Spin-trapping and detection with ES

Spin-trapping and detection with ESR was carried out to determine the ability to form radicals at different storage times.The ESR measurements were made in a JEOL FR 30 ESR spectrophotometer (JEOL Ltd., Tokyo, Japan) at room temperature.N-t-Butyl-a-phenyl nitrone (PBN) (Sigma–Aldrich Chemie, Stein-heim, Germany) was used as spin trap. The method is based on the spin-trap method by Carlsen, Andersen and Skibsted (2001).Briefly, the meat sample (2.00 g) was cut in small pieces and suspended in 14.25 ml of 50 mM MES buffer pH 5.7. This solution was homogenized at 13500 rpm for 30 s using an Ultra Turrax T25 homogenizer (Jane and Kunkel IKA-Labortechnick, Staufen,Germany). Then, 0.75 ml of 400 mM PBN dissolved in ethanol was added to each sample. Four millilitres of this solution was transferred to 10 ml glass tubes with screw caps and incubated at 55
C for 3 h. This solution was filtered through filter paper before being transferred into a quartz capillary tube in the ESR cavity for measurement. The operational settings for the ESR equipment were: microwave power 16 mW, sweep width 50.00 Gauss, sweep time 2 min, modulation width 1.25 Gauss,time constant 0.3 s. The height of first peak of the centerfield duplet relative to the height of the built-in Mn(II)-standard was calculated and used to quantify the relative concentrations of radical spin adducts in the samples. A solution of TEMPO (2,2,6,6-tetramethylpiperidin-1-yloxy, Aldrich, Steinheim, Germany)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หมุนดักและตรวจจับ ESR ได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบความสามารถในการแบบฟอร์มอนุมูลต่าง ๆ เก็บเวลา วัดค่า ESR ในสเปค JEOL FR 30 ESR (JEOL จำกัด โตเกียว ญี่ปุ่น) ที่อุณหภูมิห้องทำ N-t-บิวทิล-a-ฟีนิล nitrone (PBN) (Chemie Sigma-Aldrich สไตน์ไฮม์ เยอรมนี) ถูกใช้เป็นกับดักของสปิน วิธีการที่อิงวิธีดักสปิน Carlsen แอนเดอร์เซ็น และ Skibsted (2001) สั้น ๆ ตัวอย่างเนื้อสัตว์ (2.00 กรัม) ตัดชิ้นเล็ก ๆ และลอยอยู่ใน 50 มม. MES บัฟเฟอร์ pH 5.7 14.25 ml โซลูชันนี้แก้ไข homogenized ที่ 13500 rpm 30 s ใช้ homogenizer ที่เกี่ยวกับ Turrax T25 Ultra (เจนและ IKA Kunkel-Labortechnick, Staufen เยอรมนี) แล้ว 0.75 มล. 400 มม. PBN ละลายในเอทานอลถูกเพิ่มไปแต่ละอย่าง มิลลิลิตร 4 การแก้ปัญหานี้ถูกโอนไปยังท่อแก้ว 10 มล.กับหมวกสกรู และรับการกก 55 c เป็นเวลา 3 ชั่วโมง โซลูชันนี้ถูกกรองผ่านกระดาษกรองก่อนที่จะส่งเข้าไปในหลอดควอทซ์ในโพรง ESR สำหรับการวัด ตั้งค่าการทำงานสำหรับอุปกรณ์ ESR: ไมโครเวฟ mW พลังงาน 16 กวาดกว้าง 50.00 Gauss กวาดเวลา 2 นาที ปรับความกว้าง 1.25 Gauss เวลาคง 0.3 s ความสูงของ peak แรกของ duplet centerfield สัมพันธ์กับความสูงของการตัว Mn (II) -มาตรฐานคำนวณ และใช้การวัดปริมาณความเข้มข้นที่ญาติของอนุมูลสปิน adducts ในตัวอย่างนี้ โซลูชันของจังหวะ (2,2,6,6-tetramethylpiperidin-1-yloxy, Aldrich, Steinheim เยอรมนี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Spin-ดักและการตรวจสอบกับ ESR ได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบความสามารถในการรูปแบบการจัดเก็บข้อมูลที่อนุมูลวัด