Aptamers are nucleic acid-based hig

Aptamers are nucleic acid-based high affinity ligands that are able to capture their corresponding target through molecular recognition. In this study, several DNA aptamers with high affinity and specificity for β-glucuronidases (PGUS-E) were obtained by our modified SELEX method. Among them, Apt5 and Apt9 were selected as representatives and covalently linked to magnetic beads, respectively. The aptamer-modified magnetic beads were characterized and successfully applied to one-step purification and immobilization of PGUS-E from the complex cell lysates. By conveniently adjusting the pH and ion strength, the PGUS-E purities reached 84% for Apt5-modified beads and 88% for Apt9-modified beads. Moreover, the maximum PGUS-E capturing capacity of the Apt5 and Apt9 modified magnetic beads were found to be 31.75 μg/mg and 32.95 μg/mg, respectively. The immobilized PGUS-E on aptamer-based magnetic beads showed good reusability, and the conversion of glycyrrhizin still remained more than 70% after 7 cycles. In addition, the aptamer-modified beads support can be easily regenerated, and the conversion rate of glycyrrhizin (GL) was still 62% after the 7th cycle of regeneration. This investigation can be easily extended to other enzyme systems and may help open a generic route to develop a novel enzyme immobilization technology for biocatalysis based on aptamer.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Aptamers จะใช้กรดนิวคลีอิกยุ่ง ligands ที่สามารถจับเป้าหมายที่สอดคล้องกันของพวกเขาผ่านการรับรู้โมเลกุล ในการศึกษานี้ หลาย aptamers ดีเอ็นเอ มีความสัมพันธ์สูงและ specificity สำหรับβ-glucuronidases (PGUS-E) ได้รับมา โดยวิธีของ SELEX แก้ไข ในหมู่พวกเขา Apt5 และ Apt9 ถูกเลือกเป็นตัวแทน และ covalently กับเม็ดแม่เหล็ก ตามลำดับ แก้ไข aptamer เม็ดแม่เหล็กถูกลักษณะ และนำไปใช้เป็นขั้นตอนเดียวทำให้บริสุทธิ์และการตรึงอี PGUS จาก lysates เซลล์ที่ซับซ้อน โดยการเชิญปรับความแรงของไอออนและ pH, purities PGUS-E ถึง 84% ในลูกปัดที่มีการปรับเปลี่ยน Apt5 และ 88% สำหรับลูกปัดที่มีการปรับเปลี่ยน Apt9 นอกจากนี้ กำลังจับอี PGUS สูงสุดของ Apt5 และ Apt9 ปรับเปลี่ยนเม็ดแม่เหล็กพบได้ 31.75 μg mg และ μg 32.95/มิลลิกรัม ตามลำดับ PGUS-E เอนไซม์บน aptamer ที่ใช้แม่เหล็กเม็ดพบ reusability ดี และการแปลงของ glycyrrhizin ยังคงยังคงมากกว่า 70% หลังจาก 7 รอบ สนับสนุนแก้ไข aptamer ประคำสามารถจะสร้างได้ และอัตราการแปลงของ glycyrrhizin (GL) ก็ยังคง 62% หลัง 7 รอบของการฟื้นฟู ตรวจสอบนี้สามารถได้ขยายระบบเอนไซม์อื่น ๆ และอาจช่วยเปิดเส้นทางทั่วไปในการพัฒนาเทคโนโลยีตรึงโปเอนไซม์นวนิยายในการ biocatalysis ตาม aptamer

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Aptamers เป็นกรดนิวคลีอิกตามแกนด์ความสัมพันธ์กันสูงที่มีความสามารถในการจับภาพเป้าหมายที่สอดคล้องกันของพวกเขาผ่านการรับรู้ในระดับโมเลกุล ในการศึกษานี้ aptamers ดีเอ็นเอหลายกับความสัมพันธ์และความจำเพาะสูงสำหรับβ-glucuronidases (PGUS-E) ที่ได้รับจากการปรับเปลี่ยนวิธีการ SELEX ของเรา ในหมู่พวกเขา Apt5 Apt9 และได้รับการคัดเลือกเป็นตัวแทนและเชื่อมโยงไปยัง covalently ลูกปัดแม่เหล็กตามลำดับ aptamer แก้ไขลูกปัดแม่เหล็กมีลักษณะและนำไปใช้ในการประสบความสำเร็จในการทำให้บริสุทธิ์ขั้นตอนเดียวและตรึง PGUS-E จาก lysates เซลล์ที่ซับซ้อน โดยการปรับค่า pH สะดวกและความแข็งแรงของไอออนที่ purities PGUS-E ถึง 84% สำหรับลูกปัด Apt5 แก้ไขและ 88% สำหรับลูกปัด Apt9 แก้ไข นอกจากนี้ยังมีความสามารถในการจับภาพสูงสุด PGUS-E ของ Apt5 และ Apt9 ปรับเปลี่ยนลูกปัดแม่เหล็กพบว่า 31.75 ไมโครกรัม / มก. และ 32.95 ไมโครกรัม / mg ตามลำดับ ตรึง PGUS-E ใน aptamer ตามลูกปัดแม่เหล็กแสดงให้เห็นว่าสามารถนำมาใช้ที่ดีและการเปลี่ยนแปลงของ glycyrrhizin ยังคงยังคงมากกว่า 70% หลังจาก 7 รอบ นอกจากนี้การสนับสนุนลูกปัด aptamer แก้ไขที่สามารถสร้างใหม่ได้อย่างง่ายดายและอัตราการแปลงของ glycyrrhizin (GL) ยังคงเป็น 62% หลังจากรอบที่ 7 ของการฟื้นฟู การตรวจสอบนี้สามารถขยายได้อย่างง่ายดายกับระบบเอนไซม์อื่น ๆ และอาจช่วยให้เปิดเส้นทางการทั่วไปในการพัฒนาเทคโนโลยีการตรึงเอนไซม์ใหม่สำหรับ biocatalysis ขึ้นอยู่กับ aptamer

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แอปตาเมอร์เป็นกรดนิวคลีอิกโดยสูงจากปกติที่สามารถจับเป้าหมายที่สอดคล้องกันของพวกเขาผ่านการรับรู้ของโมเลกุล ในการศึกษานี้ แอปตาเมอร์ดีเอ็นเอหลายกลุ่มที่มีความจำเพาะของบีตา - glucuronidases ( pgus-e ) ที่ได้จากซีเล็กซ์ของเราแก้ไขวิธีการ ในหมู่พวกเขา และ apt5 apt9 ได้รับเลือกเป็นผู้แทนและ covalently เชื่อมโยงกับลูกปัดแม่เหล็ก ตามลำดับการแก้ไข aptamer ลูกปัดแม่เหล็กมีลักษณะความบริสุทธิ์และใช้ขั้นตอนเดียวกับการตรึง pgus-e จาก lysates เซลล์ที่ซับซ้อน โดยสะดวกปรับ pH และไอออนความแข็งแกร่ง pgus-e ความบริสุทธิ์ถึง 84 % apt5 ดัดลูกปัดและ 88% สำหรับ apt9 ดัดลูกปัด นอกจากนี้pgus-e จับสูงสุดความจุของ apt5 apt9 ลูกปัดแม่เหล็กและดัดแปลงได้ 31.75 μกรัม / mg และ 32.95 μกรัม / ลิตร ตามลำดับ ตรึง pgus-e บนพื้นฐานว่า aptamer ลูกปัดแม่เหล็กที่ใช้ และการเปลี่ยนแปลงของ glycyrrhizin ยังคงมากกว่า 70% หลังจาก 7 รอบ นอกจากนี้ aptamer แก้ไขสนับสนุนลูกปัดสามารถได้อย่างง่ายดายถูกสร้างขึ้นใหม่และอัตราการแปลงของ glycyrrhizin ( GL ) ยัง 62 % หลังจาก 7 รอบของการฟื้นฟู . การตรวจสอบนี้สามารถขยายได้อย่างง่ายดายเพื่อระบบเอนไซม์อื่น ๆและอาจช่วยเปิดเส้นทางทั่วไปที่จะพัฒนาใหม่ของการตรึงเอนไซม์เทคโนโลยี วัสดุที่ใช้ถูพื้นตาม aptamer .