Nuclease p1 produced by Penicillium

Nuclease p1 produced by Penicillium citrinum was purified and characterized. Fermentation was carried out for 49 h for optimum production.
The enzyme was purified to homogeneity according to SDS-PAGE by thermal deactivation, ultrafiltration, (NH4)2SO4 precipitation, phenyl
sepharose chromatography, ion-exchange chromatography and gel filtration. This protocol improved 93-fold purification and 5.4% recovery of
enzyme activity. The molecular mass of nuclease p1 from Penicillium citrinum was estimated to be in the range from 43 to 44 kDa. The enzyme
showed an obligate requirement for Zn2+ for activity. K+ had a significant effect on enzyme activity. Mg2+ and Ca2+ had a slight positive effect on
enzyme activity. While Cu2+, Co2+, Al3+, SDS and Triton X-100 were strong inhibitors of nuclease p1. The enzyme was completely stable in the pH
range from 5 to 6.5 and had a pH optimum of 5.4. The optimum temperature of nuclease p1 was 69 8C and enzyme was stable up to 70 8C. Km and
Vmax for the purified enzyme were 24.28 mg/ml and 0.36 mg/ml min, respectively, with RNA as substrate.
# 2006 Elsevier Ltd. All rights reserved.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลิต โดย Penicillium citrinum p1 nuclease บริสุทธิ์ และลักษณะ หมักถูกดำเนินใน h 49 สำหรับการผลิตที่เหมาะสมเอนไซม์มีบริสุทธิ์เพื่อ homogeneity ตามหน้า SDS โดยปิดใช้งานความร้อน ultrafiltration, (NH4) 2SO4 ฝน phenylsepharose chromatography แลกเปลี่ยนไอออน chromatography และเจลอาบน้ำ โพรโทคอลนี้ขึ้น 93-fold ฟอกและ 5.4% กู้คืนเอนไซม์ มวลโมเลกุลของ nuclease p1 จาก Penicillium citrinum ถูกคาดว่าจะอยู่ในช่วงจาก 43 กับ 44 kDa เอนไซม์นี้พบว่าความต้องการ obligate สำหรับ Zn2 + กิจกรรม K + มีผลต่อเอนไซม์สำคัญ Mg2 + และ Ca2 + มีผลดีต่อเล็กน้อยเอนไซม์ ขณะ Cu2 + Co2 + Al3 + SDS และไตรตั้น X 100 ได้ inhibitors ที่แข็งแกร่งของ nuclease p1 เอนไซม์มีเสถียรภาพอย่างสมบูรณ์ใน pHตั้งแต่ 5 6.5 และมีค่า pH เหมาะสมของ 5.4 อุณหภูมิเหมาะสมของ nuclease p1 เป็น 69 8C และเอนไซม์มีเสถียรภาพขึ้นไป 70 8C. Km และVmax สำหรับเอนไซม์บริสุทธิ์ 24.28 mg/ml และนาที 0.36 mg/ml ตามลำดับ มีอาร์เอ็นเอเป็นพื้นผิว#2006 Elsevier จำกัด สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Nuclease p1 ผลิตโดย Penicillium citrinum บริสุทธิ์และโดดเด่น การหมักได้ดำเนินการ 49 ชั่วโมงสำหรับการผลิตที่เหมาะสม.
เอนไซม์บริสุทธิ์เพื่อความสม่ำเสมอตาม SDS-PAGE จากการหมดอายุความร้อนกรอง (NH4) 2SO4 ฝน, ฟีนิล
โค Sepharose, โครมาแลกเปลี่ยนไอออนและการกรองเจล โปรโตคอลนี้ดีขึ้นทำให้บริสุทธิ์ 93 เท่าและการกู้คืน 5.4% ของ
เอนไซม์ มวลโมเลกุลของ p1 nuclease จาก Penicillium citrinum เป็นที่คาดกันว่าจะอยู่ในช่วง 43-44 กิโลดาลตัน เอนไซม์ที่
แสดงให้เห็นความต้องการภาระสำหรับ Zn2 + กิจกรรม K + มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญในการทำงานของเอนไซม์ Mg2 + และ Ca2 + มีผลบวกเล็กน้อยใน
การทำงานของเอนไซม์ ในขณะที่ Cu2 + Co2 + Al3 + SDS และ Triton X-100 เป็นสารยับยั้งที่แข็งแกร่งของ p1 นิ เอนไซม์ได้อย่างสมบูรณ์มีเสถียรภาพในค่า pH
ช่วง 5-6.5 และมีค่า pH ที่เหมาะสม 5.4 อุณหภูมิที่เหมาะสมของ p1 nuclease 69 8C และเอนไซม์ที่มีเสถียรภาพได้ถึง 70 8C ค่า Km และ
Vmax สำหรับเอนไซม์เป็น 24.28 mg / ml และ 0.36 มิลลิกรัม / นาทีมิลลิลิตรตามลำดับโดยมีอาร์เอ็นเอเป็นสารตั้งต้น.
# 2006 เอลส์ จำกัด สงวนลิขสิทธิ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นิวเคลียส P1 ผลิตโดย Penicillium citrinum บริสุทธิ์และศึกษาคุณสมบัติ การหมักพบว่า 49 H สำหรับการผลิตสูงสุด .
เอนไซม์บริสุทธิ์เอนไซม์โดยวิธีการตามขนาดกรอง , ความร้อน , ( NH4 ) 2so4 ตกตะกอนไอออนโครมาโตกราฟี )
เกี่ยวข้อง โครมาโทกราฟี และแบบเจล โปรโตคอลนี้ขึ้น 93 พับผลิต 5 .4
% การฟื้นตัวของกิจกรรมของเอนไซม์ โมเลกุล มวลของนิวเคลียส P1 จาก Penicillium citrinum มีค่าอยู่ในช่วงจาก 43 44 kDa เอนไซม์
แสดงหรือความต้องการ zn2 สำหรับกิจกรรม K มีผลต่อกิจกรรมของเอนไซม์ และ mg2 แคลเซียมมีผลเล็กน้อยบวก
กิจกรรมของเอนไซม์ ในขณะที่ al3 CU2 , คาร์บอนไดออกไซด์ ,SDS และ Triton X-100 ยับยั้งแรงของนิวเคลียส P1 . เอนไซม์มีเสถียรภาพอย่างสมบูรณ์ในช่วง pH
5 - 6.5 และมี pH ที่เหมาะสมของ 5.4 . อุณหภูมิที่เหมาะสมของนิวเคลียส P1 คือ 69 8C และ เอนไซม์ขึ้น 70 8C . km และ
Vmax สำหรับเอนไซม์คือ 24.28 mg / ml และ 0.36 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรต่อนาที ตามลำดับ มี RNA เป็นสับสเตรท
# 2006 เอลส์จำกัดสงวนลิขสิทธิ์