The mreA gene from Streptococcus ag

The mreA gene from Streptococcus agalactiae COH31 gamma/delta, resistant to macrolides and clindamycin by active efflux, has recently been cloned in Escherichia coli, where it was reported to confer macrolide resistance (J. Clancy, F. Dib-Hajj, J. W. Petitpas, and W. Yuan, Antimicrob. Agents Chemother. 41:2719--2723, 1997). Cumulative data suggested that the mreA gene was located on the chromosome of S. agalactiae COH31 gamma/delta. Analysis of the deduced amino acid sequence of mreA revealed significant homology with several bifunctional flavokinases/(flavin adenine dinucleotide (FAD) synthetases, which convert riboflavin to flavin mononucleotide (FMN) and FMN to FAD, respectively. High-performance liquid chromatography experiments showed that the mreA gene product had a monofunctional flavokinase activity, similar to that of RibR from Bacillus subtilis. Sequences identical to those of the mreA gene and of a 121-bp upstream region containing a putative promoter were detected in strains of S. agalactiae UCN4, UCN5, and UCN6 susceptible to macrolides. mreA and its allele from S. agalactiae UCN4 were cloned on the shuttle vector pAT28. Both constructs were introduced into E. coli, where they conferred a similar two- to fourfold increase in the MICs of erythromycin, spiramycin, and clindamycin. The MICs of a variety of other molecules, including crystal violet, acriflavin, sodium dodecyl sulfate, and antibiotics, such as certain cephalosporins, chloramphenicol, doxycycline, nalidixic acid, novobiocin, and rifampin, were also increased. In contrast, resistance to these compounds was not detected when the constructs were introduced into E. faecalis JH2-2. In conclusion, the mreA gene was probably resident in S. agalactiae and may encode a metabolic function. We could not provide any evidence that it was responsible for macrolide resistance in S. agalactiae COH31 gamma/delta; broad-spectrum resistance conferred by the gene in E. coli could involve multidrug efflux pumps by a mechanism that remains to be elucidated.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ยีน mreA จากอุณหภูมิ agalactiae COH31 แกมมา/เดลต้า ทนต่อ macrolides และ clindamycin โดย efflux ใช้งาน มีล่าถูกโคลนใน Escherichia coli ที่มันเป็นรายงานที่ประสาทต้านทานแมคโคไรด์ (J. Clancy, F. Dib-หัจญ์ J. W. Petitpas และ W. หยวน Antimicrob ตัวแทน Chemother 41:2719 - 2723, 1997) ข้อมูลสะสมแนะนำให้ ยีน mreA ตั้งอยู่บนโครโมโซมของ S. agalactiae แกมมา COH31/เด