In the present study, polyphenols w

In the present study, polyphenols were determined and profiled in lettuce leaves in response to variations in growth conditions, including night-time temperatures and the duration of
greenhouse cultivation using liquid chromatography-tandem
mass spectrometry (LC/MS/MS) and principal component analysis (PCA). Polyphenol characterization utilizing LC/MS/MS is
advantageous because it does not require extensive purification
steps. LC/MS/MS is a powerful tool that provides clear and
characteristic fragment patterns to identify plant polyphenols
[14]. Our results will be useful to develop cultivation guidelines
for the production of health-beneficial polyphenol-rich lettuce.
Material and methods
Materials and chemicals
Lettuce ( L. sativa L., cv Cheongchima) seeds were germinated
in plug-cell trays filled with ‘Tosilee’ (Shinan Grow Co., Jinju,
Republic of Korea) commercial media on May 10, 2011. After
four leaves were opened, they were transplanted to 9 cm plastic
pots and cultivated in three glass chambers (KGC-175 V,
Koencon, Hanam, Republic of Korea) with a day temperature
of 22 C and night temperatures of 4, 12, and 20 C, until harvest. The photoperiod was 12-h light/12-h dark and was provided by fluorescent lamps (approximately 450 lmol m–2 s–1).
Relative air humidity was approximately 65%. Water was supplied daily via overhead irrigation, and nutrient solution (Hoagland, pH = 5.9 ± 0.2, EC = 1.2 mS cm 1) was provided
every 4 days. The plant density was 36 plant/m2 in each treatment. The plants were rearranged every 3 days to minimize
position and/or edge effects in glass chamber. The leaves were
washed with distilled water, lyophilized, and stored in dark
glass containers at –20 C pending analysis.
Caffeic acid, kaempferol, and quercetin were used as external standards after recrystallization in ethanol (Sigma–Aldrich
Co., St. Louis, MO, USA). The purity of all standards was
confirmed by HPLC to be at least 99%. All solvents and water
were obtained from Duksan Pure Chemical Co., Ltd. (Ansan,
Republic of Korea).
Extraction and purification
Lyophilized leaves (0.5 g) were ground into a powder and
poured into 25 mL of aqueous 80% methanol. The mixture
was homogenized using a Polytron blender (Brinkman Instruments, Westbury, NY, USA) for 5 min at room temperature
and treated in a sonicator (100 W, 42 KHZ, Bransonic
3510R-DTH, Danbury, CT, USA) for 10 min. The extract
was filtered through a glass filter under reduced pressure and
centrifuged at 4000g (SCT4B centrifuge, Hitachi, Ibaraki,
Japan). The supernatant was filtered through a PTFE syringe
filter (Titan, 0.45 lm, SMI Lab Hut Co., Ltd. Maisemore,
UK), and the filtrate was stored at 20 C until analysis.
LC/MS/MS
The LC/MS/MS experiment was performed according to our
previously reported methodology [15] with the exception of
494 S.W. Jeong et al.
the column and solvent system. The column was a Cosmosil
C18 (4.6 mm · 250 mm, 3.5 lm, Nacalai, Inc., San Diego,
CA, USA), and the constituents of the solvent system were
0.1% aqueous formic acid (A) and methanol:water (6:4, v/v,
B). The gradient conditions of the mobile phase were: from
0% to 10% B over 10 min, from 10% to 100% B over
50 min, and isocratic elution for 10 min. MS/MS experiments
were performed using a 3200 Q TRAP LC/MS/MS system
(Applied Biosystems, Forster, CA, USA) with a Turbo VTM
source and a Turbo Ion Spray probe (500 C). The mass spectrometer was operated in positive and negative ion mode.
Nitrogen was used as a nebulizing as well as a drying gas.
The flow rates in both cases were 45 psi. The capillary voltage
was set at 5.5 kV and the source temperature was set at 500 C.
