2.4. pH of cream and fermented cream
The pH of cream, before and after fermentation, was measured
using a digital pH meter, Eutech pH 700 (Thermo Scientific,
Germany).
2.5. Fatty acid profiles of control and LH-butter
2.5.1. Lipid extraction
Extraction of lipid from butter was performed according to
Folch’s technique, described by Christie (1989) with slight modification. Briefly, approximately 10 g of butter was mixed with
100 ml of a chloroform–methanol mixture (2:1 v/v). The mixture
was homogenized (IKA T25 digital Ultra-Turrax homogenizer, Germany) and then agitated using an orbital shaker (Protech model
719, United State) for 20 min. Next, the mixture was filtered and
25 ml saturated NaCl solution was added to the filtrate; the chloroform phase was subsequently recovered. An adequate amount of
anhydrous sodium sulphate (Na2SO4) was added to absorb moisture, and the chloroform mixture was dried with rotary evaporator
(Eyela, Japan) at 40 C under vacuum. The extracted oil sample was
then subjected for derivatization of fatty acid to fatty acid methyl
ester (FAME).
2.5.2. Derivatization of fatty acid (FA) to fatty acid methyl ester
(FAME)
Two millilitre of hexane was added to dissolve 20 mg of oil sample that was weighed into a micro reaction vessel. Subsequently,
2 ml of BCl3-methanol followed by few drops of 2, 2-
dimethoxypropane were added. The mixture was heated at 50 C
for 10 min and then cooled to 25 C under running water. Then,
1 ml of water and 1 ml of hexane were added into the reaction
mixture and the reaction vessel was shaken vigorously. Upon the
formation of two distinct layers, the upper layer was transferred
to a clean vial and adequate amount of anhydrous Na2SO4 was
added to absorb moisture.
2.5.3. Gas chromatography (GC) condition for FAME determination
FAME was determined using a GC (Perkin Elmer Clarus 600)
equipped with a flame ionization detector (FID) and a BPX 70 column (30 m 0.25 mm i.d., 0.25 lm film; SGE, Austin, TX). The
injector and detector were maintained at 220 C and 350 C,
respectively. The column temperature was programmed as an initial temperature at 60 C holding for 2 min, ramping to 220 C at
10 C/min and 210 C at 5 C/min and holding for 7 min. Hydrogen
was used as carrier gas with flow rate at 1 ml/min. Identification of
peaks was based on comparison of retention time with standard
FAME.
2.6. Physico-chemical compositional analyses
2.6.1. Protein, moisture and ash contents
Protein, moisture and ash contents of LH butter and control
were determined according to the Official Methods of Analysis of
AOAC International. Samples were analysed for protein using the
Kjeldahl method (AOAC official method 991.20, AOAC
International 2000d) by measuring the nitrogen content and multiplying by a conversion factor of 6.38. Moisture content was determined by the loss of mass of samples in an oven heated at
102 ± 2 C (AOAC official method 920.116, AOAC International
2000a). Ash content in samples were determined gravimetrically
using a dry ashing method, heated at 550 C in a muffle furnace
(AOAC official method 920.117, AOAC International 2000b)