ลต้า การวิเคราะห์ลำดับกรดอะมิโน deduced ของ mreA เปิดเผย homology ที่สำคัญ มีหลาย bifunctional flavokinases / (flavin adenine dinucleotide (แฟชั่น) synthetases ที่แปลงไรโบเฟลวิน flavin mononucleotide (FMN) และ FMN ไปบูรณะ ตามลำดับ ทดลองประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography พบว่า ผลิตภัณฑ์ยีน mreA มี monofunctional flavokinase กิจกรรมการ คล้ายกับ RibR จาก subtilis คัด ลำดับเหมือนกับที่ ของยีน mreA และภูมิภาคขั้นต้นน้ำ 121-bp ที่ประกอบด้วยโปรโมเตอร์ putative พบในสายพันธุ์ของ S. agalactiae UCN4, UCN5 และไวต่อการ macrolides UCN6 mreA และของ allele จาก S. agalactiae UCN4 ถูกโคลนบน pAT28 เวกเตอร์รถ โครงสร้างทั้งสองถูกนำเข้าไปใน E. coli ที่พวกเขาปรึกษาคล้ายกันสองแบบเพื่อเพิ่ม fourfold MICs erythromycin, spiramycin และ clindamycin MICs ของโมเลกุลอื่น ๆ รวม ทั้งคริสตัลไวโอเลต acriflavin โซเดียมซัลเฟต dodecyl ยา ปฏิชีวนะ เช่นบาง cephalosporins, chloramphenicol ดอกซีไซคลีน กรดนาลิดิซิก novobiocin และ rifampin ได้เพิ่มขึ้น ในทางตรงกันข้าม ความต้านทานต่อสารเหล่านี้ถูกตรวจพบเมื่อโครงสร้างถูกนำเข้าสู่ faecalis ตะวันออก JH2-2 เบียดเบียน ยีน mreA คงอยู่ใน S. agalactiae และอาจเข้ารหัสฟังก์ชันการเผาผลาญ เราไม่สามารถให้หลักฐานใด ๆ ว่า มันต้านทานแมคโคไรด์ใน S. agalactiae COH31 แกมมา/เดลต้า ชอบ ต้านทาน broad-spectrum ที่ปรึกษา โดยยีนใน E. coli อาจเกี่ยวข้องกับปั๊ม multidrug efflux โดยกลไกที่ยังคงจะถูก elucidated

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีน mreA Streptococcus agalactiae จาก COH31 แกมมา / เดลต้าทนต่อ macrolides และ clindamycin ไหลโดยใช้งานเมื่อเร็ว ๆ นี้ได้รับการโคลนในอีโคที่มีรายงานการหารือต้านทาน macrolide (เจแคลนซีเอฟกาฮัจญ์เจดับบลิว Petitpas, . และดับเบิลยูหยวน Antimicrob ตัวแทน Chemother 41:. 2719--2,723, 1997) ข้อมูลสะสมชี้ให้เห็นว่ายีน mreA ตั้งอยู่บนโครโมโซมของ S. agalactiae COH31 แกมมา / เดลต้า การวิเคราะห์ลำดับกรดอะมิโนที่แปลรหัสของ mreA เปิดเผยคล้ายคลึงกันอย่างมีนัยสำคัญกับ flavokinases bifunctional หลาย / (Flavin adenine dinucleotide (FAD) synthetases ซึ่งแปลง riboflavin เพื่อ Flavin mononucleotide (FMN) และ FMN เพื่อ FAD ตามลำดับ. ของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงการทดลองโคแสดงให้เห็นว่า ผลิตภัณฑ์ยีน mreA มีกิจกรรม flavokinase monofunctional คล้ายกับที่ของ RibR จากเชื้อ Bacillus subtilis. ลำดับเหมือนกับที่ของยีน mreA และภูมิภาคต้นน้ำ 121 bp ที่มีผู้ก่อการสมมุติถูกตรวจพบในสายพันธุ์ของ S. agalactiae UCN4, UCN5 และความเสี่ยงที่จะ UCN6 macrolides. mreA และอัลลีลจากเอส agalactiae UCN4 ถูกโคลนบนรถรับส่งเวกเตอร์ pAT28. ทั้งโครงสร้างที่ถูกนำเข้าสู่เชื้อ E. coli