The resolutions of the first and third quadrupole were between
0.6 and 0.8 (unit resolution). Mass spectra were recorded
between m/z 100 and 1000 with a step size of 0.1 amu

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในการศึกษาปัจจุบัน โพลีฟีนถูกกำหนด และ profiled ในใบผักกาดหอมในการตอบสนองความแตกต่างในการเจริญเติบโต เวลากลางคืนอุณหภูมิและระยะเวลาของเพาะปลูกเรือนกระจกที่ใช้ของเหลว chromatography ตัวตามกันไปโตรเมทรี (LC/MS/MS) และการวิเคราะห์ส่วนประกอบหลัก (PCA) มี Polyphenol จำแนกใช้ LC/MS/MSประโยชน์เนื่องจากไม่ต้องฟอกอย่างละเอียดขั้นตอนการ LC/MS/MS เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพที่ชัดเจน และรูปแบบลักษณะส่วนการระบุโรงงานโพลี[14] ผลของเราจะเป็นประโยชน์ในการพัฒนาแนวทางการเพาะปลูกสำหรับการผลิตของผักกาดหอม polyphenol อุดมไปด้วยประโยชน์ต่อสุขภาพวัสดุและวิธีการวัสดุและเคมีภัณฑ์ผักกาดหอม (ซา L. L., cv Cheongchima) เมล็ดมีเปลือกงอกในถาดต่อเซลล์ที่มี 'Tosilee' (ชีนานเติบโต จำกัด จินจูสื่อเชิงพาณิชย์ของสาธารณรัฐเกาหลี) on 10 พฤษภาคม 2011 หลังจากเปิด 4 ใบ พวกเขาถูก transplanted กับพลาสติก 9 ซมกระถางและปลูกในสามแก้วแชมเบอร์ส (KGC 175 VKoencon, Hanam สาธารณรัฐเกาหลี) กับอุณหภูมิวันของ 22 C และกลางคืนอุณหภูมิของ 4, 12 และ 20 C จนถึงเก็บเกี่ยว ชั่วโมง 12 h แสง/12-h เข้ม และได้รับหลอดฟลูออเรสเซนต์ (ประมาณ 450 lmol m – 2 s – 1)ความชื้นสัมพัทธ์อากาศได้ประมาณ 65% น้ำที่ให้ทุกวันผ่านชลประทานจ่าย และโซลูชั่นธาตุอาหาร (Hoagland, pH = 5.9 ± 0.2, EC = 1.2 mS ซม. 1) ให้ทุกวัน 4 ความหนาแน่นของพืชพืช 36 m2 ในแต่ละทรีทเม้นต์ พืชได้ปรับใหม่ทุก 3 วันเพื่อลดตำแหน่งหรือลักษณะขอบในหอแก้ว ใบไม้ได้ล้าง ด้วยน้ำกลั่น lyophilized และเก็บไว้ในความมืดบรรจุภัณฑ์แก้วที่ C –20 พิจารณาวิเคราะห์กรด caffeic, kaempferol และ quercetin ถูกใช้เป็นมาตรฐานภายนอกหลังจาก recrystallization ในเอทานอล (ซิก-Aldrichจำกัด St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) มีความบริสุทธิ์ของยืนยัน โดย HPLC จะ น้อย 99% หรือสารทำละลายและน้ำทั้งหมดได้รับจาก Duksan บริสุทธิ์ Chemical Co., Ltd. (อันซันสาธารณรัฐเกาหลี)สกัดและทำให้บริสุทธิ์Lyophilized ใบไม้ (0.5 กรัม) มีพื้นเป็นเป็นผง และpoured เป็น 25 mL ของอควี 80% เมทานอล ส่วนผสมมี homogenized เป็นกลุ่มใช้ blender ฝากระจกโค้ง (เครื่องมือ Brinkman, Westbury, NY สหรัฐอเมริกา) ใน 5 นาทีที่อุณหภูมิห้องและบำบัดใน