Target bimA gene was cloned in a pE

Target bimA gene was cloned in a pET28a expression
vector, and transformation was carried out in Escherichia
coli BL21 (DE3) cells for expression of recombinant BimA
protein and one clone (henceforth called pETBimA), which
showed maximum expression after 4 hours of induction by
0.5-mM isopropyl-b-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG).
Expressed protein was obtained in insoluble fraction (inclusion
bodies) and puri
ed by immobilized metal aff
inity
chromatography (IMAC) using a Ni
4-NTA fast-flow
chelating Sepharose column. The purri
ed protein was
dialyzed against 0.01-M phosphate-buffered saline (PBS;
pH 7.2) containing decreasing concentrations of urea as
reported previously

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ยีนเป้าหมาย bimA ถูกโคลนในนิพจน์ pET28aเวกเตอร์ และการเปลี่ยนแปลงที่ดำเนินการใน Escherichiacoli BL21 (DE3) เซลล์ของ recombinant BimAโปรตีนและโคลนหนึ่ง (ต่อไปเรียกว่า pETBimA), ซึ่งแสดงนิพจน์สูงสุดหลังจาก 4 ชั่วโมงซึ่งเหนี่ยวนำโดย0.5 mM isopropyl-b-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG)กล่าวแสดงโปรตีนในส่วนที่ไม่ละลายน้ำ (รวมร่างกาย) และปู ed โดยหาลแชโลหะ initychromatography (IMAC) โดยใช้ Ni 4 NTA เร็วขั้นตอนการคอลัมน์ Sepharose chelating Purri ed โปรตีนได้dialyzed กับน้ำเกลือฟอสเฟต buffered 0.01 M (PBSpH 7.2) มีลดความเข้มข้นของยูเรียเป็นรายงานก่อนหน้านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีนเป้าหมาย Bima เป็นโคลนในการแสดงออก pET28a
เวกเตอร์และการเปลี่ยนแปลงได้ดำเนินการใน Escherichia
coli BL21 (DE3) เซลล์สำหรับการแสดงออกของ recombinant Bima
โปรตีนและเป็นหนึ่งในโคลน (เรียกว่าต่อจากนี้ไป pETBimA) ซึ่ง
แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกสูงสุดหลังจาก 4 ชั่วโมงของการเหนี่ยวนำโดย
0.5 -mm isopropyl-BD-1-thiogalactopyranoside (IPTG).
โปรตีนแสดงที่ได้รับในส่วนที่ไม่ละลายน้ำ (รวม
ร่าง) และ Puri? ed โดย AFF โลหะตรึง? iNity
โค (IMAC) โดยใช้ Ni? 4 NTA อย่างรวดเร็ว? ไหล
คีเลต คอลัมน์ Sepharose ? purri เอ็ดโปรตีน
dialyzed กับ 0.01-M สารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอส;
ค่า pH 7.2) ที่มีความเข้มข้นลดลงของยูเรียเป็น
รายงานก่อนหน้านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ยีนเป้าหมาย Bima ถูกโคลนใน pet28a
เวกเตอร์การแสดงออก และการแปลงข้อมูลใน Escherichia coli BL21 ( DE3 )
เซลล์สำหรับการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ Bima
และโคลน ( ต่อจากนี้เรียก petbima ) ซึ่งมีการแสดงออกสูงสุดหลังจาก 4 ชั่วโมง

0.5-mm เหนี่ยวนำโดย isopropyl-b-d-1-thiogalactopyranoside ( เอนไซม์ ) .
แสดงออกโปรตีนที่ได้รับในส่วนที่ไม่ละลายน้ำ ( รวม
ร่างกาย ) และพู
ed โดยตรึงโลหะงาน
inity
chromatography ( iMac ) ใช้ผม
4-nta อย่างรวดเร็ว -  ไหล
และคอลัมน์ที่เกี่ยวข้อง . การ purri
เอ็ดโปรตีนที่ผ่าน 0.01-m ฟอสเฟตบัฟเฟอร์
กับน้ำเกลือ ( PBS ;
pH 7.2 ) ที่มีความเข้มข้นของยูเรียลดลงเป็น
รายงานก่อนหน้านี้