Fungi on the surface of developing

Fungi on the surface of developing banana fruits were collected in the Philippines each week after flowering until the 11th week, during the rainy (August–October) and dry (January–March) seasons of 1998–2001 (Alvindia et al., 2006). Sterilized, water-wetted cotton balls (20 mm diameter) were used to swab the surface of the fruits using sterilized tweezers. The swabs were then placed in 100 ml distilled water and stirred thoroughly. Thereafter, 1 ml was pipetted from the solution and plated onto dichloran rose bengal agar, dichloran-18 glycerol agar and potato dextrose agar (PDA). Ten plates were used for each medium and incubated for 3–5 d at 25 °C. Fungi on the surface of matured fruits imported to Japan from the Philippines were collected in Japan weekly from December 1997 to July 1998 by tissue and direct isolation methods (Alvindia et al., 2000a). Tissue isolation was applied at the early stage when the disease symptoms on the fruits could be clearly distinguished from each other. Tissue pieces measuring 1 cm2 taken from the disease symptom were placed in a meshed metal container under running tap water for 5 min, blotted dry on sterile filter paper, and plated on water agar. Meanwhile, the direct isolation method was plating fungal mycelia, spores, and fruiting bodies picked from the banana fruit surface using a sterile needle onto PDA plates. Plates were incubated for 3–5 d at 25 °C. All fungi isolated from the banana fructoplane were evaluated for in vitro antagonism toward L. theobromae, by the dual incubation method ( Fokkema, 1978). Fungi with more than 25% growth inhibition (GI) toward L. theobromae were further tested for antibiosis to T. paradoxa, C. musae, and Fusarium verticillioides, the most active crown rot disease-causing pathogens of non-chemical banana ( Alvindia et al., 2002). Three mycelial plugs of each antagonistic fungus were seeded equidistantly 1 cm from the plate periphery, while a mycelial plug of the test pathogen was placed off-center on PDA plates. Mycelial plugs 4 mm in diameter were cut from the edge of 7-d-old fungal colonies maintained on PDA+5% malt extract (ME). Plates inoculated only with test pathogen served as controls. Plates were incubated at 25 °C. The experiment was repeated twice with three replications of each treatment. Percent GI was determined after 14 d using the formula described in Korsten et al. (1995): Kr−r1/kr×100=GI, where Kr represents the distance (measured in mm) of fungal growth from the point of inoculation to the colony margin of the control plates, r1 the distance of fungal growth margin in the direction