sonicator (100 W, 42 KHZ, Bransonic3510R-DTH แดนบิวรี CT สหรัฐอเมริกา) ใน 10 นาที การดึงข้อมูลถูกกรองผ่านตัวกรองแก้วภายใต้ความดันที่ลดลง และcentrifuged ที่ 4000g (SCT4B เครื่องหมุนเหวี่ยง ฮิตาชิ อิบารากิญี่ปุ่น) Supernatant ที่ถูกกรองผ่านเข็ม PTFEตัวกรอง (Titan, 0.45 lm, SMI แล็บฮัท Co., Ltd. Maisemoreสหราชอาณาจักร), และสารกรองถูกเก็บไว้ที่ 20 C จนถึงการวิเคราะห์LC/MS/MSทำการทดลอง LC/MS/MS ตามของเราก่อนหน้านี้รายงานวิธีการ [15] ยกเว้น494 S.W. จอง et alระบบตัวทำละลายและคอลัมน์ คอลัมน์เป็น CosmosilC18 (4.6 มม.· 250 มม. 3.5 lm, Nacalai, Inc., San DiegoCA, USA), และ constituents ระบบตัวทำละลาย0.1 กรดฟอร์มิกอควี% (A) และเมทานอล: น้ำ (6:4, v/vข. เงื่อนไขไล่ระดับของเฟสเคลื่อนที่ได้: จาก0% ถึง 10% B กว่า 10 นาที จาก 10% เป็น 100% B มากกว่า50 นาที และ elution isocratic คิดสำหรับ 10 นาทีทดลอง MS/MSได้ดำเนินการใช้ระบบกับดัก Q LC/MS/MS 3200(ใช้ Biosystems, Forster, CA, USA) กับ VTM เทอร์โบแหล่งที่มาและสเปรย์ไอออนเทอร์โบโพรบ (500 C) สเปกโตรมิเตอร์จำนวนมากถูกดำเนินในโหมดไอออนบวก และลบมีใช้ไนโตรเจนเป็นการ nebulizing เช่นเดียวกับก๊าซแห้งอัตราไหลในทั้งสองกรณีมี 45 psi แรงดันในเส้นเลือดฝอยตั้งที่ 5.5 kV และอุณหภูมิแหล่งถูกกำหนดที่ 500 ซีแจ้งมติ quadrupole แรก และที่สามอยู่ระหว่าง0.6 และ 0.8 (ความละเอียดหน่วย) ได้รับการบันทึกโดยรวมแรมสเป็คตราระหว่าง m/z 100 และ 1000 ขั้นตอนขนาดแม่น้ำอามู 0.1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการศึกษาปัจจุบันโพลีฟีนได้รับการพิจารณาและ profiled
ในใบผักกาดหอมในการตอบสนองต่อการเปลี่ยนแปลงในสภาพการเจริญเติบโตรวมทั้งอุณหภูมิในเวลากลางคืนและระยะเวลาของการเพาะปลูกเรือนกระจกโดยใช้ของเหลวโคควบคู่มวลสาร
(LC / MS / MS) และการวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (PCA) ลักษณะการใช้โพลีฟีน LC / MS / MS
เป็นประโยชน์เพราะมันไม่จำเป็นต้องมีการทำให้บริสุทธิ์กว้างขวางขั้นตอน
LC / MS / MS
เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพที่ให้ชัดเจนและรูปแบบส่วนลักษณะการระบุโรงงานโพลีฟีน
