2.4. Acid resistance and bile salt

2.4. Acid resistance and bile salt tolerance of isolated strains
Isolated strains were cultivated in MRS broth until the OD600
reached 1.2. One ml of culture was centrifuged at 12,000g for
10 min at 4
C and cell pellet was resuspended in MRS broth where
the pH was adjusted to 2 or 3 or 6.5 (control), respectively, by 1 N
HCl. Cell suspensions were incubated for 3 h at 37
C and then
viable cells were counted by standard plate counting. Measurements
were done in triplicates and the mean values were shown.
Bile tolerance of isolated strains was examined. Strains were
cultivated in MRS broth until the OD600 reached 1.2 and cells were
harvested by centrifugation (12,000g, 10 min, 4
C). Cell pellet was
washed with sterile water and resuspended in 1 ml of MRS broth
containing 0.3% bile salts (cholic acid sodium salt 50% and deoxycholic
acid sodium salt 50%, SigmaeAldrich, 48305). After 3 h incubation
at 37
C, viable cells were counted. All measurements
were repeated three times (three separate samples) with duplicate
determinations and the results were shown as mean ± SD (standard
deviation

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. กรดและเกลือน้ำดีต้านความอดทนของสายพันธุ์ที่แยกสายพันธุ์ที่แยกได้ปลูกในซุป MRS จน OD600 การถึง 1.2 แก้ไขจากวัฒนธรรมหนึ่งมิลลิลิตรที่ 12,000g สำหรับ10 นาทีที่ 4 C และเซลล์เม็ดถูก resuspended ในซุป MRS ที่ค่า pH ปรับปรุง 2 หรือ 3 หรือ 6.5 (ควบคุม), ตามลำดับ โดย 1 Nสารแขวนลอยเซลล์ HCl. ได้รับการกก 3 ชั่วโมงที่ 37 C แล้วเซลล์ทำงานได้ถูกตรวจนับ โดยนับจานมาตรฐาน การวัดได้ทำใน triplicates และมีแสดงค่าเฉลี่ยมีการตรวจสอบยอมรับน้ำดีแยกสายพันธุ์ สายพันธุ์ได้เพาะปลูกในน้ำซุปนางจนถึง OD600 1.2 และเซลล์เก็บเกี่ยว โดยการหมุนเหวี่ยง (12, 000 กรัม 10 นาที 4 C) คือเซลล์เม็ดล้าง ด้วยน้ำหมันและ resuspended ใน 1 มิลลิลิตรของน้ำซุป MRSที่ประกอบด้วยเกลือน้ำดี 0.3% (cholic กรดโซเดียมเกลือ 50% และ deoxycholicโซเดียมกรดเกลือ 50%, SigmaeAldrich, 48305) หลังจากบ่ม 3 ชมที่ 37 C เซลล์ทำงานได้นับ การประเมินทั้งหมดซ้ำกันสามครั้ง (สามแยกตัวอย่าง) ด้วยซ้ำวิเคราะห์ปริมาณและผลลัพธ์ถูกแสดงเป็นหมายถึง ± SD (standardส่วนเบี่ยงเบน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 กรดต้านทานและเกลือน้ำดีความอดทนของสายพันธุ์ที่แยก
สายพันธุ์ที่แยกได้รับการปลูกฝังใน MRS น้ำซุปจน OD600
ถึง 1.2 หนึ่งมิลลิลิตรของวัฒนธรรมได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 12,000g สำหรับ
10 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสและเซลล์เม็ดถูก resuspended ใน MRS น้ำซุปที่
มีค่า pH ที่ถูกปรับให้ 2 หรือ 3 หรือ 6.5 (ควบคุม) ตามลำดับโดย 1 N
HCl เซลล์แขวนลอยถูกบ่มเป็นเวลา 3 ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียสและจากนั้น
เซลล์ที่มีชีวิตนับโดยการนับจานมาตรฐาน วัด
ได้ทำใน triplicates และค่าเฉลี่ยที่มีการแสดง.
อดทนน้ำดีของสายพันธุ์ที่แยกถูกตรวจสอบ สายพันธุ์ที่ได้รับการ
ปลูกใน MRS น้ำซุปจน OD600 ถึง 1.2 และเซลล์ที่ถูก
เก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยง (12,000g, 10 นาที, 4? C) ตะกอนเซลล์ได้รับการ
ล้างด้วยน้ำหมันและ resuspended ใน 1 มิลลิลิตรของ MRS น้ำซุป
ที่มีเกลือน้ำดี 0.3% (โคลิกกรดเกลือโซเดียม 50% และ deoxycholic
กรดเกลือโซเดียม 50%, SigmaeAldrich, 48305) หลังจาก 3 ชั่วโมงบ่ม
ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส, เซลล์ที่มีชีวิตนับ วัดทั้งหมด
ซ้ำสามครั้ง (สามตัวอย่างที่แยกต่างหาก) ด้วยซ้ำ
พิจารณาและผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD (Standard
เบี่ยงเบน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . ทนต่อกรดและเกลือน้ำดี ความอดทนของแยกสายพันธุ์แยกสายพันธุ์ปลูกใน MRS broth จน od600ถึง 1.2 1 มิลลิลิตรของวัฒนธรรมที่ 12000g ไฟฟ้าสำหรับ10 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส และเซลล์เม็ดเป็น resuspended ใน MRS broth ที่ปรับพีเอชเป็น 2 หรือ 3 หรือ 4 ( ควบคุม ) 1 n ตามลำดับHCL . เซลล์แขวนลอยถูกบ่มเป็นเวลา 3 ชม. ที่อุณหภูมิ 37 แล้วได้เซลล์ก็นับตามมาตรฐานแผ่นนับ หน่วยวัดทำ 3 ซ้ำ และหมายถึงค่านิยมที่แสดงการแยกสายพันธุ์ของน้ำดีถูกตรวจสอบ สายพันธุ์ปลูกใน MRS broth จน od600 ถึง 1.2 และเซลล์คือการเก็บเกี่ยวโดยการปั่นเหวี่ยง ( 12000g 10 นาที 4 C ) เป็นเซลล์เม็ดการล้างด้วยน้ำที่ผ่านและ resuspended ใน MRS broth 1 มิลลิลิตรของประกอบด้วยเกลือน้ำดี 0.3 % ( กรดโคลิกเกลือโซเดียม 50% และ deoxycholicเกลือโซเดียมกรด 50% sigmaealdrich 48305 , ) 3 ชั่วโมงหลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ได้เซลล์ก็นับ การวัดทั้งหมดเป็นเวลาสามครั้ง ( สามตัวอย่างแยก ) กับที่ซ้ำกันใช้และผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD ( มาตรฐานส่วนเบี่ยงเบน