of the antagonist, and the GI the percent inhibition growth. Percent GI was categorized on a scale from 0 to 4, where 0=no GI, 1=1–25% GI, 2=26–50% GI, 3=51–75%, and 4=76–100% GI. Fungi that inhibited growth of four pathogens by more than 25% were selected as candidate biocontrol agents for evaluation and optimization studies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เชื้อราบนผิวของผลไม้กล้วยถูกเก็บรวบรวมในแต่ละสัปดาห์หลังดอกบานจนถึงสัปดาห์ 11 ฝน (สิงหาคม – ตุลาคม) และฤดูกาล (มกราคม – มีนาคม) แห้งของปี 1998 – 2001 (Alvindia et al. 2006) ผ้าฝ้ายที่ผ่านการฆ่าเชื้อ เปียกน้ำลูก (เส้นผ่าศูนย์กลาง 20 มม.) ได้ใช้การ swab ผิวของผลไม้โดยใช้ปากคีบที่ผ่านการฆ่าเชื้อ สวับแล้ววางลงในน้ำกลั่น 100 มิลลิลิตร และกวนอย่างละเอียด หลังจากนั้น 1 มล.ถูก pipetted จากโซลูชัน และชุบลงบนอาหารเบงก dichloran กุหลาบ กลีเซอร dichloran-18 อาหาร และมันฝรั่งเป็นอาหาร (PDA) สิบแผ่นใช้สำหรับแต่ละขนาดกลาง และได้รับการกก d 3-5 ที่ 25 องศาเซลเซียส เชื้อราบนผิวของผลไม้สกระท่อมที่ญี่ปุ่นนำเข้าจากประเทศฟิลิปปินส์ถูกจัดเก็บในญี่ปุ่นรายสัปดาห์จาก 1997 ธันวาคม-1998 กรกฎาคม โดยเนื้อเยื่อและวิธีแยกโดยตรง (Alvindia et al. 2000a) แยกเนื้อเยื่อถูกนำไปใช้ในระยะแรก ๆ เมื่ออาการโรคในผลไม้อาจจะแตกต่างจากกันอย่างชัดเจน ชิ้นเนื้อเยื่อที่วัด 1 cm2 จากอาการโรคถูกวางในภาชนะโลหะแบบตาข่ายทำน้ำประปาสำหรับ 5 นาที blotted แห้งบนกระดาษกรองปลอดเชื้อ และชุบในน้ำอาหาร ในขณะเดียวกัน วิธีการแยกโดยตรงถูกชุบ mycelia รา รา และร่างกาย fruiting เบิกจากพื้นผิวของผลไม้กล้วยใช้เข็มเป็นหมันลงแผ่น PDA แผ่นได้รับการกก d 3-5 ที่ 25 องศาเซลเซียส เชื้อราทั้งหมดที่แยกได้จาก fructoplane กล้วยถูกประเมินสำหรับ antagonism ในหลอดทดลองต่อ L. theobromae โดยวิธีการกกไข่แบบคู่ (Fokkema, 1978) เชื้อราที่ยับยั้งการเจริญเติบโต 25% (GI) ต่อ L. theobromae ได้รับการทดสอบเพิ่มเติมสำหรับ antibiosis T. paradoxa, C. musae และ Fusarium verticillioides มากที่สุดมงกุฎเน่าก่อเชื้อโรคของกล้วยปลอดสาร (Alvindia et al. 2002) สาม mycelial ปลั๊กของเชื้อราแต่ละไม้เบื่อฟิตเนส equidistantly 1 ซม.จากขอบจาน ในขณะที่ปลั๊ก mycelial ของเชื้อทดสอบวางกลางบน PDA แผ่น Mycelial ปลั๊ก 4 มม.ถูกตัดจากขอบของอาณานิคมเชื้อรา 7 d อายุรักษา PDA + 5% มอลต์สกัด (ME) แผ่น inoculated กับเชื้อทดสอบเป็นตัวควบคุมเท่านั้น ได้รับการกกแผ่นที่ 25 องศาเซลเซียส การทดลองครั้งที่สองกับสามระยะของการรักษาแต่ละซ้ำอีกครั้ง กำหนดเปอร์เซ็นต์ GI หลัง 14 d โดยใช้สูตรอธิบายไว้ใน Korsten et al. (1995): Kr−r1/kr × 100 = GI ที่ Kr หมายถึงระยะทาง (วัด mm) ของเชื้อราเจริญเติบโตจากจุดของ inoculation อัตราอาณานิคมของแผ่นควบคุม r1 ระยะห่างของขอบเชื้อราเจริญเติบโตในทิศทางของการเป็นศัตรู และ GI เปอร์เซ็นต์ยับยั้งการเจริญเติบโต ร้อยละ GI ถูกจัดประเภทในระดับจาก 0 เป็น 4 ที่ 0 =ไม่มี GI, GI 1 = 1 – 25%, 2 = 26 – 50% GI, 3 = 51-75% และ GI 4 = 76 – 