Knockin MiceTo avoid the problems o

Knockin Mice
To avoid the problems of a standard transgenic, many researchers now rely on knockin mice to study the exogenous expression of a protein. A knockin mouse is generated by targeted insertion of the transgene at a selected locus. The insert is flanked by DNA from a non-critical locus, and homologous recombination allows the transgene to be targeted to that specific, non-critical integration site. (See Figure 1) In this way, a researcher has complete control of the genetic environment surrounding the overexpression cassette and it is likely that the DNA did not incorporate itself into multiple locations. Site-specific knockins result in a more consistent level of expression of the transgene from generation to generation because it is known that the overexpression cassette is present as a single copy. Also, because a targeted transgene is not interfering with a critical locus, the researcher can be more certain that any resulting phenotype is due to the exogenous expression of the protein. Although the generation of a knockin mouse does avoid many of the problems of a traditional transgenic mouse, this procedure requires more time to assemble the vector and to identify ES cells that have undergone homologous recombination.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หนู knockinเพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาของมาตรฐานแบบจำลอง นักวิจัยหลายคนตอนนี้พึ่ง knockin หนูเพื่อศึกษาการแสดงออกภายนอกของโปรตีน เมาส์ knockin ถูกสร้างขึ้น โดยใส่ transgene ที่ทีการเลือกเป้าหมาย แทรกถูกขนาบข้าง ด้วยดีเอ็นเอจากการทีไม่สำคัญ และรวมตัวกันเซทจะมีให้ transgene ที่จะกำหนดเป้าหมายไปเว็บไซต์ที่รวมเฉพาะ ไม่สำคัญ (ดูรูปที่ 1) ในวิธีนี้ นักวิจัยมีการควบคุมสิ่งแวดล้อมพันธุกรรมรอบเทปแสดงออก และมีแนวโน้มว่า ดีเอ็นเอได้ไม่รวมตัวเองลงในหลายตำแหน่ง Knockins เฉพาะอย่างของ transgene ในระดับสอดคล้องกันมากจากรุ่นสู่รุ่น เพราะเป็นที่ทราบกันว่า การแสดงออกเทปอยู่เป็นสำเนาเดียว ด้วย เพราะ transgene ที่เป้าหมายไม่รบกวนทีสำคัญ นักวิจัยได้เพิ่มเติมบางอย่างว่านิกนิผลใด ๆ เนื่องจากการแสดงออกภายนอกของโปรตีน แม้ว่ารุ่นของเมาส์ knockin หลีกเลี่ยงปัญหาของแบบจำลองเมาส์ ขั้นตอนนี้ต้องเพิ่มเวลา เพื่อรวบรวมเวกเตอร์ และระบุ ES เซลล์ที่ได้รับเซทจะมีรวมตัวกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หนู Knockin
เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาของยีนมาตรฐานนักวิจัยหลายคนตอนนี้พึ่งพา knockin หนูเพื่อศึกษาการแสดงออกภายนอกของโปรตีน เมาส์ Knockin ถูกสร้างขึ้นโดยการแทรกการกำหนดเป้าหมายของยีนที่สถานทีเลือก แทรกถูกขนาบข้างด้วยดีเอ็นเอจากทางเดินที่ไม่สำคัญและการรวมตัวกันช่วยให้คล้ายคลึงกันของยีนที่จะกำหนดเป้าหมายไปที่เฉพาะเจาะจง, เว็บไซต์บูรณาการที่ไม่สำคัญ (ดูรูปที่ 1) ด้วยวิธีนี้นักวิจัยมีการควบคุมที่สมบูรณ์ของสภาพแวดล้อมทางพันธุกรรมรอบเทปแสดงออกและมีแนวโน้มว่าดีเอ็นเอไม่ได้รวมตัวเองลงในหลายสถานที่ knockins เว็บไซต์ที่เฉพาะเจาะจงผลในระดับที่สอดคล้องกันมากขึ้นในการแสดงออกของยีนจากรุ่นสู่รุ่นเพราะมันเป็นที่รู้จักกันว่าเทปแสดงออกเป็นปัจจุบันเป็นฉบับเดียว นอกจากนี้เนื่องจากยีนที่กำหนดเป้าหมายจะไม่รบกวนการทำงานของทางเดินที่สำคัญผู้วิจัยจะมั่นใจได้มากขึ้นว่าฟีโนไทป์ส่งผลใด ๆ เนื่องจากการแสดงออกภายนอกของโปรตีน แม้ว่ารุ่นของเมาส์ Knockin ไม่หลีกเลี่ยงหลายปัญหาของเมาส์ดัดแปรพันธุกรรมแบบดั้งเดิมขั้นตอนนี้ต้องใช้เวลามากขึ้นในการประกอบเวกเตอร์และระบุเซลล์ ES ว่าได้เกิดการรวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกัน