . ก่อนใช้ 1 มิลลิลิตร นำเจือจาง
กับ 50 มล. น้ำกลั่น การตั้งต้นเป็นภาค
เตรียมระงับ 1.5 มิลลิลิตรของกรดไลโนเลนิก ( Sigma Chemical Co . ,
เซนต์ หลุยส์ , โม ) > 99.0 % ( GC ) ในบอเรตบัฟเฟอร์ ( 50 มม. M
9.0 ) ระงับถูกทำลายโดยนอกเหนือจาก
1 มิลลิลิตรของสารละลาย NaOH 5 มิลลิเมตรเขย่าด้วย 10 จะ tween-20 แล้วเจือจาง
ถึง 2.24 มม. มีบอเรตบัฟเฟอร์ ( 50 มม. , pH 9.0 ) ก่อนใช้ สำหรับ
( , 0.3 มล. เมื่อนำเอนไซม์สกัดถูก
เพิ่ม 2 มิลลิลิตรของกรด linoleic ( ช่วงล่าง และส่วนผสม
ถูกสั่นคลอนโดยใน 30  C น้ำ 3 นาที ปฏิกิริยา
ถูกยกเลิกโดยนอกเหนือจาก 5 มิลลิลิตรเอทานอล จากนั้น 5 ml
น้ำกลั่นได้เพิ่มส่วนผสมก่อนการวัด และได

โดยออกซิเดชันผลิตภัณฑ์เป็นวัดการดูดกลืนแสงที่ 234 นาโนเมตรโดยใช้ Spectrophotometer
( uv-2401pc Shimadzu , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) กิจกรรมของเอนไซม์
ที่เหลือจะแสดงเป็น U / G . หนึ่งหน่วย ( U ) ของกิจกรรมที่ถูกกำหนดไว้
เป็นเพิ่ม OD ต่อนาทีที่ 234 nm .