The inserts of pBS–pds S or pBS–pds

The inserts of pBS–pds S or pBS–pds L with the ble added 5′ or 3′ to the mutated pds selection marker gene, were extracted using restriction endonucleases and these linear DNA fragments were used to successfully transform H. pluvialis at frequencies similar to circular plasmids (Table 2). Norflurazon-resistant colonies were isolated and analyzed. The mutated DNA genotype was confirmed by PCR and DNA sequencing (data not shown). The transgene inserted was confirmed by PCR of the full-length CDS (Fig. 3) and the full PsaD–ble cassette (data not shown).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แทรกของ pBS – pds S หรือ L pBS – pds กับ ble ที่เพิ่ม 5′ หรือ 3′ กับยีนเครื่องหมาย pds กลายเลือก ถูกสกัดโดยใช้ endonucleases จำกัดและเส้นเหล่านี้ใช้ชิ้นส่วนดีเอ็นเอเพื่อแปลง H. pluvialis ที่ความถี่คล้ายกับวงกลม plasmids (ตาราง 2) เสร็จเรียบร้อย Norflurazon ทนอาณานิคมถูกแยกต่างหาก และวิเคราะห์ ลักษณะทางพันธุกรรมดีเอ็นเอกลายเป็น confirmed โดย PCR ดีเอ็นเอที่ลำดับเบส (ข้อมูลไม่แสดง) Transgene แทรกถูก confirmed โดย PCR ของเทป PsaD – ble เต็ม (ไม่แสดงข้อมูล) และซีดีจัด (Fig. 3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แทรกของพีบีเอส S-ปอนด์หรือพีบีเอส PDS-L กับเบิ้ลเพิ่ม 5 'หรือ 3' เพื่อ PDS กลายพันธุ์ของยีนเครื่องหมายเลือกถูกสกัดโดยใช้ endonucleases ข้อ จำกัด และดีเอ็นเอเชิงเส้นเหล่านี้ถูกใช้ในการประสบความสำเร็จในการแปลงเอช pluvialis ที่ความถี่ที่คล้ายกัน พลาสมิดที่จะวงกลม (ตารางที่ 2) ไม่ fl อาณานิคมทน urazon ถูกแยกและวิเคราะห์ ยีนกลายพันธุ์ดีเอ็นเอถูกไฟนักโทษ rmed โดยวิธี PCR และลำดับดีเอ็นเอ (ไม่ได้แสดงข้อมูล) ยีนใส่เป็นสายนักโทษ rmed โดยวิธี PCR ของ CDS ยาวเต็มรูปแบบ (รูปที่. 3) และเทป psad-เบิ้เต็ม (ไม่ได้แสดงข้อมูล)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แทรกของ PBS – PDS หรือ PBS – PDS L กับ ble เพิ่ม 5 ’’หรือ 3 เพื่อเลือกเครื่องหมายยีนกลายพันธุ์ PDS ถูกสกัดโดยใช้สงบเงียบและข้อ จำกัด เหล่านี้เส้นดีเอ็นเอถูกใช้เพื่อประสบความสำเร็จแปลง . สีเขียวที่ความถี่ที่คล้ายกับวงกลม ) ( ตารางที่ 2 ) หรือfl urazon ป้องกันอาณานิคมได้ถูกแยกและวิเคราะห์กลายพันธุ์ดีเอ็นเอพันธุกรรมด้วยวิธี PCR และถูกหลอกจึง rmed ดีเอ็นเอ ( ข้อมูลไม่แสดง ) ยีนที่ถูกถ่ายทอดโดยวิธี PCR rmed คอนแทรกของแผ่นซีดีแบบเต็มตัว ( รูปที่ 3 ) และเต็ม psad – ble เทป ( ข้อมูลไม่แสดง ) .