2.4. ค่า pH ครีมและครีมหมักมีวัดค่า pH ครีม ก่อน และ หลังการ หมักใช้วัดค่า pH, Eutech pH 700 (เทอร์โมวิทยาศาสตร์เยอรมนี)2.5 กรดไขมันที่ประวัติควบคุมและ LH-เนย2.5.1. ไขมันสกัดการดูดไขมันจากเนยทำตามเทคนิคของ Folch อธิบาย โดยคริสตี้ (1989) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สั้น ๆ ประมาณ 10 กรัมเนยถูกผสมด้วย100 มิลลิลิตรสารคลอโรฟอร์มเมทานอล (2:1 v/v) ส่วนผสมถูก homogenized (T25 สควิดดิจิตอลอัลตร้า Turrax homogenizer เยอรมนี) แล้ว นั้นกระตุ้นทำโดยใช้การปั่นของวงโคจร (รุ่น Protech719 สหรัฐ) สำหรับ 20 นาที ถัดไป ส่วนผสมถูกกรอง และโซลูชันเพิ่มการกรอง NaCl อิ่มตัว 25 มล. ต่อมารับการกู้คืนระยะคลอโรฟอร์ม อย่างเพียงพอไดโซเดียมซัลเฟต (Na2SO4) เพิ่มการดูดซับความชื้น และส่วนผสมคลอโรฟอร์มถูกอบ ด้วยระเหยโรตารี่(Eyela ญี่ปุ่น) ที่ 40 C ภายใต้สุญญากาศ ตัวอย่างน้ำมันที่สกัดได้แล้ว ผ่านสำหรับ derivatization ของกรดไขมันกับกรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ (ชื่อเสียง)2.5.2. derivatization ของกรดไขมัน (FA) กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์(ชื่อเสียง)Millilitre สองของเฮกเซนถูกเพิ่มการละลายตัวอย่างน้ำมันที่ถูกชั่งเป็นเรือขนาดเล็กปฏิกิริยา 20 มิลลิกรัม ต่อมา2 มล. BCl3-เมทานอลตาม ด้วยหยดของ 2, 2 -dimethoxypropane ถูกเพิ่ม ส่วนผสมถูกความร้อนที่ 50 C10 นาทีแล้ว เย็นที่ 25 C ภายใต้น้ำ แล้วน้ำ 1 มิลลิลิตรและ 1 มิลลิลิตรของเฮกเซนถูกเพิ่มลงในปฏิกิริยาส่วนผสมและเรือปฏิกิริยาถูกเขย่าแรง ๆ เมื่อมีการการก่อตัวของสองชั้นแตกต่างกัน โอนย้ายชั้นบนขวดสะอาดและเพียงพอของ Na2SO4 รัสมีเพิ่มการดูดซับความชื้น2.5.3. ก๊าซ chromatography (GC) เงื่อนไขสำหรับการกำหนดค่าชื่อเสียงชื่อเสียงกำหนดใช้ GC (เพอร์กินเอลเมอ Clarus 600)เครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออไนซ์ (FID) และคอลัมน์ BPX 70 (30 m 0.25 มม.ประชาชน 0.25 lm ฟิล์ม ขนาน Austin, TX) การหัวฉีดและเครื่องตรวจจับยังคงไว้ที่ 220 C และ 350 Cตามลาดับ ตั้งโปรแกรมเป็นอุณหภูมิเริ่มต้นที่ 60 C ค้างไว้ 2 นาที กระโจนถึง 220 C ที่อุณหภูมิคอลัมน์10 C/นาที และ 210 C 5 C/นาที และถือ 7 นาทีไฮโดรเจนใช้เป็นก๊าซผู้ขนส่งมีอัตราการไหล 1 มิลลิลิตร/นาทีรหัสของยอดตามการเปรียบเทียบเวลาเก็บรักษามาตรฐานชื่อเสียง2.6. ดิออร์ compositional วิเคราะห์2.6.1. เนื้อหาโปรตีน ความชื้น และเถ้าหาโปรตีน ความชื้น และเถ้าของ LH เนยและควบคุมกำหนดตามวิธีการอย่างเป็นทางการวิเคราะห์ของAoac หรือนานาชาติ ตัวอย่างที่วิเคราะห์การใช้โปรตีนวิธีเจลดาห์ลเมื่อต้อง (aoac ทางวิธี 991.20, aoacนานาชาติ 2000 d) โดยวัดไนโตรเจน และคูณ ด้วยตัวแปลงของ 6.38 กำหนด โดยมวลของตัวอย่างในเตาอบความร้อนที่สูญเสียความชื้น102 ± 2 C (aoac หรือทางวิธี 920.116, aoac หรือนานาชาติ2000a) กำหนดปริมาณเถ้าในตัวอย่าง gravimetricallyใช้วิธี ashing แห้ง ความร้อนที่ 550 C ในเตาอุด(Aoac หรือทางวิธี aoac หรือนานา 2000b, 920.117)
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.4 ค่า pH ของครีมและครีมหมัก
เป็นกรดเป็นด่างของครีมก่อนและหลังการหมักวัด
โดยใช้เครื่องวัดค่า pH ดิจิตอล Eutech ค่า pH 700 (Thermo Scientific,
เยอรมนี).
2.5 กรดไขมันของการควบคุมและ LH-เนย
2.5.1 การสกัดไขมัน
สกัดไขมันจากเนยได้ดำเนินการตาม
เทคนิคของ Folch อธิบายโดยคริสตี้ (1989) กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ในเวลาสั้น ๆ ประมาณ 10 กรัมเนยผสมกับ
100 มิลลิลิตรส่วนผสมคลอโรฟอร์มเมทานอล (2: 1 v / v) ส่วนผสมที่
ทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน (IKA T25 ดิจิตอลอัลตร้า Turrax homogenizer, เยอรมนี) แล้วสบายใจโดยใช้เครื่องปั่นโคจร (Protech รุ่น
719, United State) เป็นเวลา 20 นาที ถัดไปส่วนผสมที่ถูกกรองและ
25 มล. สารละลายอิ่มตัวโซเดียมคลอไรด์ถูกบันทึกอยู่ในกรอง; เฟสคลอโรฟอร์มได้คืนในภายหลัง ปริมาณที่เพียงพอของ
ซัลเฟตโซเดียมไฮดรัส (Na2SO4) คือการเพิ่มการดูดซับความชื้นและส่วนผสมคลอโรฟอร์มถูกทำให้แห้งด้วยเครื่องระเหยแบบหมุน
(Eyela ญี่ปุ่น) ที่ 40 องศาเซลเซียสภายใต้สูญญากาศ ตัวอย่างน้ำมันที่สกัดได้เมื่อ
ยัดเยียดแล้วอนุพันธ์ของกรดไขมันกรดไขมันเมทิล
เอสเตอร์ (FAME).
