Whole blood cultures were done as d

Whole blood cultures were done as described previously [7]. Briefly, we collected venous blood into heparinized tubes and cultured the collected cells at a dilution of 1:4 in RPMI (Gibco,Auckland, NZ) containing 10 mM glutamine (Sigma-Aldrich, Inc., Saint. Louis, Missouri, USA) and 100 μg/ml gentamicin (Sigma-Aldrich, Inc., Saint. Louis, Missouri, USA). The cells were cultured within 6 hours of collection and were maintained in a humidified environment of 5% CO2 at 37°C for 24 hours for detection of IL-10 and 5 days for the other cytokines in the presence or absence of Ascaris lumbricoides antigen (10 ug/mL). Cytokine concentrations were measured using commercial assays as recommended (R & D Systems, Minneapolis, USA). The setection limits (low/high) in pg/mL for each cytokine were as follows: IL-5 (15.6/500), IL-13 (62.5/4,000), IFN-γ (18.5/300), and IL-10 (31.3/500). The concentration values of the cytokine production by the antigen-stimulated cells were obtained after subtraction by the concentration values of the respective cytokine production by non-stimulated cells (background). Responders were defined as those children with cytokine concentrations above the lower detection limits.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัฒนธรรมของเลือดทั้งหมดทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [7] สั้น ๆ เรารวบรวมเลือดดำใน heparinized หลอด และ cultured รวบรวมเซลล์ที่เจือจาง 1:4 ใน RPMI (Gibco โอ๊คแลนด์ นิวซีแลนด์) มี 10 มม. glutamine (Aldrich ซิก Inc. เซนต์ Louis มิสซูรี สหรัฐอเมริกา) และ 100 μg/ml gentamicin (Aldrich ซิก Inc. เซนต์ Louis มิสซูรี สหรัฐอเมริกา) เซลล์มีอ่างภายใน 6 ชั่วโมงของคอลเลกชัน และถูกเก็บรักษาในสภาวะ 5% CO2 ที่ 37° C humidified 24 ชั่วโมงตรวจ IL-10 และ 5 วันสำหรับ cytokines อื่น ๆ ในสถานะการขาดงาน Ascaris lumbricoides ตรวจหา (10 ยู จี/mL) ความเข้มข้นอย่างไร Cytokine ถูกวัดโดยใช้พาณิชย์ assays เป็นแนะนำ (R & D ระบบ มิ สหรัฐอเมริกา) Setection จำกัด (สูงต่ำ) ใน pg/mL สำหรับแต่ละอย่างไร cytokine มีดังนี้: IL-5 (15.6/500), IL-13 (62.5/4000), IFN-γ (18.5/300), และ IL-10 (31.3/500) ค่าความเข้มข้นของการผลิตอย่างไร cytokine โดยเซลล์ถูกกระตุ้นตรวจหาได้รับหลังจากการลบ โดยค่าความเข้มข้นของการผลิตอย่างไร cytokine ที่เกี่ยวข้องโดยเซลล์ไม่ถูกกระตุ้น (พื้นหลัง) Responders ถูกกำหนดเป็นเด็กที่มีความเข้มข้นอย่างไร cytokine เหนือตรวจสอบขีดจำกัดล่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัฒนธรรมเลือดได้ทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [7] สั้น ๆ เราเก็บเลือดดำลงไปในหลอด heparinized และเพาะเลี้ยงเซลล์เก็บที่เจือจาง 1: 4 ใน RPMI (Gibco, Auckland, NZ) ที่มีกลูตามีขนาด 10 MM. (Sigma-Aldrich อิงค์เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) และ 100 ไมโครกรัม / มล GENTAMICIN (Sigma-Aldrich อิงค์เซนต์. หลุยส์, มิสซูรีสหรัฐอเมริกา) เซลล์ที่ถูกเลี้ยงภายใน 6 ชั่วโมงของการเก็บเงินและถูกเก็บรักษาในสภาพแวดล้อมที่ความชื้นของ CO2 5% ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงเพื่อให้การตรวจสอบของ IL-10 และ 5 วัน cytokines อื่น ๆ ในการแสดงตนหรือไม่มีแอนติเจนพยาธิ lumbricoides ( 10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ความเข้มข้นของไซโตไคน์ถูกวัดโดยใช้การวิเคราะห์เชิงพาณิชย์ตามคำแนะนำ (R & D Systems, Minneapolis, สหรัฐอเมริกา) ข้อ จำกัด setection (ต่ำ / สูง) ใน PG / mL สำหรับแต่ละไซโตไคน์มีดังนี้: IL-5 (15.6 / 500), IL-13 (62.5 / 4,000 บาท), IFN-γ (18.5 / 300) และ IL-10 (31.3 / 500) ค่าความเข้มข้นของการผลิตไซโตไคน์จากเซลล์แอนติเจนกระตุ้นที่ได้รับหลังจากการลบโดยค่าความเข้มข้นของการผลิตไซโตไคน์ตามลำดับโดยเซลล์ที่ไม่กระตุ้น (พื้นหลัง) การตอบสนองที่ถูกกำหนดให้เป็นเด็กที่มีความเข้มข้นของไซโตไคน์สูงกว่าวงเงินที่ต่ำกว่าการตรวจสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัฒนธรรมของเลือดทั้งหมด ทำไปตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 7 ] สั้นเราเก็บเลือดจากหลอดเลือดดำในหลอดเพาะเลี้ยงเซลล์และกลุ่มตัวอย่างที่เจือจาง 1 : 4 ใน RPMI ( gibco , Auckland , NZ ) ประกอบด้วย 10 มม. กลูตามีน ( ซิกม่า Aldrich , อิงค์ , นักบุญ Louis , Missouri , USA ) และ 100 μ g / ml ยาเจนตาไมซิน ( ซิกม่า Aldrich , อิงค์ , นักบุญ หลุยส์ , มิสซูรี , สหรัฐอเมริกาเซลล์เพาะเลี้ยงภายใน 6 ชั่วโมงของการเก็บและรักษาในสภาพแวดล้อมของ CO2 humidified 5% ที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงเพื่อตรวจหาเตอร์และ 5 วันสำหรับชนิดอื่น ๆ ในการแสดงหรือการขาดของพยาธิแอนติเจน ( 10 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ) ไซโตไคน์ถูกวัดโดยใช้วิธีเชิงปริมาณที่แนะนำ ( R & D ระบบ , Minneapolis , USA )การ setection จำกัด ( ต่ำ / สูง ) ใน pg / ml ในแต่ละไซโตไคน์ ดังนี้ il-5 ( 15.6 / 500 ) , il-13 ( 62.5 / 4000 ) , IFN - γ ( 18.5 / 300 ) และเตอร์ ( 2552 / 500 ) โดยมีค่าความเข้มข้นของไซโตไคน์ที่ผลิตโดยแอนติเจนกระตุ้นเซลล์ได้หลังจากการลบโดยมีค่าความเข้มข้นของการผลิตไซโตไคน์ที่เกี่ยวข้องด้วยไม่ใช่กระตุ้นเซลล์ ( พื้นหลัง )บริการกำหนดเป็นเด็กที่มีความเข้มข้นสูงกว่าขีดจำกัดการตรวจหาไซโตไคน์ที่ลดลง