[14] ผลของเราจะเป็นประโยชน์ในการพัฒนาแนวทางการเพาะปลูกสำหรับการผลิตของสุขภาพประโยชน์ผักกาดหอมโพลีฟีนที่อุดมไปด้วย. the วัสดุและวิธีการวัสดุและสารเคมีผักกาดหอม(แอล sativa L. พันธุ์ Cheongchima) เมล็ดงอกในถาดปลั๊กเซลล์เต็มไปด้วย'Tosilee (Shinan Grow Co. , Jinju, สาธารณรัฐเกาหลี) สื่อเชิงพาณิชย์วันที่ 10 พฤษภาคม 2011 หลังจากสี่ใบถูกเปิดพวกเขาถูกย้ายไป9 ซมพลาสติกหม้อและปลูกในสามห้องกระจก(KGC-175 V, Koencon, Hanam สาธารณรัฐเกาหลี) มีอุณหภูมิวันที่22 องศาเซลเซียสและอุณหภูมิคืนวันที่ 4, 12, และ 20 องศาเซลเซียสจนกระทั่งเก็บเกี่ยว แสง 12 ชั่วโมงแสง / 12 ชั่วโมงที่มืดและถูกจัดให้โดยหลอด (ประมาณ 450 เมตร lmol-2 s-1). ความชื้นในอากาศญาติอยู่ที่ประมาณ 65% น้ำที่จัดเป็นประจำทุกวันผ่านทางชลประทานค่าใช้จ่ายและสารละลายธาตุอาหาร (Hoagland ค่า pH = 5.9 ± 0.2 EC = 1.2 mS ซม.? 1) ถูกจัดให้ทุก4 วัน ความหนาแน่นของพืชที่เป็นพืช 36 / m2 ในการรักษาแต่ละ พืชที่ได้รับการปรับปรุงใหม่ทุก 3 วันเพื่อลดตำแหน่งและ/ หรือผลกระทบที่ขอบในห้องกระจก ใบถูกล้างด้วยน้ำกลั่นแห้งและเก็บไว้ในที่มืดบรรจุภัณฑ์แก้วที่อุณหภูมิ-20 องศาเซลเซียสการวิเคราะห์ที่ค้างอยู่. กรด caffeic, เฟอรอลและ quercetin ถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานภายนอกหลังจาก recrystallization ในเอทานอล (Sigma-Aldrich จำกัด เซนต์หลุยส์ , MO, USA) ความบริสุทธิ์ของมาตรฐานทั้งหมดได้รับการยืนยันโดยวิธี HPLC เป็นอย่างน้อย 99% ตัวทำละลายและน้ำทั้งหมดที่ได้รับจาก Duksan บริสุทธิ์เคมิคอล จำกัด (Ansan, สาธารณรัฐเกาหลี). การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์แห้งใบ (0.5 กรัม) มาบดเป็นผงและเทลงใน25 มิลลิลิตรน้ำเมทานอล 80% ส่วนผสมที่ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้เครื่องปั่น Polytron (Brinkman เครื่องมือ Westbury, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) เป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้องและรับการรักษาในคลื่นเสียง(100 วัตต์, 42 เฮิร์ทซ์ Bransonic 3510R-DTH เบอรี, CT, USA) เป็นเวลา 10 นาที . สารสกัดถูกกรองผ่านตัวกรองแก้วภายใต้ความกดดันที่ลดลงและหมุนเหวี่ยงที่4000g (centrifuge SCT4B, ฮิตาชิ, อิบารากิ, ญี่ปุ่น) สารละลายที่ได้รับการกรองผ่านเข็มฉีดยา PTFE กรอง (ไททัน 0.45 ไมครอน, SMI? ฮัทแล็บ จำกัด Maisemore, สหราชอาณาจักร) และการกรองที่ถูกเก็บไว้ที่ 20 องศาเซลเซียสจนการวิเคราะห์. LC / MS / MS LC / MS / MS ทดลองได้ดำเนินการตามที่เราวิธีการรายงานก่อนหน้านี้[15] มีข้อยกเว้นของ494 SW จอง et al. คอลัมน์และระบบตัวทำละลาย คอลัมน์เป็น Cosmosil C18 (4.6 มม· 250 มิลลิเมตร 3.5 ไมครอน, Nacalai, Inc, San Diego, CA, USA) และองค์ประกอบของระบบตัวทำละลายเป็น0.1% น้ำกรด (A) และเมทานอล: น้ำ ( 6: 4, v / V, B) เงื่อนไขการไล่ระดับสีของเฟสเคลื่อนที่ได้จาก0% ถึง 10% B กว่า 10 