2.3. In vitro antifungal assaysInhi

2.3. In vitro antifungal assays
Inhibition of fungal mycelial growth by CS, ZEO, CEO and their
combinations was determined with the poisoned growth substrate
technique as described previously (Mohammadi, Hashemi, &
Hosseini, 2015b). In this method, the agar plates were prepared
using potato dextrose agar (PDA) (15 mL per Petri dish) amended
with CS and EO solutions to obtain different concentrations
0.01e0.15% (v/v). Parallel controls were maintained with distilled
water and DMSO mixed with PDA medium. After inoculating the
mycelia of fungus (6-mm diameter agar plugs) onto the center of
agar, the dishes were incubated at 25 ± 2
C until the growth of the
control dishes had reached the edge of the plate. Radial growth was
assessed by measuring the distance from the edge of the inoculum
plug to the advancing margin of the colony. Then, the antifungal
indices were calculated as follows:
Antifungal indexðAIÞ% ¼ ðDc  DeÞ=Dc  100
Where Dc and De represent the diameter of growth zone in the
control and experimental dishes, respectively (Mohammadi,
Hashemi, & Hosseini, 2015). The IC50 values (the concentration
inhibited 50% of the mycelium growth) were calculated by probit
analysis. Minimal inhibitory concentrations (MICs) and minimum
fungicidal concentrations (MFCs) were also examined using the
methods reported by Yen and Chang (2008).When themycelium of
fungi reached the edges of the control dishes, the lowest concentration
with no sign of growth was defined as MIC. After the MIC
was determined, a small piece of agar (2  2  2 mm3) was taken
from the colony of the MIC plate, and was inoculated on a drug-free
PDA medium. After 5 days, MFCs were determined by the lowest
concentration of the test compounds in which no recovery of
microorganism was observed (Yen & Chang, 2008). The different
concentrations of treatments inhibiting fungal growth was monitored
microscopically with an inverted light microscope (IX71,
Olympus, Tokyo, Japan)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. ในหลอดทดลองเชื้อรา assaysการยับยั้งเชื้อราเจริญเติบโตของ mycelial โดย CS, ZEO, CEO และของพวกเขากำหนดรวมกับพื้นผิวเกราะเจริญเติบโตเทคนิคตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (มูฮัมมาดี Hashemi, &คา 2015b) ในวิธีนี้ แผ่นวุ้นเตรียมไว้ใช้มันฝรั่งเดกซ์โทรสวุ้น (PDA) (15 มิลลิลิตรต่อจาน) แก้ไขเพิ่มเติมด้วยโซลูชั่น CS และ EO รับความเข้มข้นแตกต่างกัน0.01e0.15% (v/v) ตัวควบคุมแบบขนานถูกเก็บรักษาไว้กับกลั่นน้ำและ DMSO ผสมกับ PDA ปานกลาง หลัง inoculatingmycelia ของเชื้อรา (ปลั๊กวุ้นเส้นผ่าศูนย์กลาง 6 มม.) ลงบนกลางอาหารเลี้ยงเชื้อ อาหารได้รับการกกที่ 25 ± 2 C จนถึงการเติบโตของการควบคุมอาหารได้ถึงขอบจาน เติบโตรัศมีประเมิน โดยการวัดระยะห่างจากขอบของ inoculumเสียบกับขอบ advancing ของอาณานิคม จากนั้น การต้านเชื้อราดัชนีมีคำนวณเป็นดังนี้:เชื้อรา indexðAIÞ %¼ ðDc DeÞ = Dc 100ที่ Dc และเดแสดงเส้นผ่านศูนย์กลางของการเจริญเติบโตในการควบคุมและทดลองอาหาร ตามลำดับ (มูฮัมมาดีHashemi, & คา 2015) ค่า IC50 (ความเข้มข้น50% ของการเติบโตยังยับยั้ง) คำนวณ โดย probitการวิเคราะห์ ความเข้มข้นที่ยับยั้งที่น้อยที่สุด (ไมโครโฟน) และต่ำสุดความเข้มข้นของยา (เดอร์ก็ยังตรวจสอบโดยใช้การวิธีรายงาน โดยเยนและช้าง (2008) เมื่อ themycelium ของเชื้อราถึงขอบของอาหารควบคุม ความเข้มข้นต่ำที่สุดด้วยไม่มีสัญญาณของการเจริญเติบโตถูกกำหนดเป็นไมค์ หลังจากไมโครโฟนกำหนด วุ้นชิ้นเล็ก (2 2 2 เดือน 3) ถูกจากอาณานิคมของแผ่นไมค์ และเป็น inoculated ในการปลอดยาเสพติดPDA ปานกลาง หลังจาก 5 วัน เดอร์ถูกกำหนด โดยต่ำที่สุดความเข้มข้นของสารทดสอบในที่ไม่มีการกู้คืนจุลินทรีย์ถูกตรวจสอบ (เยนและช้าง 2008) ที่แตกต่างกันแก้ไขการตรวจสอบความเข้มข้นของการรักษายับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อราความพร้อมที่คว่ำกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง (IX71โอลิมปัส โตเกียว ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 ตรวจในหลอดทดลองเชื้อรา
ยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อราโดย CS, ZEO ซีอีโอและของพวกเขา
รวมกันก็ตั้งใจกับการเจริญเติบโตของสารตั้งต้นยาพิษ
เทคนิคตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (มูฮัมมาดี, Hashemi และ
Hosseini, 2015b) ในวิธีการนี้แผ่นวุ้นได้จัดทำขึ้น
โดยใช้ potato dextrose agar (PDA) (15 มิลลิลิตรต่อจานเลี้ยงเชื้อ) แก้ไขเพิ่มเติม
กับลูกค้าและ EO การแก้ปัญหาเพื่อให้ได้ความเข้มข้นที่แตกต่างกัน
0.01e0.15% (v / v) การควบคุมแบบขนานได้รับการดูแลด้วยการกลั่น
น้ำและผสมกับ DMSO กลาง PDA หลังจากฉีดวัคซีน
เส้นใยของเชื้อรา (6 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางวุ้นปลั๊ก) เข้าสู่ศูนย์กลางของ
วุ้นจานถูกบ่มที่อุณหภูมิ 25 ± 2 องศาเซลเซียสจนการเจริญเติบโตของ
อาหารควบคุมได้ถึงขอบของแผ่น การเจริญเติบโตในแนวรัศมีได้รับการ
ประเมินโดยการวัดระยะห่างจากขอบของเชื้อที่
เสียบเป็นอัตราก้าวหน้าของอาณานิคม จากนั้นเชื้อรา
ดัชนีถูกคำนวณดังนี้
เชื้อราindexðAIÞ% ¼ DDC? deth = Dc? 100
ที่ไหนดีซีและ De แทนเส้นผ่าศูนย์กลางของเขตพื้นที่การเจริญเติบโตใน
การควบคุมและการทดลองอาหารตามลำดับ (มูฮัมมาดี,
Hashemi และ Hosseini, 2015) ค่า IC50 (ความเข้มข้น
ยับยั้ง 50% ของการเจริญเติบโตของเส้นใย) จะถูกคำนวณโดย probit
วิเคราะห์ ความเข้มข้นน้อยที่สุดในการยับยั้ง (MICs) และต่ำสุด
ความเข้มข้นของเชื้อรา (MFCs) นอกจากนี้ยังมีการตรวจสอบโดยใช้
วิธีการรายงานโดยเยนและช้าง (2008) เมื่อ themycelium ของ
เชื้อราถึงขอบของอาหารควบคุมความเข้มข้นต่ำสุด
ที่มีสัญลักษณ์ของการเจริญเติบโตไม่ถูกกำหนด เป็น MIC หลังจากที่ MIC
ถูกกำหนดเป็นชิ้นเล็ก ๆ ของวุ้น (2? 2? 2 mm3) ถูกนำมา
จากอาณานิคมของแผ่น MIC และได้รับเชื้อในยาเสพติดฟรี
กลาง PDA หลังจาก 5 วัน, MFCs ถูกกำหนดโดยต่ำสุด
เข้มข้นของสารทดสอบที่ไม่มีการฟื้นตัวของ
จุลินทรีย์ที่เป็นข้อสังเกต (เยนและช้าง, 2008) แตกต่างกัน
ที่ความเข้มข้นของการรักษาการยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อราได้รับการตรวจสอบ
กล้องจุลทรรศน์กับกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง Inverted (IX71,
Olympus, กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การใช้ยาการยับยั้งการเจริญของเชื้อราโดย CS , ซีโอ , ซีอีโอของพวกเขาและชุดถูกกำหนดด้วยการใช้พิษเทคนิคตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( mohammadi Hashemi , และ ,จะบัน 2015b , ) ในวิธีนี้ , จานเตรียมวุ้นโดยใช้อาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) ( 15 มล. / จานเพาะเชื้อ ) แก้ไขกับ CS โอโซลูชั่นเพื่อให้ได้ความเข้มข้นต่าง ๆ และ0.01e0.15 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) การควบคุมแบบขนานถูกเก็บรักษาไว้กับกลั่นน้ำและ DMSO ผสมกับ PDA ) หลังการฉีดวัคซีนที่เส้นใยของเชื้อรา ( 6-mm เส้นผ่าศูนย์กลางวุ้นปลั๊ก ) ไปยังศูนย์ของวุ้น อาหารที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส จน± 2 การเติบโตของอาหารควบคุมได้ถึงขอบจาน การเจริญเติบโตเป็นรัศมีประเมินโดยการวัดระยะห่างจากขอบของเชื้อเสียบกับด้านขอบของอาณานิคม แล้ว เชื้อราดัชนีที่คำนวณได้ดังนี้ในดัชนีðไอÞ % ¼ð DC DC 100 Þ = เดอที่ DC และ เดอ เป็นตัวแทนของเส้นผ่าศูนย์กลางของโซน การเจริญเติบโตในการควบคุมและอาหารทดลอง ( mohammadi ตามลำดับ ,Hashemi , & จะบัน 2015 ) การ ic50 ค่าความเข้มข้นยับยั้งการเจริญ เติบโต 50% ) คำนวณด้วยโปรการวิเคราะห์ พบว่า ความเข้มข้นน้อยที่สุด ( ไมค์ ) และต่ำสุดความเข้มข้น fungicidal ( MFCs ) มีการใช้วิธีการรายงานโดย เยน และ ชาง ( 2008 ) เมื่อ themycelium ของเชื้อราถึงขอบของจานควบคุมความเข้มข้นต่ำสุดไม่มีสัญญาณของการกำหนด เช่น ไมค์ หลังไมค์ถูกกำหนดเป็นชิ้นเล็ก ๆของวุ้น ( 2 2 2 มม. ) ถ่ายจากอาณานิคมของจาน ไมค์ และเป็นเชื้อที่ยาฟรีPDA ) หลังจาก 5 วัน MFCs ซึ่งถูกที่สุดความเข้มข้นของสารทดสอบที่ไม่คืนจุลินทรีย์พบว่า ( เยน & ชาง , 2008 ) ต่าง ๆความเข้มข้นของทรีทเม้นต์เพื่อยับยั้งเชื้อราได้ถูกตรวจสอบแต่ด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบแสง ( ix71 กลับหัว ,โอลิมปัส , โตเกียว , ญี่ปุ่น