100% เชื้อราที่ยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อโรคทั้งสี่มากกว่า 25% ถูกเลือกเป็นตัวแทน biocontrol ผู้สมัครสำหรับการศึกษาทดลองและเพิ่มประสิทธิภาพ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เชื้อราบนพื้นผิวของการพัฒนาผลไม้กล้วยถูกเก็บไว้ในฟิลิปปินส์ในแต่ละสัปดาห์หลังดอกบานจนถึงสัปดาห์ที่ 11 ในช่วงฤดู​​ฝน (เดือนสิงหาคมถึงตุลาคม) และแห้ง (มกราคมมีนาคม) ฤดูกาล 1998-2001 (Alvindia et al., 2006) . ผ่านการฆ่าเชื้อน้ำเปียกลูกฝ้าย (20 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง) ถูกนำมาใช้ไม้กวาดพื้นผิวของผลไม้โดยใช้แหนบฆ่าเชื้อ swabs ถูกวางไว้แล้วใน 100 มล. น้ำกลั่นและกวนอย่างทั่วถึง หลังจากนั้นเป็นต้นมา 1 มิลลิลิตรปิเปตจากการแก้ปัญหาและชุบลงบนวุ้น Dichloran เพิ่มขึ้นเบงกอล Dichloran-18 กลีเซอรอลและอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar (PDA) สิบแผ่นถูกนำมาใช้สำหรับแต่ละขนาดกลางและบ่มเป็นเวลา 3-5 D ที่ 25 ° C เชื้อราบนพื้นผิวของผลไม้สุกที่นำเข้าญี่ปุ่นจากฟิลิปปินส์ถูกเก็บไว้ในญี่ปุ่นสัปดาห์จากธันวาคม 1997 ถึงเดือนกรกฎาคมปี 1998 โดยเนื้อเยื่อและวิธีการแยกใช้โดยตรง (Alvindia et al., 2000a) แยกเนื้อเยื่อถูกนำมาใช้ในขั้นตอนแรกเมื่ออาการของโรคบนผลไม้อาจจะแตกต่างอย่างชัดเจนจากกันและกัน ชิ้นเนื้อเยื่อวัด 1 cm2 นำมาจากอาการโรคถูกวางไว้ในภาชนะโลหะตาข่ายภายใต้การใช้น้ำประปาเป็นเวลา 5 นาที, เปื้อนแห้งบนกระดาษกรองผ่านการฆ่าเชื้อและชุบวุ้นในน้ำ ในขณะที่วิธีการแยกโดยตรงชุบเชื้อราเส้นใยสปอร์และดอกเห็ดหยิบมาจากพื้นผิวผลไม้กล้วยโดยใช้เข็มผ่านการฆ่าเชื้อบนจาน PDA แผ่นถูกบ่ม 3-5 D ที่ 25 ° C เชื้อราทั้งหมดที่แยกได้จาก fructoplane กล้วยได้รับการประเมินสำหรับการเป็นปรปักษ์กันในหลอดทดลองที่มีต่อลิตร theobromae โดยคู่วิธีการบ่ม (Fokkema, 1978) เชื้อรากับยับยั้งการเจริญกว่า 25% (GI) ไปทาง L. theobromae ได้มีการทดสอบต่อไปสำหรับ antibiosis ที paradoxa, C. musae และ verticillioides Fusarium ที่ใช้งานมากที่สุดมงกุฎเน่าโรคที่ก่อให้เกิดเชื้อโรคของกล้วยที่ไม่ใช่สารเคมี (Alvindia et al., 2002) สามปลั๊กเส้นใยของเชื้อราปฏิปักษ์แต่ละเมล็ด equidistantly 1 ซม. จากขอบแผ่นในขณะที่เสียบเส้นใยของเชื้อโรคทดสอบถูกวางไว้ตรงกลางบนจาน PDA ปลั๊กเส้นใยเส้นผ่านศูนย์กลาง 4 ถูกตัดออกจากขอบของโคโลนีของเชื้อรา 7-D-เก่าเก็บรักษาไว้บน PDA + สารสกัดจากมอลต์ 5% (ที่ ME) แผ่นเชื้อเท่านั้นที่มีการทดสอบการติดเชื้อทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม แผ่นถูกบ่มที่ 25 ° C การทดลองซ้ำกันสองครั้งสามซ้ำของการรักษาแต่ละครั้ง ร้อยละ GI ถูกกำหนดหลังจาก 14 D โดยใช้สูตรที่อธิบายไว้ใน Korsten et al, (1995): KR-R1 / KR × 100 = GI ที่ Kr หมายถึงระยะทาง (วัดมิลลิเมตร) ของการเจริญเติบโตของเชื้อราจากจุดของการฉีดวัคซีนเป็นอัตราอาณานิคมของแผ่นควบคุม R1 ระยะห่างจากขอบเจริญเติบโตของเชื้อราในที่ ทิศทางของศัตรูและ GI ยับยั้งการเจริญเติบโตร้อยละ ร้อยละ GI ถูกแบ่งในระดับ 0-4 โดย 0 = ไม่มี GI 1 = 1-25% GI 2 = 26-50% GI 3 = 51-75% และ 