2.5. Optic nerve axon count methodT

2.5. Optic nerve axon count method
To quantify RGC loss, we quantified axon loss in optic nerve cross-sections using a validated sampling method (Levkovitch-Verbin et al., 2002). The optic nerves were fixed either by perfusion or immersion as described above, then post-fixed in 1% osmium tetroxide, dehydrated in alcohol, and stained with 1% uranyl acetate in 100% ethanol for 1 h. They were then embedded in epoxy resin, sectioned at 1 mm, and stained with Toluidine Blue. The cross- sections were digitally imaged (Cool Snap camera, Metamorph Image Analysis software; Molecular Devices, Downington, PA) at 10 to assess optic nerve area. Five higher power images (40 mm square, 100 ) were used to measure axon density by observers masked to the protocol used for the eye. To ensure that non-axonal elements were not mistaken for axons, the high power images were individually viewed and edited to include only axon profiles. The mean axon density was multiplied by the nerve area for each sample to give total axon number. In order to yield percent axon loss, we compared this estimated total axon number for each sample against the mean of control or fellow eye axon counts.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 แก้วนำแสงเส้นประสาทวิธีนับซอน
ปริมาณการสูญเสีย RGC เราวัดการสูญเสียซอนในเส้นประสาทแก้วนำแสงข้ามส่วนโดยใช้วิธีการสุ่มตัวอย่างตรวจสอบ (levkovitch verbin-et al,., 2002) เส้นประสาทแก้วนำแสงได้รับการแก้ไขอย่างใดอย่างหนึ่งโดยการปะหรือแช่ตามที่อธิบายไว้ข้างต้นแล้วโพสต์คงที่ใน 1% tetroxide ออสเมียมแห้งในเครื่องดื่มแอลกอฮอล์และเปรอะเปื้อนไปด้วย 1% uranyl acetate 100% เอทานอลเป็นเวลา 1 ชั่วโมงพวกเขาถูกฝังอยู่แล้วในอีพ็อกซี่เรซิ่น, แบ่งที่ 1 มิลลิเมตรและย้อมด้วยสีฟ้า tol​​uidine ส่วนข้ามถูกถ่ายภาพในแบบดิจิทัล (กล้องสแน็ปเย็นซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ภาพ metamorph; อุปกรณ์โมเลกุล DOWNINGTON, ปี) ที่ 10 เพื่อประเมินพื้นที่ของเส้นประสาทแก้วนำแสง ห้าภาพพลังงานที่สูงขึ้น (40 มม. เมตร 100) ถูกนำมาใช้ในการวัดความหนาแน่นของซอนโดยผู้สังเกตการณ์ที่จะสวมหน้ากากโปรโตคอลที่ใช้สำหรับตาเพื่อให้แน่ใจว่าองค์ประกอบที่ไม่ axonal ไม่ได้เข้าใจผิดว่าเป็นแกนภาพพลังงานสูงถูกมองเป็นรายบุคคลและแก้ไขรวมถึงโปรไฟล์ซอนเท่านั้น ความหนาแน่นเฉลี่ยซอนถูกคูณด้วยพื้นที่ของเส้นประสาทสำหรับแต่ละตัวอย่างเพื่อให้จำนวนซอนรวม เพื่อให้การสูญเสียซอนร้อยละเราเมื่อเทียบกับจำนวนนี้ซอนรวมประมาณสำหรับแต่ละตัวอย่างกับความหมายของการควบคุมหรือเพื่อนนับซอนตา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5. ประสาทแอกซอนนับวิธี
