2.5. Fermentation assayThe acidity

2.5. Fermentation assay

The acidity of the broth was measured by 0.1M NaOH with phenolphthalein as pH indicator. Ethanol was recorded by ALKOSENS on line producted by Frings Company. Oxygen concentration was determined with a Clark oxygen electrode using a 53YSI oxygen-meter (Contreras-Zentella et al., 2003).

3. Results and discussions
With the aim of optimum of semi-continuous vinegar fermentation, a series of trials were developed based on assays for flask cultivation and stability of dehydrogenase activity. Fermentation was improved through the dynamics analysis of fermentation process.

3.1. Setting of the initial acidity based on cell growth in different acid situations

As Fig. 2 showed, A. pasteurianus FS1, inoculated into the medium containing 30 g/l of acetic acid, adapted immediately and reached the highest biomass rapidly (7 × 108 cfu/ml). When the initial acidity increasing from 40 to 45 g/l, time of bacteria arriving the stationary phase was delayed and the maximal biomass was also lessened from 2 × 108 to 8 × 107 cfu/ml. It was obvious that trends of biomass (Fig. 2A) and acetification rate (Fig. 2B), increasing to the maximum value firstly and then decreasing to low level, were similar when initial acidity was below 50 g/l. Nevertheless, when seeds were inoculated into the media, whose original acidity were added from 50 to 70 g/l respectively, nearly no alcohol was oxidized after 5 days revealing by the survival status of bacteria in these media.

Although A. pasteurianus FS1 could not multiply when initial acidity was up to 50 g/l, they could still survive for 5 days in these surroundings. It was possible to explain that AAB kept a certain resistance to acetic acid by consuming energy which came from the maintance metabolism. While the biomass fell quickly and sharply when original acid concentration was 70 g/l, so this strain was sensitive to this acidity. Researchers had reported four major mechanisms (anion reduced system, acetic acid efflux pump, acetate assimilation mechanism and general stress response protein) which account for acetic acid resistance of AAB ( Nakano et al., 2004, Nakano et al., 2006, Nakano and Fukaya, 2008, Matsushita et al., 2005 and Okamoto-Kainuma et al., 2002). These mechanisms might illustrate why AAB could survive at severe acidity condition. However, the bacterial resistance to acetic acid was limited. In order to ferment smoothly the acidity of the starting media in subsequent semi-continuous trials should be below 50 g/l.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. หมัก assayความเป็นกรดของน้ำซุปโดยวัดจาก 0.1 M NaOH กับ phenolphthalein เป็นบ่งชี้ค่า pH เอทานอลถูกบันทึก โดย ALKOSENS ในบรรทัดที่ producted โดย บริษัท Frings พิจารณาความเข้มข้นของออกซิเจนกับอิเล็กโทรดออกซิเจนคลาร์กใช้เครื่อง 53YSI ออกซิเจนวัด (Contreras-Zentella et al. 2003)3. ผลการอภิปรายมีเป้าหมายสูงสุดของการหมักน้ำส้มสายชูกึ่งต่อเนื่อง ชุดของการทดลองพัฒนาขึ้นจาก assays ขวดเพาะและเสถียรภาพของกิจกรรมพร่อง หมักได้ดีขึ้นผ่านการวิเคราะห์ dynamics ของกระบวนการหมัก3.1. การตั้งค่าของการเริ่มต้นตามการเติบโตของเซลล์ในสถานการณ์ต่าง ๆ กรดรูป 2 แสดงให้เห็น A. pasteurianus FS1, inoculated เป็นสื่อที่ประกอบด้วย 30 แยกกรดอะซิติก ดัดแปลงทันที และถึงชีวมวลสูงสุดอย่างรวดเร็ว (7 × 108 cfu/ml) เมื่อเริ่มต้นเป็นกรดเพิ่มขึ้นจาก 40 ถึง 45 g/l เวลาของแบคทีเรียมาเขียนในขั้นตอนล่าช้า และชีวมวลสูงสุดถูกลดลงจาก 2 × 108 8 × 107 cfu/ml นอกจากนี้ยัง มันเป็นสิ่งที่ชัดเจนว่า แนวโน้มของชีวมวล (รูป 2A) และ acetification ราคา (รูปที่ 2B), เพิ่มค่าสูงสุดประการแรก และจากนั้น ลดระดับต่ำ มีคล้ายเมื่อกรดเริ่มต้นได้ต่ำกว่า 50 g/l อย่างไรก็ตาม เมื่อเมล็ดถูก inoculated ในสื่อ กรดที่เดิมเพิ่มจาก 50 70 g/l ตามลำดับ เกือบไม่มีแอลกอฮอล์ถูกออกซิไดซ์หลังจาก 5 วันให้เปิดเผยข้อมูลตามสถานะการอยู่รอดของแบคทีเรียในสื่อเหล่านี้แม้ว่าอ. pasteurianus FS1 สามารถคูณเมื่อชิมครั้งแรก 50 g/l พวกเขาอาจยังคงอยู่รอด 5 วันในสภาพแวดล้อมเหล่านี้ มันเป็นไปได้ที่จะอธิบายว่า AAB เก็บความบางความต้านทานต่อกรดอะซิติก โดยใช้พลังงานที่มาจากการเผาผลาญบำรุงรักษา ใน ขณะที่ชีวมวลลดลงอย่างรวดเร็ว และคมชัดเมื่อความเข้มข้นกรดเดิม 70 g/l ดังนั้นสายพันธุ์นี้คือไวต่อกรดนี้ นักวิจัยได้รายงานสี่หลักกลไก (ไอออนลดลงระบบ กรดอะซิติก efflux ปั๊ม กลไกการดูดซึมอะซิเตท และโปรตีนตอบสนองความเครียดทั่วไป) ซึ่งทนต่อกรดอะซิติกของ AAB (Nakano et al. 2004 นากาโนะ et al. 2006 นากาโนะและเกะฮอนจิน 2008 ชิตะ et al. 2005 และโอ Kainuma et al. 2002) กลไกเหล่านี้อาจแสดงให้เห็นถึงเหตุผล AAB สามารถอยู่รอดในสภาพเป็นกรดอย่างรุนแรง อย่างไรก็ตาม ความต้านทานต่อเชื้อแบคทีเรียกรดอะซิติกถูกจำกัด เพื่อหมักได้อย่างราบรื่น กรดของสื่อเริ่มต้นในการทดลองกึ่งต่อเนื่องที่ตามมาควรจะต่ำกว่า 50 g/l