นาทีจาก 10% ถึง 100% B มากกว่า50 นาทีและชะ isocratic เป็นเวลา 10 นาที MS / MS ทดลองได้รับการดำเนินการโดยใช้3200 Q TRAP LC / MS / MS ระบบ(Applied Biosystems, ฟอสเตอร์, CA, USA) กับเทอร์โบ VTM แหล่งที่มาและเทอร์โบไอออนสอบสวนสเปรย์ (500 องศาเซลเซียส) สเปกโตรมิเตอร์มวลดำเนินการในโหมดไอออนบวกและลบ. ไนโตรเจนถูกใช้เป็น nebulizing เช่นเดียวกับก๊าซอบแห้ง. อัตราการไหลในทั้งสองกรณีเป็น 45 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว แรงดันเส้นเลือดฝอยตั้งอยู่ที่ 5.5 กิโลโวลต์และอุณหภูมิของแหล่งที่มาตั้งอยู่ที่ 500 องศาเซลเซียส. แจ้งมติที่ quadrupole แรกและที่สามอยู่ระหว่าง0.6 และ 0.8 (ความละเอียดหน่วย) สเปกตรัมมวลที่ถูกบันทึกไว้ระหว่างม. / z 100 และ 1000 มีขนาด 0.1 ขั้นตอนของมวลอะตอม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการศึกษาวิเคราะห์ และโพลีฟีนอล ในใบผักกาดหอมเพื่อตอบสนองการเปลี่ยนแปลงในเงื่อนไขการเจริญเติบโต รวมทั้งในเวลากลางคืนอุณหภูมิและระยะเวลาของการเพาะปลูกเรือนกระจกใช้ liquid chromatography กันไป

Mass Spectrometry ( LC / MS / MS ) และการวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก ( PCA ) ปริมาณการใช้ LC / MS / MS คือ
ได้ประโยชน์ เพราะมันไม่ต้องใช้ขั้นตอนฟอก
อย่างละเอียด LC / MS / MS เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพที่ให้ชัดเจนและระบุลักษณะจำเพาะ
รูปแบบโรงงานโพลี
[ 14 ] ผลของเราจะเป็นประโยชน์ต่อการพัฒนาการปลูกแนวทาง
สำหรับการผลิตของสุขภาพที่เป็นประโยชน์ต่อวัสดุและวิธีการที่อุดมไปด้วยผักกาด

วัสดุและสารเคมี
ผักกาดหอม ( L . sativa L .cheongchima ) เมล็ดพันธุ์งอก
ในมือถือถาดที่เต็มไปด้วย tosilee เสียบ ' ' ( ชีนานเติบโต บริษัท จู
, เกาหลี ) สื่อเชิงพาณิชย์ เมื่อวันที่ 10 พฤษภาคม 2554 หลังจาก
4 ใบ ก็ถูกย้ายไป 9 เซนติเมตร ปลูกในกระถางพลาสติก
3 ห้องกระจก ( kgc-175 V ,
koencon Hanam , , เกาหลี ) กับอุณหภูมิวัน
22  C และกลางคืนอุณหภูมิ 4 , 12 และ 20  Cจนกระทั่งเก็บเกี่ยว แสง คือ แสง มืด และ 12-h 12-h โดยหลอด ( ประมาณ 450 lmol M – 2 – 1 S )
ความชื้นสัมพัทธ์ในอากาศอยู่ที่ประมาณ 65% น้ำให้ทุกวัน ผ่านทางค่าใช้จ่ายน้ำและสารละลายธาตุอาหาร ( โฮกเลิน , pH = 5.9 ± 0.2 , EC = 1.2 นางสาวซม.  1 ) คือให้
ทุกๆ 4 วัน พืชพืชความหนาแน่น 36 / M2 ในการรักษาแต่ละพืชที่ถูกจัดใหม่ทุก 3 วัน เพื่อลด
ตำแหน่งและ / หรือขอบผลในห้องกระจก ใบเป็น
ล้างด้วยน้ำกลั่น แห้ง และเก็บไว้ในภาชนะแก้วที่มืด
– 20  C รอการวิเคราะห์ .
