Hormonal induction of egg productio

Hormonal induction of egg production and the in-vitro
fertilization of eggs
The purpose of this experiment was to determine if B. baxteri
ovulate in response to a single mixed dose of 500 IU
hCG and 4 μg LHRHa, or if B. baxteri require a series of
doses with these hormones for the final maturation of
oocytes. The measured variables were the number of ovulating females, the number of eggs ovulated, and after invitro
fertilization the percent cleavage, neurulation and
swim-up. Swim-up is when aquatic amphibian larvae
exhaust their yolk sac and 'swim-up' to begin endogenous
feeding from their supine position.
Twenty female B. baxteri were randomly divided into two
groups of ten. One group was administered a single normally
'ovulatory' dose of 500 IU of hCG and 4 μg LHRHa
(Sigma Aldrich, St. Louis, L4513). None of these females
was induced to spawn and this group's response was considered
the unprimed control. Thereafter, this group was
considered as having one priming of 500 IU of hCG and
4 μg LHRHa combined. Seventy-two hrs later, both this
previously primed group and the group to receive one
priming, were administered an 'anovulatory' dose of 100
IU hCG and 0.8 μg LHRHa combined. This dosage is 20%
the ovulatory dose and did not induce ovulation in either
group previously having received one or no priming. After
an additional period of 96 hrs, both groups were administered
an normally ovulatory dose of 500 IU of hCG plus
4 μg LHRHa combined, after which ovulation occurred.
Consequently, prior to administration of the final ovulatory
hormone dose one group of females had received two
primings while the other group had received one priming
as shown in Table 1. All hormones were administered in
200 μl of sterile water through intra-peritoneal injection.
Individual animals were placed into single 11.4 L plastic
boxes containing 1.5 cm of Simplified Amphibian Ringers
solution to
lengthen the time the eggs would remain fertilizable. The
SAR was changed if soiling was apparent and the spawning
of eggs monitored. Eleven and half hrs after the ovulatory
dose, the first females were observed producing eggs.
The first eggs were produced between 11.5 to 12.5 hrs PA
and were collected at hourly sampling times until 24 hrs
PA. At each sampling time, a sub-sample of 100 to 150 eggs from each female were placed in one or more dry
Petri dishes. One Petri dish per male was used when fertilization
by multiple males was attempted. Approximately
100 μl of urine containing sperm samples of good motility
and concentration were pipetted onto the egg string,
the eggs and sperm mixed and then left for 10 minutes
