Rubisco activity was determined spectrophotometrically by
coupling 3-phosphoglyceric acid formation with NADH oxidation
at 25 ◦C according to Nakano et al. [26] with some modifications.
The total activity was assayed after the crude extract was activated
in a 0.2 mL activation mixture containing 50 mM HEPES–NaOH,
pH 8.0, 0.67 mM EDTA, 33 mM MgCl2, and 10 mM NaHCO3 for
10 min. Initial Rubisco activity measurements were carried out in a
0.9 mL reaction medium containing 50 mM HEPES–NaOH (pH 8.0),
10 mM NaHCO3, 20 mM MgCl2, 2.5 mM dithiothreitol, 1 mM EDTA,
10 U creatine phosphokinase, 10 U 3-phosphoglyceric phosphokinase,
10 U glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, 5 mM ATP,
0.15 mM NADH, 5 mM phosphocreatine, 0.6 mM RuBP, and 0.1 mL
กิจกรรม Rubisco ถูกตาม spectrophotometricallyผู้แต่งกรด 3-phosphoglyceric คลัปกับ NADH ออกซิเดชันที่ 25 ◦C ตามนากาโนะ et al. [26] มีการปรับเปลี่ยนบางอย่างกิจกรรมทั้งหมดถูก assayed หลังจากเรียกใช้สารสกัดหยาบในส่วนผสมการเปิดใช้งาน 0.2 mL ประกอบด้วย 50 mM HEPES – NaOHค่า pH 8.0, 0.67 mM EDTA, MgCl2 33 มม. และ NaHCO3 10 มม.สำหรับ10 นาที Rubisco เริ่มต้นกิจกรรมวัดได้ดำเนินการกลางปฏิกิริยา 0.9 mL ประกอบด้วย 50 mM HEPES – NaOH (pH 8.0),NaHCO3, 20 mM MgCl2, 2.5 mM dithiothreitol, EDTA 1 มม. 10 มม.10 U นื้คือ phosphokinase, 10 U 3-phosphoglyceric phosphokinase10 U glyceraldehyde-3-ฟอสเฟต dehydrogenase, ATP, 5 มม.0.15 มม. NADH, phosphocreatine 5 mM, 0.6 mM RuBP และ 0.1 มล.
การแปล กรุณารอสักครู่..

กิจกรรม Rubisco ถูกกำหนด spectrophotometrically
โดยการมีเพศสัมพันธ์การก่อตัวของกรด3 phosphoglyceric กับการเกิดออกซิเดชัน NADH
ที่ 25 ◦Cตาม Nakano et al, [26] มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง.
กิจกรรมรวมได้รับการวิเคราะห์หลังจากที่สารสกัดถูกเปิดใช้งานในส่วนผสมยืนยันการใช้งาน 0.2 มิลลิลิตรที่มี 50 มิลลิ HEPES-NaOH, พีเอช 8.0, 0.67 มิลลิ EDTA, 33 มิลลิ MgCl2 และ 10 มิลลิ NaHCO3 สำหรับ10 นาที กิจกรรม Rubisco เบื้องต้นวัดได้ดำเนินการในกลางปฏิกิริยามิลลิลิตร0.9 มี 50 มิลลิ HEPES-NaOH (pH 8.0) 10 มิลลิ NaHCO3 20 มิลลิ MgCl2 2.5 มิลลิ dithiothreitol 1 มิลลิ EDTA, 10 ยูรี phosphokinase 10 U 3 phosphoglyceric phosphokinase, 10 U dehydrogenase glyceraldehyde-3-ฟอสเฟต 5 มิลลิเอทีพีNADH 0.15 มิลลิ 5 มิลลิ phosphocreatine 0.6 มิลลิ RuBP และ 0.1 มิลลิลิตร
การแปล กรุณารอสักครู่..
