PCRIn mRT-PCR tests, primer pairs A

PCRIn mRT-PCR tests, primer pairs ASGV-U/ASGV-2and ASPV247-F/ASPV247-R were combined with eachof the three primer pairs specific for ACLSV in sepa-rated assays. Results showed that primer combinationASGV-U/ASGV-2+ACLSV-52/ACLSV-53+ASPV247-F/ASPV247-R(Table 1) gave more clear and specific bands of target products asit was compared to two other combinations, and then the primercombination was selected for further mRT-PCR tests. Meanwhile,different amplification efficiencies as indicated by different bandintensities were obtained when equal concentrations (0.08 M)of the three primer pairs were used in mRT-PCR (Fig. 1, Lane 1).To optimize the multiplex PCR system, combinations of differentconcentrations of three primer pairs were tested in mRT-PCR byusing the mixture of equal amounts of plasmids containing the cpgenes of three viruses. The results showed that the amplificationefficiencies of ASPV and ACLSV varied at different combinationsof primer concentrations and that of ASGV remained reliable. Abalanced amplification, with a similar fluorescence intensity of thebands corresponding to the three expected cDNAs, was achievedwhen the primer concentrations at 0.08 M for ASGV, 0.24 M forASPV and 0.16 M for ACLSV were used in the mRT-PCR (Fig. 1,Lane 5).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รถไฟฟ้า PCRIn-PCR ทดสอบ รองพื้นคู่ ASGV-U/ASGV-2and ASPV247-F/ASPV247-R ได้รวมกับ eachof สามสีรองพื้นคู่เฉพาะสำหรับ ACLSV ในอันดับ sepa assays ผลลัพธ์ที่แสดงให้เห็นว่า พื้น combinationASGV-U/ASGV-2+ACLSV-52/ACLSV-53+ASPV247-F/ASPV247-R (ตารางที่ 1) ให้วงชัดเจน และเฉพาะเจาะจงมากขึ้นของ asit ผลิตภัณฑ์เป้าหมายถูกเปรียบเทียบกับชุดอื่น ๆ 2 และ primercombination ถูกเลือกสำหรับทดสอบรถไฟ PCR เพิ่มเติม ในขณะเดียวกัน ประสิทธิภาพการขยายแตกต่างกันตามที่ระบุ โดย bandintensities แตกต่างกันได้รับเมื่อใช้ (M 0.08 ตามลำดับ) ความเข้มข้นเท่าของคู่รองพื้นสามใน mRT-PCR (Fig. 1, 1 เลน) เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพระบบ multiplex PCR ทดสอบชุดของ differentconcentrations ของคู่รองพื้นสามใน mRT PCR byusing ผสม plasmids cpgenes ไวรัสสามประกอบด้วยจำนวนเท่ากัน ผลลัพธ์ที่แสดงให้เห็นว่า amplificationefficiencies ASPV และ ACLSV ที่แตกต่างกันที่ความเข้มข้นของสีรองพื้นแตกต่างกัน combinationsof และ ASGV ที่ยังคงเชื่อถือได้ ขยาย Abalanced กับความเข้มของ fluorescence คล้ายของ thebands ที่สอดคล้องกับคาด cDNAs 3, achievedwhen ที่พื้นความเข้มข้นที่ 0.08 M สำหรับ ASGV, forASPV 0.24 M 0.16 M สำหรับ ACLSV ใช้ในรถไฟฟ้าใต้ดิน-PCR (Fig. 1, 5 เลน) ได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

PCRIn ทดสอบ MRT-PCR คู่ไพรเมอร์ ASGV-U / ASGV-2and ASPV247-F / ASPV247-R ถูกรวมกับ eachof สามคู่ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ ACLSV ในการตรวจ SEPA จัดอันดับ ผลการศึกษาพบว่าไพรเมอร์ combinationASGV-U / ASGV-2 + ACLSV-52 / ACLSV-53 + ASPV247-F / ASPV247-R (ตารางที่ 1) ให้มากขึ้นวงดนตรีที่ชัดเจนและเฉพาะเจาะจงของผลิตภัณฑ์เป้าหมาย asit เมื่อเทียบกับสองชุดอื่น ๆ แล้ว primercombination ได้รับเลือกให้ต่อไปการทดสอบ MRT-PCR ในขณะที่ประสิทธิภาพการใช้เครื่องขยายเสียงที่แตกต่างกันตามที่ระบุโดย bandintensities ที่แตกต่างกันได้รับเมื่อความเข้มข้นเท่ากับ (0.08? M) ของทั้งสามคู่ไพรเมอร์ที่ใช้ในการ MRT-PCR (รูป. 1, ซอย 1) หากต้องการเพิ่มประสิทธิภาพของระบบ PCR multiplex ที่การรวมกันของ differentconcentrations ของสามคู่ไพรเมอร์ได้รับการทดสอบใน MRT-PCR byusing ส่วนผสมของจำนวนเงินที่เท่ากันของพลาสมิดที่มี cpgenes สามไวรัส ผลการศึกษาพบว่า amplificationefficiencies ของ ASPV และ ACLSV แตกต่างกันที่ความเข้มข้นที่แตกต่างกัน combinationsof ไพรเมอร์และของ ASGV ยังคงความน่าเชื่อถือ Abalanced ขยายที่มีความเข้มแสงที่คล้ายกันของ thebands สอดคล้องกับสาม cDNAs ที่คาดว่าจะได้รับการ achievedwhen ความเข้มข้นของไพรเมอร์ที่ 0.08? M สำหรับ ASGV 0.24? M forASPV และ 0.16? M สำหรับ ACLSV ถูกนำมาใช้ในรถไฟฟ้าใต้ดิน MRT-PCR (รูปที่ 1. ถนน 5)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทดสอบ PCR pcrin MRT , ไพรเมอร์คู่ asgv-u / asgv-2and aspv247-f / aspv247-r ถูกรวมกับของ 3 คู่ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ aclsv ในการขับเสภาคะแนน ) . พบว่าไพรเมอร์ combinationasgv-u / asgv-2 aclsv-52 / aclsv-53 aspv247-f / aspv247-r ( ตารางที่ 1 ) ให้ชัดเจนและเฉพาะกลุ่มผลิตภัณฑ์เป้าหมายนี้คือเมื่อเทียบกับชุดอื่น ๆสองแล้ว primercombination ได้รับเลือกสำหรับการทดสอบ PCR MRT เพิ่มเติม ขณะ ที่แตกต่างกันขยายประสิทธิภาพตามที่ระบุโดย bandintensities ต่างกันได้เมื่อเท่ากับความเข้มข้น ( 0.08  m ) ของทั้งสามคู่ไพรเมอร์ใช้ MRT PCR ( รูปที่ 1 ช่องที่ 1 ) เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพของระบบ multiplex PCR ,รวม differentconcentrations 3 คู่ไพรเมอร์ถูกทดสอบใน MRT PCR โดยใช้ส่วนผสมของปริมาณที่เท่ากันของพลาสมิดที่มี cpgenes สามไวรัส ผลการศึกษา พบว่า amplificationefficiencies ของ aspv aclsv หลากหลายที่แตกต่างกันและ combinationsof primer ความเข้มข้นและของ asgv ยังคงเชื่อถือได้ abalanced ขยายกับความเข้มของการเรืองแสงที่คล้ายกัน thebands สอดคล้องกับสามคาด cdnas , achievedwhen ไพรเมอร์ที่ความเข้มข้น 0.08  M สำหรับ asgv , 0.24  M foraspv และ 0.16  M สำหรับ aclsv ใช้ MRT PCR ( รูปที่ 1 ซอย 5 )