2.5.2 อนุพันธ์ของกรดไขมัน (เอฟเอ) เพื่อกรดไขมันเมทิลเอสเตอร์
(FAME)
สองมิลลิลิตรเฮกเซนถูกเพิ่มเข้ามาในการละลาย 20 mg ของตัวอย่างน้ำมันที่ได้รับการชั่งน้ำหนักเป็นเรือปฏิกิริยาไมโคร ต่อจากนั้น
2 มิลลิลิตร BCl3 เมทานอลตามมาด้วยไม่กี่หยดของ 2, 2-
dimethoxypropane ถูกเพิ่ม ส่วนผสมที่ถูกความร้อนที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียส
เป็นเวลา 10 นาทีแล้วระบายความร้อนถึง 25 องศาเซลเซียสภายใต้น้ำไหล จากนั้น
1 มิลลิลิตรของน้ำและ 1 มิลลิลิตรของเฮกเซนถูกเพิ่มเข้าไปในการเกิดปฏิกิริยา
ผสมและเรือปฏิกิริยาเขย่าแรง ๆ เมื่อ
การก่อตัวของสองชั้นที่แตกต่างกันชั้นบนถูกย้าย
ไปเป็นขวดที่สะอาดและเพียงพอ Na2SO4 ปราศจากถูก
เพิ่มการดูดซับความชื้น.
2.5.3 แก๊ส chromatography (GC) เงื่อนไขสำหรับการกำหนด FAME
FAME ถูกกำหนดโดยใช้ GC (Perkin Elmer Clarus 600 บาท)
พร้อมกับตรวจจับเปลวไฟไอออนไนซ์ (FID) และ BPX 70 คอลัมน์ (30 เมตร 0.25 มม ID, ฟิล์ม 0.25 LM? SGE, ออสติน เท็กซัส)
หัวฉีดและตรวจจับได้รับการดูแลที่ 220 องศาและ 350 องศาเซลเซียส
ตามลำดับ อุณหภูมิคอลัมน์เป็นโปรแกรมเป็นอุณหภูมิเริ่มต้นที่ 60 องศาเซลเซียสถือเป็นเวลา 2 นาที, กระโจนถึง 220? C ที่
10? C / นาทีและ 210? C ที่ 5? C / นาทีและถือเป็นเวลา 7 นาที ไฮโดรเจน
ถูกใช้เป็นก๊าซที่มีอัตราการไหลของวันที่ 1 มล. / นาที บัตรประจำตัวของ
ยอดเขาที่อยู่บนพื้นฐานของการเปรียบเทียบของเวลาการเก็บรักษาที่มีมาตรฐาน
FAME.
2.6 compositional กายภาพและทางเคมีวิเคราะห์
2.6.1 โปรตีนความชื้นและเถ้า
โปรตีนความชื้นและเถ้าของเนย LH และการควบคุม
ได้รับการพิจารณาให้เป็นไปตามวิธีการอย่างเป็นทางการของการวิเคราะห์
AOAC นานาชาติ ตัวอย่างที่ได้มาวิเคราะห์โปรตีนโดยใช้
วิธี Kjeldahl (AOAC วิธีการอย่างเป็นทางการ 991.20, AOAC
2000D นานาชาติ) โดยการวัดปริมาณไนโตรเจนและคูณด้วยปัจจัยการแปลง 6.38 ความชื้นถูกกำหนดโดยการสูญเสียมวลของกลุ่มตัวอย่างในเตาอบความร้อนที่อุณหภูมิ
102 ± 2 องศาเซลเซียส (AOAC วิธีการอย่างเป็นทางการ 920.116, AOAC นานาชาติ
2000A) ปริมาณเถ้าในตัวอย่างได้รับการพิจารณา gravimetrically
โดยใช้วิธีการ ashing แห้งความร้อนที่อุณหภูมิ 550 องศาเซลเซียสในเตาเผา
(AOAC วิธีการอย่างเป็นทางการ 920.117, AOAC นานาชาติ 2000b)
การแปล กรุณารอสักครู่..