SOD was estimated as per the proced

SOD was estimated as per the procedure of Fridovich (1997).
The reaction mixture consists of 3 ml 50 mM potassium
phosphate buffer (pH 7.8), 13 mM methionine, 2 μM
riboflavin, 0.1 mM ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA),
75 μM nitroblue tetrazolium (NBT) and 100μlof crude enzyme
extract. A blank (without enzyme and NBT) and a reference
control having NBT but no enzyme were setup to calibrate the
spectrophotometer. All the tubes were exposed to 400W bulbs
(4×100W bulbs) for 15 min and the absorbance was
immediately read at 560 nm using a spectrophotometer. The
percentage inhibition is calculated and 50% inhibition of the
reaction between riboflavin and NBT in the presence of
methionine is taken as 1 unit of SOD activity. The enzyme
activity was expressed as units mg-1 of protein. CAT was
estimated according to the method of Radhakrishnan and
Sarma (1964). The reaction mixture consists of 2.5 ml of 0.1 M
sodium phosphate buffer (pH 7.5) and 2.5 ml of 0.9% (v/v)
Hydrogen peroxide (H2O2). To this mixture 0.5 ml of enzyme
was added and incubated at 28oC for 3 min. The reaction was
then arrested by adding 0.5 ml of 2 N Sulphuric acid (H2SO4)
and the residual H2O2 was titrated with 0.1 N Potassium
permanganate (KMnO4) solution. A blank experiment was
carried out similarly with boiled enzyme extract. Unit of CAT
activity was expressed as ml of 0.1 N KMnO4 equivalent of
H2O2 decomposed/min/mg of protein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

SOD เป็นที่คาดกันตามขั้นตอนของ Fridovich (1997).
ผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย 3 มล. 50
มิลลิโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์(pH 7.8) 13 methionine มิลลิ 2 ไมครอน
riboflavin 0.1 มิลลิเตตร้า diamine เอทิลีนกรดอะซิติก (EDTA)
75 ไมครอน nitroblue tetrazolium (NBT)
และเอนไซม์100μlofสารสกัดจาก เปล่า (โดยเอนไซม์และ NBT)
และการอ้างอิงการควบคุมที่มีNBT แต่ไม่มีเอนไซม์ที่มีการติดตั้งเพื่อสอบเทียบ
spectrophotometer หลอดทั้งหมดได้สัมผัสกับหลอดไฟ 400W
(4 ×หลอด 100W) เป็นเวลา 15
นาทีและการดูดกลืนแสงที่ถูกอ่านได้ทันทีที่560 นาโนเมตรโดยใช้สเปก
ยับยั้งเปอร์เซ็นต์มีการคำนวณและการยับยั้ง 50%
ของการเกิดปฏิกิริยาระหว่างriboflavin และ NBT ในการปรากฏตัวของ
methionine จะมาเป็น 1 หน่วยของกิจกรรม SOD เอนไซม์กิจกรรมได้รับการแสดงเป็นหน่วย mg-1 ของโปรตีน
กสท.
ได้รับการคาดตามวิธีการของRadhakrishnan และ
Sarma (1964) ผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย 2.5 มล. 0.1 M
โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.5) และ 2.5 มล. 0.9% (v / v)
ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2) ส่วนผสมนี้ 0.5 มล.
ของเอนไซม์ที่ถูกเพิ่มเข้ามาและบ่มที่28oC เป็นเวลา 3 นาที ปฏิกิริยาจะถูกจับโดยการเพิ่ม 0.5 มล. 2 กรดซัลฟิวเอ็น (H2SO4) และ H2O2 ที่เหลือได้รับการปรับขนาด 0.1 ไม่มีโพแทสเซียมด่างทับทิม(KMnO4) วิธีการแก้ปัญหา การทดลองว่างเปล่าได้รับการดำเนินการในทำนองเดียวกันด้วยสารสกัดจากเอนไซม์ต้ม หน่วย CAT กิจกรรมได้รับการแสดงเป็นมล. 0.1 ไม่มี KMnO4 เทียบเท่าH2O2 ย่อยสลาย / นาที / mg ของโปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สดประมาณ ตามขั้นตอนของ fridovich ( 2540 ) .
ปฏิกิริยาผสมประกอบด้วย 50 มิลลิโมลาร์โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์
3 มิลลิลิตร pH 7.8 ) , เมทไธโอนีน 13 มม. 2 μ M
Riboflavin , 0.1 มม. ลีนไดเอมีนเตตรากรดน้ำส้ม ( EDTA ) ,
75 μ M nitroblue tetrazolium ( NBT ) และ 100 μลอฟเอนไซม์
สารสกัด ว่าง ( ไม่มีเอนไซม์และ NBT ) และอ้างอิง
ควบคุมมี NBT แต่ไม่มีเอนไซม์ถูกตั้งค่าให้ปรับ
วัสดุ หลอดทั้งหมดได้รับ 400W หลอดไฟ
( 4 × 100W หลอด ) 15 นาที และดูดกลืนคือ
ทันทีอ่าน 560 nm ใช้วัสดุ
เปอร์เซ็นต์การยับยั้งคำนวณและ 50% inhibition
ปฏิกิริยาระหว่างไรโบฟลาวินและ NBT ต่อหน้า
เมทไธโอนีนถูกจับเป็น 1 หน่วยของกิจกรรมสดเอนไซม์
กิจกรรมจะแสดงเป็นหน่วย mg-1 ของโปรตีน แมว
ประมาณตามวิธีการของราและ
ซาร์มา ( 1964 ) ปฏิกิริยาผสมประกอบด้วย 2.5 ml 0.1 M
โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.5 ) และ 2.5 ml 0.9 เปอร์เซ็นต์ ( v / v )
ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ( H2O2 ) การผสมนี้ 0.5 มิลลิลิตรเอนไซม์
เพิ่มบ่มที่ 28oc 3 นาทีแล้วจับโดยการเพิ่มปฏิกิริยา
05 มิลลิลิตรของกรด กำมะถัน 2 N ( กรดซัลฟิวริก )
และ H2O2 ที่เหลืออยู่ตลอดเวลาด้วยด่างทับทิม ( KMnO4 โพแทสเซียม 0.1 N
) โซลูชั่น การทดลองได้ดำเนินการในทำนองเดียวกันกับว่าง
ต้มเอนไซม์สกัดเข้มข้น หน่วยกิจกรรมแมว
ถูกแสดงเป็นมิลลิลิตร เท่ากับ 0.1 N KMnO4 ของ
H2O2 ย่อยสลาย / มิน / มก. โปรตีน