2.4.2.Respiration and ethylene production
A slice from each treatment and grower was removed from the pouch and carefully placed in a 69-mL container, flushed with ethylene-and co2-free air ,sealed and left for 1 h at 20°C. Two 1- mL samples were removed and co2 and ethylene concentration were measured using gas chromatography as described elsewhere (Besada,jackman,Olsson, &Woolf,2010). This measurement was repeated on the same samples 17 h after HPP treatment ( holding tissue at 20°C) to determine whether a build-up of co2 or ethylene in the packaging before and after HPP treatment might have given false measures of respiration rate. Concentration of co2 and ethylene were expressed as µmol kg-1 s-1 and nmol kg-1s-1, respectively.
2.4.3. microscopy (light, scanning and transmission electron microscopy)
2.4.3.1. Light and transmission electron microscopy. Avocado tissue was cut into 10-min diameter discs approximately 2 mm thick. Discs were transferred into fixative ( 2% freshly prepared formaldehyde,25% glutaraldehyde in 0.1 M phosphate buffer pH 7.2) and stored at 4 องศา before processing and observation. For light microscopy blocks of tissue around 3×4×2 mm were excised from the disc, washed three in 0.1 M phosphate buffer (pH7.2) and then sectioned at 200 or 300 um using a stainless steel blade attached to a Vibratome 1000 ( Technical products International, st Louis, MO,USA). Section were either stained using a 0.1 % aqueous solution blue and observed using bright field microscopy or were viewed without staining by differential interference contrast microscopy using an Olympus vanox AHT3(Olympus optical co. Ltd., Tokyo,japan).
2.4.2.Respiration และเอทิลีนผลิตชิ้นจากแต่ละการรักษาและการปลูกถูกลบออกจากกระเป๋าและวางไว้ในภาชนะ 69-มิลลิลิตรล้างอย่างระมัดระวังด้วยเอทิลีนและอากาศ CO2 ฟรีปิดผนึกและที่เหลือเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 20 ° C . สอง 1 - ตัวอย่างมิลลิลิตรถูกถอดออกและ CO2 และเอทิลีนความเข้มข้นถูกวัดโดยใช้แก๊ส chromatography ตามที่อธิบายไว้ (Besada, Jackman, โอลส์สันและวูล์ฟ, 2010) วัดนี้ได้รับการทำซ้ำในตัวอย่างเดียวกัน 17 ชั่วโมงหลังการรักษา HPP (ถือเนื้อเยื่อที่ 20 ° C) เพื่อตรวจสอบว่าสร้างขึ้นของ CO2 หรือเอทิลีนในบรรจุภัณฑ์ก่อนและหลังการรักษา HPP อาจจะทำให้มาตรการที่ผิดพลาดของอัตราการหายใจ ความเข้มข้นของ CO2 และเอทิลีนได้รับการแสดงเป็นไมโครโมลต่อกิโลกรัม 1 s-1 และนาโนโมลต่อกิโลกรัม 1s-1 ตามลำดับ2.4.3 กล้องจุลทรรศน์ (แสง, การสแกนและการส่งผ่านกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน) 2.4.3.1 แสงและกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนส่ง อะโวคาโดเนื้อเยื่อถูกตัดเป็นแผ่นขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 10 นาทีประมาณ 2 มม. หนา แผ่นถูกโอนเข้าตรึง (2% ฟอร์มาลดีไฮด์เตรียมสด 25% glutaraldehyde 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2) และเก็บไว้ที่ 4 องศาก่อนการประมวลผลและการสังเกต แสงบล็อกกล้องจุลทรรศน์ของเนื้อเยื่อรอบ 3 × 4 × 2 มม. ถูกตัดจากแผ่นดิสก์ล้างสามใน 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH7.2) แล้วแบ่งที่ 200 หรือ 300 ไมครอนโดยใช้ใบมีดสแตนเลสที่ติดอยู่กับ Vibratome 1000 ( ผลิตภัณฑ์ด้านเทคนิคนานาชาติเซนต์หลุยส์, มิสซูรี่, สหรัฐอเมริกา) ส่วนมีการย้อมทั้งการใช้สารละลาย 0.1% สีฟ้าและตั้งข้อสังเกตการใช้กล้องจุลทรรศน์สนามสว่างหรือถูกมองว่าไม่มีความแตกต่างโดยการย้อมสีกล้องจุลทรรศน์ตรงกันข้ามการรบกวนการใช้โอลิมปั vanox AHT3 (โอลิมปัร่วมแสง. จำกัด , โตเกียว, ญี่ปุ่น)
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
2.4.2.respiration และการผลิตเอทธิลีน
ชิ้นจากแต่ละการรักษาและปลูกถูกเอาออกจากกระเป๋าและวางไว้อย่างรอบคอบใน 69 มล. ภาชนะกลั้วกับเอทิลีนและ CO2 อากาศฟรี , ปิดผนึกและทิ้งไว้เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 20 องศา สอง 1 - ตัวอย่างมลออกและ CO2 และเอทิลีนความเข้มข้นแก๊สโครมาโตกราฟีเป็นวัดโดยใช้ อธิบายไว้ในที่อื่น ( besada แจ็กแมน โอลส์สัน , , , &วูลฟ์ , 2010 )วัดนี้มีซ้ำกันตัวอย่าง 17 ชั่วโมงหลังจากการรักษาเนื้อเยื่อที่เอชพีถือ 20 ° C ) เพื่อตรวจสอบว่า มีการสะสมของก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์หรือก๊าซเอทิลีนในบรรจุภัณฑ์ก่อนและหลังการรักษา อาจจะให้เอชพีมาตรการที่ผิดพลาดของอัตราการหายใจ ความเข้มข้นของ CO2 และก๊าซเอทธิลีนถูกแสดงเป็นที่สุด kg-1 โมลและµ ? kg-1s-1 ตามลำดับ
2.4.3 . ใช้แสงสแกนและส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน )
2.4.3.1 . แสงและกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด . เนื้ออะโวคาโดหั่น 10 นาทีเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 2 มม. แผ่นหนา ดิสก์ถูกถ่ายโอนลงในฟิกเซทีฟ ( 2 % เตรียมสดฟอร์มาลดีไฮด์ , 25 % glutaraldehyde ใน 0.1M phosphate buffer pH 7.2 ) และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศาก่อนการประมวลผล และการสังเกตแสงกล้องจุลทรรศน์เนื่อเยื่อรอบ 3 × 4 × 2 มิล ถูกตัดจากแผ่นดิสก์ , ล้างสามใน 0.1 M phosphate buffer ( ph7.2 ) แล้วตัดที่ 200 หรือ 300 อืมโดยใช้ใบมีดสแตนเลสที่แนบมากับ vibratome 1000 ( ผลิตภัณฑ์ด้านเทคนิคระหว่างประเทศ , เซนต์ หลุยส์ โม สหรัฐอเมริกา ) ส่วนที่เป็นคราบใช้ 01% สารละลายสีน้ำเงิน ตามลำดับ โดยใช้กล้องจุลทรรศน์สนามหรือดูสดใสโดยไม่ต้องย้อมด้วยกล้องจุลทรรศน์การแทรกแซงค่าความคมชัดใช้โอลิมปัส ( Olympus vanox aht3 Optical Co . Ltd .
โตเกียว , ญี่ปุ่น )
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)