Ruzigrass (Brachiaria ruziziensis G

Ruzigrass (Brachiaria ruziziensis Germain et Everard cv. Kennedy) is an important forage grass in tropical and sub-tropical areas. Previously, we reported transgenic ruzigrass plants generated by our transformation system were sterile and tetraploid in spite of beginning with diploid plants. This study analyzed ploidy variation in embryogenic calli and the regenerants of diploid ruzigrass. The morphological traits and fertility were also investigated to develop a methodology for the production of stable transgenic lines. Embryogenic calli at different stages (2, 4, 6 and 12-month-old) were regenerated via somatic embryogenesis. An approach of flow cytometry (FCM) analysis was used to determine the ploidy level of embryogenic calli and regenerants of ruzigrass. FCM analysis revealed that embryogenic calli were spontaneously reduplicated at a high frequency and resulting regenerants were polyploids (tetraploid or octoploid), including 15 tetraploid regenerants (68%) and seven octoploid regenerants (32%) derived from 12-month-old embryogenic calli. These regenerants exhibited the morphological variations among different ploidy levels. The viability of pollen grains was significantly (P < 0.01) decreased in tetraploid and octoploid regenerants. Our findings indicated that clarification and resolution of ploidy variation in ruzigrass combined with ploidy level checking using FCM analysis before transformation steps is crucial for plant regeneration in transformed ruzigrass.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Ruzigrass (Brachiaria กับ Germain et Everard พันธุ์เคนเนดี้) เป็นหญ้าเป็นพืชอาหารสัตว์ที่สำคัญในพื้นที่เขตร้อน และกึ่งเขตร้อน ก่อนหน้านี้ เรารายงานพืช ruzigrass จำลองที่สร้างขึ้น โดยระบบการแปลงของเราได้ผ่านการฆ่าเชื้อ และ tetraploid แม้เริ่มต้นด้วยพืชฮอโมไซกัส การศึกษาครั้งนี้วิเคราะห์ความผันแปรพล็อยดีในเอเรียเพาะและ regenerants ของฮอโมไซกัส ruzigrass ลักษณะสัณฐานและความอุดมสมบูรณ์ก็ยังตรวจสอบการพัฒนาวิธีการผลิตของบรรทัดจำลองมั่นคง เอเรียเพาะในระยะต่าง ๆ (2, 4, 6 และ อายุ 12 เดือน) ถูกสร้างผ่านทางกายเกิดเอ็มบริโอ วิธีการของการวิเคราะห์การตรวจวิเคราะห์เซลล์ (FCM) ไหลถูกใช้เพื่อกำหนดระดับพล็อยดีของเอเรียเพาะและ regenerants ของ ruzigrass FCM วิเคราะห์เปิดเผยว่า เอเรียที่เพาะได้เป็นธรรมชาติ reduplicated ที่ความถี่สูง และผล regenerants polyploids (tetraploid หรือ octoploid) , รวมทั้ง 15 tetraploid regenerants (68%) และ regenerants octoploid เจ็ด (32%) มาจากเอเรียเพาะอายุ 12 เดือน Regenerants เหล่านี้จัดแสดงรูปสัณฐานระดับระดับพล็อยดีแตกต่างกัน Viability ของเรณูอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.01) ลดลง regenerants tetraploid และ octoploid ผลการวิจัยของเราแสดงว่า ชี้แจงและความละเอียดของการเปลี่ยนแปลงพล็อยดีใน ruzigrass รวมกับระดับพล็อยดีใช้ FCM วิเคราะห์ก่อนการเปลี่ยนแปลงขั้นตอนการตรวจสอบเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการฟื้นฟูโรงงานใน ruzigrass รับการเปลี่ยนแปลง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Ruzigrass (Brachiaria ซี่ต์แชร์กแมงและ Everard CV. เคนเนดี้) เป็นสำคัญหญ้าอาหารสัตว์ในเขตร้อนและกึ่งเขตร้อน ก่อนหน้านี้เราได้รายงานพืชดัดแปรพันธุกรรม ruzigrass สร้างโดยระบบการเปลี่ยนแปลงของเราได้ผ่านการฆ่าเชื้อและ tetraploid ทั้งๆที่จุดเริ่มต้นกับพืชซ้ำ การศึกษาครั้งนี้วิเคราะห์การเปลี่ยนแปลง ploidy ในแคลลัส embryogenic และเพาะของ ruzigrass ซ้ำ ลักษณะทางสัณฐานวิทยาและความอุดมสมบูรณ์ถูกตรวจสอบยังที่จะพัฒนาวิธีการในการผลิตของสายการดัดแปรพันธุกรรมที่มีเสถียรภาพ แคลลัส Embryogenic ในขั้นตอนที่แตกต่างกัน (2, 4, 6 และ 12 เดือนเก่า) ถูกนำมาสร้างใหม่ผ่าน embryogenesis ร่างกาย วิธีการของการไหลของ cytometry (FCM) การวิเคราะห์ถูกใช้ในการกำหนดระดับของแคลลัส ploidy embryogenic และเพาะของ ruzigrass วิเคราะห์ FCM เปิดเผยว่าแคลลัส embryogenic ถูก reduplicated ธรรมชาติที่ความถี่สูงและเพาะส่งผลให้มี polyploids (tetraploid หรือ octoploid) รวม 15 เพาะ tetraploid (68%) และเจ็ดเพาะ octoploid (32%) มาจากแคลลัส embryogenic 12 เดือนเก่า เพาะเหล่านี้แสดงให้เห็นรูปแบบลักษณะทางสัณฐานวิทยาหมู่ระดับ ploidy ที่แตกต่างกัน ความมีชีวิตของละอองเรณูอย่างมีนัยสำคัญ (p <0.01) ลดลงเพาะ tetraploid และ octoploid ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่าการชี้แจงและความละเอียดของการเปลี่ยนแปลงใน ploidy ruzigrass รวมกับระดับ ploidy การตรวจสอบโดยใช้การวิเคราะห์ FCM ก่อนขั้นตอนการเปลี่ยนแปลงเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการฟื้นฟูโรงงานใน ruzigrass เปลี่ยน รวม 15 เพาะ tetraploid (68%) และเจ็ดเพาะ octoploid (32%) มาจากแคลลัส embryogenic 12 เดือนเก่า เพาะเหล่านี้แสดงให้เห็นรูปแบบลักษณะทางสัณฐานวิทยาหมู่ระดับ ploidy ที่แตกต่างกัน ความมีชีวิตของละอองเรณูอย่างมีนัยสำคัญ (p <0.01) ลดลงเพาะ tetraploid และ octoploid ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่าการชี้แจงและความละเอียดของการเปลี่ยนแปลงใน ploidy ruzigrass รวมกับระดับ ploidy การตรวจสอบโดยใช้การวิเคราะห์ FCM ก่อนขั้นตอนการเปลี่ยนแปลงเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการฟื้นฟูโรงงานใน ruzigrass เปลี่ยน รวม 15 เพาะ tetraploid (68%) และเจ็ดเพาะ octoploid (32%) มาจากแคลลัส embryogenic 12 เดือนเก่า เพาะเหล่านี้แสดงให้เห็นรูปแบบลักษณะทางสัณฐานวิทยาหมู่ระดับ ploidy ที่แตกต่างกัน ความมีชีวิตของละอองเรณูอย่างมีนัยสำคัญ (p <0.01) ลดลงเพาะ tetraploid และ octoploid ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่าการชี้แจงและความละเอียดของการเปลี่ยนแปลงใน ploidy ruzigrass รวมกับระดับ ploidy การตรวจสอบโดยใช้การวิเคราะห์ FCM ก่อนขั้นตอนการเปลี่ยนแปลงเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการฟื้นฟูโรงงานใน ruzigrass เปลี่ยน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ruzigrass ( Brachiaria ruziziensis เจอร์เมน และ เอเวอราร์ด พันธุ์ เคนเนดีที่สำคัญคือหญ้าอาหารสัตว์ในเขตร้อนและย่อยพื้นที่เขตร้อน ก่อนหน้านี้ เราได้รายงาน ruzigrass ต้นพืชที่สร้างขึ้นโดยระบบการฆ่าเชื้อและเตตราพล ด์ของเรา ทั้งๆ ที่เริ่มต้นด้วยพืชซ้ำ . การวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงในเลี้ยงแคลลัสและ regenerants ของชาวจีน ruzigrass . ลักษณะทางสัณฐานวิทยาและความอุดมสมบูรณ์ ยังได้พัฒนาวิธีการผลิตสายพันธุกรรมคงที่ เลี้ยงแคลลัสในแต่ละขั้นตอน ( 2 , 4 , 6 และ 12 เดือน ) ที่ได้ผ่านการเกิดโซมาติกเอ็มบริโอ . แนวทางของการไหล ( ( FCM ) การวิเคราะห์ใช้เพื่อกำหนดระดับของการ เลี้ยง regenerants ของแคลลัสและ ruzigrass . การวิเคราะห์ FCM เปิดเผยว่า เลี้ยงแคลลัสได้สงเคราะห์ที่ความถี่สูงและ regenerants ที่เกิดเป็น polyploids ( เตตราพล ด์ หรือ octoploid ) รวมทั้ง 15 เตตราพล ด์ regenerants ( 68% ) และเจ็ด octoploid regenerants ( 32% ) ได้มาจาก 12 เดือน เลี้ยงแคลลัส . regenerants เหล่านี้มีลักษณะของการเปลี่ยนแปลงในระดับที่แตกต่างกัน ความมีชีวิตของละอองเรณูอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p < 0.01 ) และลดลงในเตตราพล ด์ octoploid regenerants . ผลของเราระบุว่า การชี้แจง และความละเอียดของการเปลี่ยนแปลงในระดับ ruzigrass ร่วมกับการตรวจสอบโดยใช้การวิเคราะห์ FCM ก่อนก้าวเปลี่ยนแปลงเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการปลูกในแปลง ruzigrass .