before flooding the dishes with water.
Fertilization rates were assessed as the percentage of
cleaved eggs at larval stage 3 to 6 [28] from 6 to 8 hrs after
the application of sperm to the eggs. Counts of cleaved
eggs and unfertilized eggs were taken using a stereo dissecting
microscope (Omano™) and the percent cleavage
was calculated. Two indices of egg/embryo quality were
used: 1) the percentage of eggs reaching neurulation, larval
stage 26–28 [28]; and 2) the percentage of embryos
reaching 'swim-up' (endogenous feeding, larval stage 44–
46) [28]. After conclusion of the experiments, tadpoles
were released to the U.S. Fish and Wildlife Service as part
of the B. baxteri reintroduction program.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เหนี่ยวนำฮอร์โมนไข่ผลิตและในเครื่องการปฏิสนธิของไข่วัตถุประสงค์ของการทดลองนี้เป็นการ กำหนดว่าถ้าเกิด baxteriovulate การผสมปริมาณเดียวของ 500 IUของ hCG และ 4 μg LHRHa หรือ ถ้า baxteri เกิดต้องใช้ชุดของปริมาณ มีฮอร์โมนเหล่านี้สำหรับพ่อแม่ที่สุดท้ายของแช่สารละลาย ตัวแปรที่วัดมีจำนวนเพศหญิง ovulating จำนวนไข่ ovulated และ หลัง invitroปัจจุบันปริเปอร์เซ็นต์ neurulation และสระว่ายน้ำ สระว่ายน้ำเป็นเมื่อตัวอ่อนสัตว์น้ำ amphibianท่อไอเสียแดง sac และ 'สระว่ายน้ำ' ประเดิม endogenous ของพวกเขาอาหารจากตำแหน่งของ supine20 baxteri เกิดหญิงถูกสุ่มแบ่งออกเป็นสองกลุ่มสิบ กลุ่มหนึ่งดูแลเดียวตามปกติพื้นที่ซึ่งมีทั้ง 500 IU ของ hCG และ 4 μg LHRHa 'คะ'(ซิก Aldrich, St. Louis, L4513) หญิงเหล่านี้ไม่มีถูกทำให้เกิดการวางไข่นี้ถือเป็นการตอบสนองของกลุ่มตัวควบคุม unprimed หลังจากนั้น กลุ่มนี้ได้ถือว่าเป็นมีด้วยหนึ่งของ 500 IU ของของ hCG และ4 μg รวม LHRHa เจ็ดสองชั่วโมงต่อมา ทั้งนี้ก่อนหน้านี้ งเยียกลุ่มและกลุ่มได้รับปั๊ม มีจัดการพื้นที่ซึ่งมีทั้ง 'anovulatory' 100ของ IU hCG และ 0.8 μg LHRHa รวม ขนาดนี้เป็น 20%ยาคะ และไม่ก่อให้เกิดการตกไข่ในกลุ่มมีได้รับก่อนหน้านี้ หนึ่ง หรือด้วยไม่ หลังจากรอบระยะเวลาเพิ่มเติมของ 96 น. ทั้งกลุ่มได้รับการดูแลยาผิดปกติคะของ 500 IU ของบวกของ hCG4 μg LHRHa combined, after which ovulation occurred.Consequently, prior to administration of the final ovulatoryhormone dose one group of females had received twoprimings while the other group had received one primingas shown in Table 1. All hormones were administered in200 μl of sterile water through intra-peritoneal injection.Individual animals were placed into single 11.4 L plasticboxes containing 1.5 cm of Simplified Amphibian Ringerssolution tolengthen the time the eggs would remain fertilizable. TheSAR was changed if soiling was apparent and the spawningof eggs monitored. Eleven and half hrs after the ovulatorydose, the first females were observed producing eggs.The first eggs were produced between 11.5 to 12.5 hrs PAand were collected at hourly sampling times until 24 hrsPA. At each sampling time, a sub-sample of 100 to 150 eggs from each female were placed in one or more dryPetri dishes. One Petri dish per male was used when fertilizationby multiple males was attempted. Approximately100 μl of urine containing sperm samples of good motilityand concentration were pipetted onto the egg string,the eggs and sperm mixed and then left for 10 minutesbefore flooding the dishes with water.Fertilization rates were assessed as the percentage ofcleaved eggs at larval stage 3 to 6 [28] from 6 to 8 hrs afterthe application of sperm to the eggs. Counts of cleavedeggs and unfertilized eggs were taken using a stereo dissectingmicroscope (Omano™) and the percent cleavagewas calculated. Two indices of egg/embryo quality wereused: 1) the percentage of eggs reaching neurulation, larvalstage 26–28 [28]; and 2) the percentage of embryosreaching 'swim-up' (endogenous feeding, larval stage 44–46) [28]. After conclusion of the experiments, tadpoleswere released to the U.S. Fish and Wildlife Service as partof the B. baxteri reintroduction program.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเหนี่ยวนำฮอร์โมนของการผลิตไข่และในหลอดทดลองการปฏิสนธิของไข่วัตถุประสงค์ของการทดลองนี้คือการตรวจสอบว่าบีbaxteri ovulate ในการตอบสนองต่อยาที่ผสมเดียว 500 IU เอชซีจีและ 4 ไมโครกรัม LHRHa หรือถ้า baxteri บีจำเป็นต้องมีชุด ของปริมาณที่มีฮอร์โมนเหล่านี้สำหรับการเจริญเติบโตสุดท้ายของเซลล์ไข่ ตัวแปรที่วัดเป็นจำนวนหญิงตกไข่จำนวนของไข่ตกและหลังจาก invitro ปฏิสนธิแตกแยกเปอร์เซ็นต์ neurulation และว่ายน้ำขึ้น สระว่ายน้ำคือเมื่อตัวอ่อนสัตว์ครึ่งบกครึ่งน้ำหมดถุงไข่แดงของพวกเขาและว่ายน้ำขึ้น'ที่จะเริ่มต้นภายนอกให้อาหารจากท่านอนหงายของพวกเขา. ยี่สิบหญิง baxteri บีถูกแบ่งออกเป็นสองกลุ่มสิบ กลุ่มหนึ่งเป็นยาเดียวปกติ'ตกไข่' ขนาด 500 IU ของเอชซีจีและ 4 ไมโครกรัม LHRHa (ซิกม่าดิช, เซนต์หลุยส์ L4513) ไม่มีของหญิงเหล่านี้ได้รับการเหนี่ยวนำให้เกิดการวางไข่และการตอบสนองของกลุ่มนี้ได้รับการพิจารณาการควบคุมunprimed หลังจากนั้นกลุ่มนี้ได้รับการพิจารณาว่ามีหนึ่งรองพื้น 500 IU ของเอชซีจีและ 4 ไมโครกรัม LHRHa รวม เจ็ดสิบสองชั่วโมงต่อมาทั้งสองนี้กลุ่มเตรียมไว้ก่อนหน้านี้และกลุ่มที่จะได้รับหนึ่งรองพื้น, เป็นยาว่า 'เม็ด' ขนาด 100 IU เอชซีจีและ 0.8 ไมโครกรัม LHRHa รวม ยานี้เป็น 20% ปริมาณตกไข่และไม่ก่อให้เกิดการตกไข่ทั้งในกลุ่มก่อนหน้านี้ได้รับการรองพื้นหนึ่งหรือไม่ หลังจากระยะเวลาที่เพิ่มขึ้นของ 96 ชั่วโมงทั้งสองกลุ่มเป็นยายาตกไข่ปกติ500 IU ของเอชซีจีบวก4 ไมโครกรัม LHRHa รวมหลังจากที่ตกไข่เกิดขึ้น. ดังนั้นก่อนที่จะมีการบริหารงานของตกไข่สุดท้ายฮอร์โมนยากลุ่มหนึ่งของผู้หญิงได้รับสองprimings ในขณะที่กลุ่มอื่น ๆ ที่ได้รับหนึ่งรองพื้นดังแสดงในตารางที่1 