ที่พวกเขาหารือสองคล้ายกับการเพิ่มขึ้นสี่เท่าใน MICs ของ erythromycin ที่ Spiramycin และ clindamycin. โดย MICs ความหลากหลายของโมเลกุลอื่น ๆ รวมทั้งสีม่วงคริสตัล acriflavin โซเดียมโดเดซิลซัลเฟตและยาปฏิชีวนะเช่น cephalosporins บาง chloramphenicol, doxycycline กรด nalidixic, Novobiocin และ rifampin ได้เพิ่มขึ้นด้วย ในทางตรงกันข้ามความต้านทานต่อสารเหล่านี้ไม่ได้ถูกตรวจพบเมื่อโครงสร้างที่ถูกนำเข้าสู่อี faecalis JH2-2 สรุปได้ว่ายีน mreA เป็นถิ่นที่อยู่อาจจะอยู่ใน agalactiae เอสและอาจเข้ารหัสฟังก์ชั่นการเผาผลาญอาหาร เราไม่สามารถแสดงหลักฐานใด ๆ ว่ามันเป็นความรับผิดชอบในการต้านทาน macrolide ในเอส agalactiae COH31 แกมมา / เดลต้า; ต้านทานกว้างสเปกตรัมการประชุมตามยีนในเชื้อ E. coli อาจเกี่ยวข้องกับ multidrug ปั๊มไหลโดยกลไกที่ยังคงที่จะอธิบาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ mrea ยีนจากเชื้อแลคเตีย coh31 แกมมา / Delta , ทนต่อแมคโครไลด์ที่มีการใช้งานและมีเมื่อเร็ว ๆนี้โคลนใน Escherichia coli ที่ได้รับพระราชทานมาโครไลด์ความต้านทาน ( เจแคลนซี , . dib ฮัจย์ เจดับบลิว petitpas และ . หยวน antimicrob . ตัวแทน chemother . 41:2719 -- 2723 , 1997 )ข้อมูลดังกล่าวชี้ให้เห็นว่า mrea ยีนตั้งอยู่บนโครโมโซมของ S . แลคเตีย coh31 แกมมา / เดลต้า การวิเคราะห์ลำดับของกรดอะมิโนได้ mrea เปิดเผยอย่างเป็นกับหลาย bifunctional flavokinases / ( ฟลาวิน อูไดนิวคลีโอไทด์ ( แฟชั่น ) synthetases ซึ่งแปลง Riboflavin ในเฟลวิน mononucleotide ( fmn ) และ fmn เพื่อแฟชั่น ตามลำดับวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง จากการทดลองพบว่า mrea ยีนผลิตภัณฑ์มีกิจกรรม flavokinase monofunctional คล้ายกับที่ของ ribr จาก Bacillus subtilis . ลำดับเหมือนกันกับของ mrea ยีนและเป็นภูมิภาคที่มีการ 121 BP ต้นน้ำซึ่งถูกตรวจพบในสายพันธุ์ S . แลคเตีย ucn4 ucn5 , และ ucn6 ต่อแมคโครไลด์ .และ mrea อัลลีลจาก S . แลคเตีย ucn4 ถูกโคลนบนยานอวกาศเวกเตอร์ pat28 . ทั้งโครงสร้างถูกแนะนำใน E . coli ที่พวกเขานำไปสู่คล้ายกับสอง - จะเพิ่มขึ้นสี่เท่าในไมโครโฟนของ erythromycin , clindamycin สไปรามัยซิน และ . ไมค์ของความหลากหลายของโมเลกุลอื่น ๆรวมทั้งคริสตัลสีม่วง , คริฟลาวิน , โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต และให้ยาปฏิชีวนะ เช่น ยาบางอย่าง ,ด๊อกซี่ซัยคลินคลอแรมเฟนิคอลสะพานกรุงธน , , , ไรแฟมโนโวไบโอซิน และ มีค่าเพิ่มขึ้น ในทางตรงกันข้าม , ต่อต้านสารเหล่านี้ไม่พบเมื่อโครงสร้างถูกแนะนำใน E . faecalis jh2-2 . สรุป mrea ยีนอาจเป็นถิ่นที่อยู่ในสหรัฐอเมริกาแลคเตียและอาจเข้ารหัสฟังก์ชั่นการเผาผลาญเราไม่สามารถให้หลักฐานใด ๆว่ามันเป็นความรับผิดชอบในการต่อต้านสหรัฐอเมริกาแลคเตีย coh31 แบล็กเดย์แกมมา / เดลต้า ; สเปกตรัมต้านทาน ) โดยยีนในเชื้อ E . coli อาจเกี่ยวข้องกับการปั๊มการโดยกลไกที่ยังคงต้องทำการ .