The model cells were divided into 2 groups as follows: the ammonia treated group (n = 6) and the control group (n = 6). The treated group was exposed to 10 mM ammonia for 48 h, then extracted the cell fluid and derivatized metabolites. GC–MS analysis was performed using an Agilent 7890 gas chromatograph system, coupled with a Pegasus 4D time-of-flight mass spectrometer. The system utilized a DB-5MS capillary column coated with 5% diphenyl cross-linked with 95% dimethylpolysiloxane (30 m 250-lm inner diameter, 0.25-lm film thickness; J&W Scientific, Folsom, CA, USA). A 1-lL aliquot of the analyte was injected
in splitless mode. Helium was used as the carrier gas. The front inlet purge flow rate was 3 mL min1 and the gas flow rate through the column was 1 mL min1. The initial temperature was set at 80 C for 0.2 min and was subsequently raised to 180 C at a rate
of 10 C min1. The temperature was then raised to 240 C at a rate of 5 C min1 and then to 290 C at a rate of 20 C min1, where it was maintained for 11 min. The injection, transfer line, and ion source temperatures were 280, 270, and 220 C, respectively. The energy was 70 eV in the electron impact mode. The mass spectrometry data were acquired in full-scan mode, with an m/z range of 35–600, at a rate of 100 spectra per second, after a solvent delay of 492 s. Chroma TOF4.3X Software (LECO, St. Joseph, Michigan, USA) was used for auto acquisition of GC total ion chromatograms (TICs) and fragmentation patterns. Each com-pound had a unique fragmentation pattern composed of a series of split molecular ions. The mass–charge ratios and amount of the ions were compared to a standard mass chromatogram in the LECO-Fiehn Rtx5 mass spectra library in the Chroma TOF4.3X Software. For each peak, the software generated a list ofsimilarities
after comparing them with every substance that was in the LECO-Fiehn Rtx5 library [13]. Peaks that had more than 700 similarities were chosen for further research.
เซลล์รูปแบบถูกแบ่งออกเป็น 2 กลุ่มดังนี้กลุ่มที่ได้รับการรักษาแอมโมเนีย (n = 6) และกลุ่มควบคุม (n = 6) กลุ่มได้รับการรักษาได้สัมผัสกับแอมโมเนีย 10 มิลลิเวลา 48 ชั่วโมงจากนั้นสารสกัดน้ำของเซลล์และสารอนุพันธ์ การวิเคราะห์ GC-MS ได้รับการดำเนินการโดยใช้ระบบก๊าซ Chromatograph Agilent 7890 ควบคู่ไปกับแรงบันดาลใจ 4D เวลาของเที่ยวบินสเปกโตรมิเตอร์มวล ระบบที่ใช้คอลัมน์ฝอย DB-5MS เคลือบด้วย 5% diphenyl ข้ามเชื่อมโยงกับ 95% dimethylpolysiloxane (30 เมตร 250 ลูเมนเส้นผ่านศูนย์กลางภายใน, 0.25-lm ความหนาของฟิล์ม? J & W วิทยาศาสตร์ Folsom, CA, USA) aliquot 1 lL ของสารถูกฉีด
ในโหมด Splitless ฮีเลียมถูกใช้เป็นก๊าซพา อัตราการไหลล้างทางเข้าด้านหน้าเป็น 3 มิลลิลิตรต่อนาที 1 และอัตราการไหลของก๊าซผ่านคอลัมน์เป็น 1 มิลลิลิตรต่อนาที 1 อุณหภูมิเริ่มต้นตั้งอยู่ที่ 80 องศาเซลเซียสสำหรับ 0.2 นาทีและได้รับการเลี้ยงดูมาถึง 180 องศาเซลเซียสในอัตรา
10 องศาเซลเซียสนาที 1 อุณหภูมิถูกยกขึ้นแล้วถึง 240 องศาเซลเซียสในอัตรา 5 องศาเซลเซียสนาที 1 แล้วถึง 290 องศาเซลเซียสในอัตรา 20 องศาเซลเซียสนาที 1 ที่ที่มันถูกเก็บรักษาไว้เป็นเวลา 11 นาที ฉีดโอนสายและอุณหภูมิแหล่งกำเนิดไอออนเป็น 280 ?, 270 ?, และ 220 องศาเซลเซียสตามลำดับ พลังงานเป็น 70 eV ในโหมดผลกระทบอิเล็กตรอน ข้อมูลมวลสารได้มาในโหมดเต็มสแกนกับช่วงม / ซีของ 35-600 ในอัตรา 100 สเปกตรัมต่อวินาทีหลังจากที่ล่าช้าของตัวทำละลาย 492 S Chroma TOF4.3X ซอฟต์แวร์ (LECO, เซนต์โจเซฟ, มิชิแกนสหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้ในการซื้อรถยนต์ของ GC chromatograms รวมไอออน (สำบัดสำนวน) และรูปแบบการกระจายตัว แต่ละ com ปอนด์ได้รูปแบบการกระจายตัวที่ไม่ซ้ำกันประกอบด้วยชุดของไอออนโมเลกุลแยก อัตราส่วนมวลค่าใช้จ่ายและปริมาณของไอออนที่ถูกเมื่อเทียบกับ chromatogram มวลมาตรฐานในห้องสมุดสเปกตรัม LECO-Fiehn Rtx5 มวลใน Chroma TOF4.3X ซอฟแวร์ สำหรับแต่ละยอดซอฟแวร์ที่สร้าง ofsimilarities รายการ
หลังจากเปรียบเทียบพวกเขากับสารที่อยู่ในห้องสมุด LECO-Fiehn Rtx5 ทุก [13] ยอดเขาที่มีกว่า 700 ความคล้ายคลึงกันถูกเลือกสำหรับการวิจัยต่อไป
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)