4 = 76-100% GI เชื้อราที่สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อโรคที่สี่โดยกว่า 25% ได้รับเลือกเป็นตัวแทนผู้สมัครควบคุมทางชีวภาพสำหรับการประเมินผลและการเพิ่มประสิทธิภาพการศึกษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เชื้อราบนพื้นผิวของการพัฒนาผลไม้กล้วยถูกเก็บในฟิลิปปินส์แต่ละสัปดาห์หลังดอกบานจนถึงสัปดาห์ที่ 11 ในช่วงฤดูฝน ( สิงหาคม - ตุลาคม ) และฤดูแล้ง ( มกราคม - มีนาคม ) ฤดูกาล 1998 – 2001 ( alvindia et al . , 2006 ) ฆ่าเชื้อ น้ำเปียกลูกฝ้าย ( 20 มม. เส้นผ่าศูนย์กลาง ) ใช้เช็ดพื้นผิวของผลไม้ที่ใช้ฆ่าเชื้อแหนบ ส่วนลำตัวถูกวางไว้แล้วใน 100 มล. น้ำกลั่นและกวนให้ละเอียด หลังจากนั้น 1 ml พบ pipetted จากโซลูชั่น และ ชุบลงบนไดคลอแรนโรสเบงกอล dichloran-18 กลีเซอรอลและวุ้น วุ้นอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) จานใช้สำหรับแต่ละและสิบกลางบ่ม 3 – 5 D ที่ 25 ° C . เชื้อราบนพื้นผิวของสุกผลไม้นำเข้าจากฟิลิปปินส์ ญี่ปุ่น ศึกษาในญี่ปุ่นรายสัปดาห์จากธันวาคม 2540 ถึงเดือนกรกฎาคม 2541 โดยเนื้อเยื่อและวิธีการแยกโดยตรง ( alvindia et al . , ประกอบ ) การแยกเนื้อเยื่อที่ใช้ในช่วงแรกๆ เมื่ออาการโรคในผลไม้อาจจะแตกต่างอย่างชัดเจนจากแต่ละอื่น ๆ เนื้อเยื่อชิ้น 1 ตร. ซม. วัดจากโรคที่ถูกวางไว้ในภาชนะบรรจุภายใต้ตาข่ายโลหะวิ่งแตะน้ำนาน 5 นาทีเปื้อนแห้งบนกระดาษกรองที่เป็นหมัน และชุบในน้ำวุ้น ในขณะเดียวกัน การแยกโดยวิธีชุบเส้นใยเชื้อรา , สปอร์ , และผลรับจากร่างกล้วยผลไม้ผิวโดยใช้เข็มปลอดเชื้อบน PDA แผ่น จานถูกบ่ม 3 – 5 D ที่ 25 ° C ทั้งหมดเชื้อราจากกล้วย fructoplane มาศึกษากันต่อในการเพาะบ่มเชื้อรา L . theobromae โดยสองวิธี ( fokkema , 1978 ) เชื้อรากับการยับยั้งการเจริญเติบโตมากกว่า 25 % ( กี ) ต่อเชื้อรา L . theobromae ได้ทดสอบแอนติไบโ ิส เพื่อที พาราด็ ซา . . . musae และ Fusarium verticillioides , ใช้งานมากที่สุดที่ไม่ก่อให้เกิดโรคเน่า โรคมงกุฎเคมีกล้วย ( alvindia et al . , 2002 ) การเจริญของเชื้อราปฏิปักษ์สามปลั๊กแต่ละถูก seeded equidistantly 1 ซม. จากขอบจาน ขณะเสียบมีการทดสอบเชื้อโรคถูกวางปิดศูนย์อาหารจาน มีปลั๊ก 4 มม. ที่ถูกตัดจากขอบของโคโลนีบนอาหาร PDA 7-d-old เชื้อรารักษา + 5% malt extract ( ME ) แผ่นทดสอบเชื้อโรคเชื้อเท่านั้นที่มีหน้าที่ควบคุม แผ่นอุณหภูมิ 25 องศา และทำการทดลองซ้ำ สองกับสามซ้ำของการรักษาแต่ละ เปอร์เซ็นต์ กี ถูกกำหนดหลังจาก 14 D โดยใช้สูตรที่อธิบายไว้ใน korsten et al . ( 1995 ) : KR − 1 / KR × 100 = กีที่ KR แสดงถึงระยะห่าง ( วัดในมิลลิเมตร ) การเจริญเติบโตของเชื้อราจากจุดของการฉีดวัคซีนในอาณานิคมขอบของแผ่นควบคุม , R1 ระยะห่างของขอบการเจริญเติบโตในทิศทางของคู่ต่อสู้ และ กีเปอร์เซ็นต์การยับยั้งการเจริญเติบโต เปอร์เซ็นต์กีเส้นบนสเกลจาก 0 ถึง 4 , 0 = ไม่กี , 1 = 1 – 25 % กี , 2 = 26 – 50% กี , 3 = 51 - 75 % และ 4 = 76 – 100% กี เชื้อราที่ยับยั้งการเติบโตของเชื้อโรค โดยสี่มากกว่า 25 % ได้รับเลือกเป็นผู้สมัครไบโอคอนโทรลตัวแทนการประเมินและเพิ่มประสิทธิภาพการศึกษา