ฮอร์โมนทั้งหมดได้รับการบริหารจัดการใน200 ไมโครลิตรของน้ำหมันผ่านการฉีดภายในช่องท้อง. สัตว์ส่วนบุคคลที่ถูกวางไว้ในที่เดียว 11.4 L พลาสติกกล่องที่มี1.5 ซมย่อของสัตว์สะเทินน้ำสะเทินบก Ringers วิธีการแก้ยืดระยะเวลาที่ไข่จะยังคง fertilizable SAR ก็เปลี่ยนถ้าสกปรกก็เห็นได้ชัดและวางไข่ของไข่ตรวจสอบ อีเลฟเว่นและครึ่งหลังการตกไข่ยาหญิงคนแรกที่ถูกตั้งข้อสังเกตการผลิตไข่. ไข่ครั้งแรกที่ถูกผลิตระหว่าง 11.5-12.5 นซิลเวเนียและถูกเก็บในช่วงเวลาการสุ่มตัวอย่างชั่วโมงจนถึง24 ชั่วโมงPA ในแต่ละช่วงเวลาการสุ่มตัวอย่างย่อยตัวอย่าง 100-150 ไข่จากแต่ละเพศหญิงถูกวางไว้ในหนึ่งหรือมากกว่าแห้งจานเลี้ยงเชื้อ หนึ่งจานเลี้ยงเชื้อต่อชายถูกนำมาใช้เมื่อการปฏิสนธิโดยเพศชายหลายความพยายาม ประมาณ100 ไมโครลิตรของปัสสาวะที่มีตัวอย่างสเปิร์มของการเคลื่อนไหวที่ดีและความเข้มข้นที่ถูกปิเปตบนสตริงไข่ไข่และสเปิร์มที่ผสมแล้วทิ้งไว้ประมาณ10 นาทีก่อนที่จะเกิดน้ำท่วมจานด้วยน้ำ. อัตราการปฏิสนธิได้รับการประเมินเป็นร้อยละของไข่เกาะติดที่ตัวอ่อนขั้นตอนที่ 3-6 [28] 6-8 ชั่วโมงหลังจากที่แอพลิเคชันของตัวอสุจิไข่ที่ เคานต์แห่ง cleaved ไข่และไข่ unfertilized ถูกนำมาใช้ผ่าตัดสเตอริโอกล้องจุลทรรศน์(Omano ™) และความแตกแยกร้อยละที่คำนวณได้ สองดัชนีคุณภาพ / ไข่ตัวอ่อนที่ถูกนำมาใช้: 1) ร้อยละของไข่ถึง neurulation ที่ตัวอ่อนเวที26-28 [28]; และ 2) ร้อยละของตัวอ่อนถึง'ว่ายน้ำขึ้น (การให้อาหารภายนอกตัวอ่อนระยะ 44- 46) [28] หลังจากที่ข้อสรุปของการทดลองที่ลูกอ๊อดที่ถูกปล่อยให้ปลาสหรัฐอเมริกาและบริการสัตว์ป่าเป็นส่วนหนึ่งของโปรแกรมประกอบบีbaxteri

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ฮอร์โมนเหนี่ยวนำของการผลิตไข่และในการปฏิสนธิของไข่

จุดประสงค์ของการทดลองนี้เพื่อตรวจสอบว่า บี baxteri
สร้างไข่ในการตอบสนองต่อฤทธิ์ผสม 500 IU
HCG และ 4 μกรัม lhrha หรือถ้า พ. baxteri ต้องการชุด
doses กับฮอร์โมนเหล่านี้สำหรับการสุกของไข่
สุดท้าย . การวัดตัวแปรจำนวนไข่ตกแล้ว เพศหญิงจำนวนไข่ ovulated และหลังจากปฏิสนธิ invitro

ตัว neurulation เปอร์เซ็นต์ , และว่ายน้ำขึ้น ว่ายน้ำขึ้นเมื่อตัวอ่อนสัตว์น้ำสัตว์ครึ่งบกครึ่งน้ำ
ไอเสียของถุงไข่แดงและ ' ว่ายน้ำ ' ที่จะเริ่มให้อาหารจากท่านอนราบใน
.
20 หญิงบี baxteri สุ่มแบ่งออกเป็นสอง
กลุ่มของสิบ หนึ่งในกลุ่มผู้เดียวปกติ
' ' โดสัน 500 IU ของ HCG และ 4 μกรัม lhrha
( ซิกม่า Aldrich เซนต์ หลุยส์ l4513 ) ไม่มีของผู้หญิงเหล่านี้
การวางไข่และการตอบสนองกลุ่มนี้ถือว่าควบคุม unprimed
. หลังจากนั้น กลุ่มนี้ก็ถือว่ามีหนึ่ง
รองพื้น 500 IU ของ HCG และμ
4 g lhrha รวมกัน เจ็ดสิบสองชั่วโมงต่อมา ทั้งก่อนหน้านี้กลุ่มนี้
primed และกลุ่มที่จะได้รับหนึ่ง
รองพื้น ,ได้รับการ anovulatory ' ' ขนาด 100
IU HCG และ 0.8 μกรัม lhrha รวมกัน ปริมาณนี้เป็น 20 %
dose ันและไม่ทำให้เกิดการตกไข่ใน
กลุ่มก่อนหน้านี้ได้รับหนึ่งหรือไม่รองพื้น . หลังจาก
ระยะเวลา 96 ชั่วโมงเพิ่มเติมของกลุ่มตัวอย่างทั้ง 2 กลุ่มบริหารงาน
ปริมาณปกติัน 500 IU ของ HCG บวก
4 μกรัม lhrha รวม ซึ่งหลังจากการตกไข่เกิดขึ้น .