times.The ESR ที่แตกต่างกันได้ทำใน JEOL FR 30 ESR spectrophotometer (JEOL จำกัด กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) ณ ห้อง temperature.Nt บิวทิล -A-phenyl nitrone (PBN) (Sigma-Aldrich ย์สไตน์-Heim, เยอรมนี) ถูกใช้เป็นกับดักของสปิน วิธีการที่จะขึ้นอยู่กับวิธีการสปินกับดักโดย Carlsen เซนและ Skibsted (2001) .Briefly ตัวอย่างเนื้อ (2.00 กรัม) ถูกตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ และระงับใน 14.25 มิลลิลิตรขนาด 50 มม MES บัฟเฟอร์ค่า pH 5.7 การแก้ปัญหานี้ได้รับการหดหายที่ 13500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 วินาทีโดยใช้อัลตร้า Turrax T25 homogenizer (เจนและเกิล IKA-Labortechnick, Staufen, เยอรมนี) จากนั้น 0.75 มล. 400 มิลลิ PBN ละลายในเอทานอลถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่าง สี่มิลลิลิตรของการแก้ปัญหานี้ได้ถูกโอนไปยังหลอดแก้ว 10 มล. ที่มีฝาเกลียวและบ่มที่ 55 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมง การแก้ปัญหานี้ได้รับการกรองผ่านกระดาษกรองก่อนที่จะถูกโอนลงในหลอดควอทซ์เส้นเลือดฝอยในช่อง ESR สำหรับการตรวจวัด การตั้งค่าการดำเนินงานสำหรับอุปกรณ์ ESR อยู่: พลังไมโครเวฟ 16 เมกะวัตต์กวาดกว้าง 50.00 เกาส์กวาดเวลา 2 นาทีมอดูเลตความกว้าง 1.25 Gauss เวลาคงที่ 0.3 s ความสูงของยอดเขาครั้งแรกของ Centerfield duplet เทียบกับความสูงของในตัว Mn (II) แสตนดาร์ดที่คำนวณได้และใช้ปริมาณความเข้มข้นของญาติของ adducts สปินที่รุนแรงในกลุ่มตัวอย่าง การแก้ปัญหาของจังหวะ (2,2,6,6-tetramethylpiperidin-1-yloxy ดิช, Steinheim, เยอรมนี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หมุนดักตรวจจับด้วย ESR มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาความสามารถในการสร้างอนุมูลอิสระ ที่ระยะเวลาการเก็บรักษาที่แตกต่างกัน จากการวัดได้ในจอล fr 30 ESR Spectrophotometer ( จอล จำกัด โตเกียว ประเทศญี่ปุ่น ณห้อง temperature.n-t-butyl-a-phenyl nitrone ( pbn ) ( ซิกม่า Aldrich CHEMIE ( สไตน์ไฮม์ , เยอรมนี ) คือใช้เป็นกับดักสปิน . โดยอาศัยวิธีกับดักสปินโดยคาร์ลเซิ่น แอนเดอร์เซน และ skibsted ( 2001 ) สั้น ๆ , อาหารตัวอย่าง ( 2.00 กรัม ) ถูกตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆและพักใน 14.25 กรัม 50 mM MES เฟอร์พีเอช 5.7 โซลูชั่นนี้อยู่ที่ 13 , 000 รอบต่อนาทีบด 30 ใช้ Ultra turrax t25 โฮโมจิไนซ์ ( เจน และ คันเกิล Ika labortechnick Staufen , เยอรมนี ) แล้ว 0.75 ml 400 มม. pbn ละลายในเอทานอลที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่าง 4 มิลลิลิตรของสารละลายนี้ถูกย้ายไปที่ 10 มล แก้วหลอดสกรูหมวกและบ่มที่ 55 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมง วิธีนี้ถูกกรองผ่านกระดาษกรอง ก่อนที่จะถูกโอนเข้าไปในเส้นเลือดฝอยหลอดควอทซ์ในโพรง ESR สำหรับการวัด การตั้งค่าการใช้พลังงานจากอุปกรณ์ไมโครเวฟ 16 เมกะวัตต์ กวาดกว้าง 50.00 เกาส์ กวาด เวลา 2 นาที การปรับความกว้าง 1.25 เกาส์เวลาคงที่ 0.3 วินาที ความสูงของพีคแรกของ centerfield duplet เมื่อเทียบกับความสูงของแมงกานีสในตัว ( 2 ) มาตรฐานคำนวณและใช้เพื่อวัดปริมาณความเข้มข้นสัมพัทธ์ ซึ่งหมุน adducts ในตัวอย่างที่ โซลูชั่นของจังหวะ ( 2,2,6,6-tetramethylpiperidin-1-yloxy Aldrich , steinheim , เยอรมัน )