Caffeic กรด เคมเฟอรอล และ quercetin ถูกใช้เป็นมาตรฐานภายนอกหลังจากการตกผลึกในเอทานอล ( Sigma ) ดิช
Co . , St . Louis , MO , USA )ความบริสุทธิ์ของมาตรฐานคือ
ยืนยันโดย HPLC เป็นอย่างน้อย 99% ตัวทำละลายและน้ำบริสุทธิ์ที่ได้จาก duksan
Chemical Co . , Ltd . (
Ansan , เกาหลีใต้ )

ใบแห้ง การสกัด และบำบัดน้ำเสีย ( 0.5 กรัม ) บดเป็นผง
เทลงใน 25 มิลลิลิตรของน้ำ 80% เมทานอล ส่วนผสม
เป็นโฮโมใช้ polytron เครื่องปั่น ( บริคแมนเครื่องมือ Westbury , นิวยอร์กสหรัฐอเมริกาเป็นเวลา 5 นาที
อุณหภูมิห้องและปฏิบัติในเครื่องเขย่าแบบเสียง ( 100 W 42 กิโล bransonic
3510r-dth Danbury CT , สหรัฐอเมริกา ) นาน 10 นาที สกัด
ถูกกรองผ่านกระจกกรองภายใต้การลดความดันและ
4000g ( ระดับที่ sct4b centrifuge , ฮิตาชิ , Ibaraki ,
ญี่ปุ่น ) และน่านถูกกรองผ่านตัวกรองเข็ม PTFE
( ไททัน 0.45 โดย SMI ,  แล็บ ฮัท จำกัด maisemore
, UK )และการกรองที่ถูกเก็บไว้ใน  20  C จนถึงการวิเคราะห์ .
LC / MS / MS / MS / MS
LC ทดสอบตามวิธีการของเรา
ก่อนหน้านี้รายงาน [ 15 ] ยกเว้น
494 S.W . จอง et al .
คอลัมน์และระบบตัวทำละลาย คอลัมน์เป็น cosmosil
c18 ( 4.6 มม. ด้วย 250 มม. , 3.5 โดย nacalai , Inc . , ซานดิเอโก้ ,
CA , USA ) และองค์ประกอบของระบบตัวทำละลายได้
01% สารละลายกรด ( ) และเมทานอล : น้ำ ( 6 : 4 V / V ,
b ) การไล่ระดับสีเงื่อนไขของเฟสเคลื่อนที่เป็น :
0 % 10 % B มากกว่า 10 นาที ตั้งแต่ 10% ถึง 100% B มากกว่า
50 นาที และใช้ MS / MS Isocratic เป็นเวลา 10 นาที ผลการทดลองการใช้ 3200 Q
LC / MS / MS กับดักระบบ
( Applied Biosystems ฟอสเตอร์ , , CA , USA ) กับ เทอร์โบ vtm
ที่มาและเทอร์โบไอออนสเปรย์โพรบ ( 500  C )มวลสเปก ดำเนินการในด้านบวกและด้านลบโหมดไอออน
ไนโตรเจนที่ใช้เป็น nebulizing เช่นเดียวกับการอบก๊าซ
อัตราการไหลในทั้งสองกรณี คือ 45 psi . C แรงดันไฟฟ้า
ตั้งไว้ที่ 5.5 กิโลโวลต์และแหล่งอุณหภูมิตั้งไว้ที่ 500  C .
มติของคำแรกและที่สามอยู่ระหว่าง
0.6 และ 0.8 ( ความละเอียดหน่วย ) มวลสเปกตรัมได้ถูกบันทึกไว้
ระหว่าง M / Z 100 และ 1000 ด้วยขั้นตอนขนาด 0.1 อามุ