จากนั้นก่อนการบริหารยาฮอร์โมน
สุดท้ายันกลุ่มหนึ่งของผู้หญิงที่ได้รับสอง
primings ในขณะที่กลุ่มอื่นได้รับหนึ่งรองพื้น
ดังแสดงในตารางที่ 1 ฮอร์โมนทั้งหมด ศึกษาในμ
200 ลิตรน้ำหมันผ่านการฉีดภายในช่องท้อง .
สัตว์บุคคลถูกวางลงในกล่องพลาสติก
11.4 ลิตรเดียวที่มี 1.5 ซม. ง่ายโซลูชั่นโทรศัพท์


สัตว์ครึ่งบกครึ่งน้ำยืดเวลาไข่จะยังคง fertilizable .
ซาร์ก็เปลี่ยน ถ้าสกปรกก็เห็นได้ชัดและวางไข่
ของไข่ การตรวจสอบ สิบเอ็ดครึ่งชั่วโมงหลังจาก dose แรกัน
, เพศหญิง พบว่ามีการผลิตไข่
ไข่ก่อนถูกผลิตระหว่าง 11.5 ถึง 12.5 ชั่วโมง Pa
และถูกเก็บรวบรวมในชั่วโมง 2 ครั้งจนถึง 24 ชั่วโมง
. ที่แต่ละคนเวลาตัวอย่างย่อย 100 - 150 ไข่เพศเมียอยู่ในหนึ่งหรือมากกว่าหนึ่งจาน Petri แห้ง

จานเพาะเชื้อต่อชายถูกใช้เมื่อปฏิสนธิ
โดยชายหลายเป็นพยายาม ประมาณ
100 μผมปัสสาวะที่มีสเปิร์มตัวอย่าง
การเคลื่อนที่ที่ดีและความเข้มข้น pipetted บนไข่ไข่และอสุจิสตริง
ผสมแล้วทิ้งไว้ประมาณ 10 นาที ก่อนน้ำท่วมอาหารด้วย

น้ำ .อัตราการปฏิสนธิได้ถูกประเมินเป็นค่า
3 เป็นไข่ ระยะหนอน 6 [ 28 ] จาก 6 ถึง 8 ชั่วโมงหลังจาก
ใบสมัครของอสุจิและไข่ กระทงของไข่และไข่
unfertilized ถ่ายโดยใช้กล้องจุลทรรศน์สเตอริโอผ่า
( omano ™ ) และเปอร์เซ็นต์การ
คือการคำนวณ สองดัชนีคุณภาพไข่ / ตัวอ่อนถูก
ใช้ : 1 ) ร้อยละของการ neurulation ไข่ ,26 ดักแด้
28 – [ 28 ] และ 2 ) ร้อยละของเอ็มบริโอ
ถึง ' ว่ายน้ำ ' ( ให้อาหารตัวอ่อนภายในเวที 44 –
46 ) [ 28 ] หลังจากที่ข้อสรุปของการทดลองลูกอ๊อด
ถูกปล่อยออกมาในสหรัฐอเมริกาปลาและสัตว์ป่าให้บริการเป็นส่วนหนึ่งของ B .
baxteri คืนโปรแกรม