วัดปริมาณขาดทุน RGC เรา quantified สูญเสียแอกซอนใน cross-sections ประสาทโดยใช้วิธีการสุ่มตัวอย่างตรวจ (Levkovitch-Verbin และ al., 2002) เส้นประสาทจักษุมีถาวร โดยการกำซาบหรือแช่ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น แล้วหลังถาวรใน 1% ออสเมียมเทโตรไซด์ อบแห้งในแอลกอฮอล์ และสีกับ acetate uranyl 1% ในเอทานอล 100% สำหรับ 1 h พวกเขาถูก แล้วฝังในเรซินแบบ จัดแบ่งเป็นส่วน ๆ ที่ 1 mm และสี ด้วยสีฟ้า Toluidine ส่วนขนที่ imaged ดิจิทัล (Snap เย็นกล้อง ซอฟต์แวร์วิเคราะห์ภาพ Metamorph อุปกรณ์โมเลกุล Downington, PA) ที่ 10 เพื่อประเมินประสาทตาตั้ง ห้าสูงพลังงานรูป (40 mm สแควร์ 100) ใช้วัดความหนาแน่นของแอกซอน โดยการหลอกลวงการโพรโทคอลที่ใช้สำหรับตาผู้สังเกตการณ์ เพื่อให้แน่ใจว่า องค์ประกอบไม่ใช่ axonal ไม่ถูกดาวตามปกติสำหรับ axons ภาพพลังงานสูงได้ทีดู และแก้ไขเพื่อรวมโพรไฟล์แอกซอนเท่านั้น ความหนาแน่นเฉลี่ยแอกซอนถูกคูณ ด้วยพื้นที่ประสาทสำหรับแต่ละอย่างให้แอกซอนรวมจำนวน เพื่อให้ผลผลิตสูญเสียแอกซอนเปอร์เซ็นต์ เราเปรียบเทียบนี้ประมาณเลขแอกซอนทั้งหมดสำหรับแต่ละตัวอย่างกับค่าเฉลี่ยของตัวควบคุม หรือแอกซอนตาเพื่อนนับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 . วิธีการนับจำนวน axon จักษุประสาท
ซึ่งจะช่วยในการ volatility )การสูญเสีย rgc เราการสูญเสีย axon คำนวณออกมาเป็นรูปธรรมได้หรือในออปติกประสาทแบบส่วนตัวอย่างโดยใช้วิธีได้รับการตรวจสอบ( levkovitch-verbin et al . 2002 ) สายไฟเบอร์ออปติกที่มีประสาทแบบคงที่ทั้งโดยอาจทำให้เกิดความดันโลหิตแบบหรือสามารถจมน้ำได้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้นแล้วหลังแบบคงที่ใน 1% ออสเมียม tetroxide ,ความร้อนในแอลกอฮอลล์และแต้มสีพร้อมด้วย 1% uranyl เกลือของกรดน้ำส้มใน 100% สำหรับเอทานอล 1 ชั่วโมง.พวกเขาเป็นเอ็มเบ็ดเด็ดในเรซินอีพ็อกซีเรซินซอยที่ 1 แต้มสีและมม.ด้วย toluidine สีฟ้าแล้ว Cross - ส่วนที่สร้างอิมเมจด้วยซอฟท์แวร์สร้างอิมเมจของบริษัทด้วยระบบดิจิตอล(เย็นกล้อง snap metamorph ซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ ภาพ อุปกรณ์ระดับโมเลกุล downington ป่า)ที่ 10 ในการประเมินพื้นที่ประสาทออปติก ภาพ ไฟห้าสูงกว่า( 40 มม., 100 )ได้ถูกนำมาใช้เพื่อวัดความหนาแน่น axon โดยบรรดานักสังเกตการณ์ซ่อนเร้นเพื่อโปรโตคอลที่ใช้สายตาในการตรวจสอบให้แน่ใจว่าส่วนประกอบแบบไม่ axonal ไม่ได้คิดว่าเป็น axons ภาพ กำลังไฟสูงที่เป็นแบบเฉพาะตัวดูและแก้ไขได้รวมถึงส่วนกำหนดค่า axon เท่านั้น ความหนาแน่น axon หมายถึงที่เป็นคูณด้วยบริเวณประสาทที่สำหรับตัวอย่างให้หมายเลข axon ทั้งหมด ในการสั่งซื้อจะยอมให้การสูญเสีย axon %เราเมื่อเทียบกับจำนวน axon ยอดรวมที่ประมาณการแห่งนี้สำหรับตัวอย่างของแต่ละการนับถอยหลัง axon ตาหมายถึงการควบคุมหรือคนที่