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การหมักการทดสอบ

ความเป็นกรดของน้ำซุปโดยวัดจาก 0.1M NaOH กับ phenolphthalein เป็นตัวชี้วัดความเป็นกรดด่าง เอทานอลถูกบันทึกไว้โดย ALKOSENS ในบรรทัด producted โดย บริษัท Frings ความเข้มข้นของออกซิเจนที่ถูกกำหนดด้วยออกซิเจนอิเล็กโทรดคลาร์กโดยใช้ออกซิเจน 53YSI เมตร (Contreras-Zentella et al., 2003).

3 ผลการค้นหาและการอภิปราย
โดยมีวัตถุประสงค์ที่ดีที่สุดของการหมักน้ำส้มสายชูกึ่งต่อเนื่องเป็นชุดของการทดลองได้รับการพัฒนาบนพื้นฐานของการวิเคราะห์สำหรับการเพาะปลูกขวดและความมั่นคงของกิจกรรม dehydrogenase การหมักได้ดีขึ้นผ่านการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงของกระบวนการหมัก.

3.1 การตั้งค่าความเป็นกรดเริ่มต้นขึ้นอยู่กับการเจริญเติบโตของเซลล์ในสถานการณ์ที่แตกต่างกันของกรด

ในฐานะที่เป็นรูป 2 แสดงให้เห็นว่าเอเชื้อที่ FS1 เชื้อเข้ากลางมี 30 g / l ของกรดอะซิติกที่ดัดแปลงมาทันทีและถึงชีวมวลสูงสุดอย่างรวดเร็ว (7 × 108 CFU / ml) เมื่อเริ่มต้นความเป็นกรดเพิ่มขึ้น 40-45 g / l เวลาของเชื้อแบคทีเรียที่เดินทางมาถึงเฟสล่าช้าและชีวมวลสูงสุดก็ยังลดลงจาก 2 × 108-8 × 107 CFU / ml มันเป็นที่ชัดเจนว่าแนวโน้มของชีวมวล (รูป. 2A) และอัตรา acetification (รูป. 2B) เพิ่มขึ้นเป็นค่าสูงสุดแรกและจากนั้นลดลงถึงระดับต่ำมีความคล้ายคลึงกันเมื่อความเป็นกรดเริ่มต้นต่ำกว่า 50 กรัม / ลิตร แต่เมื่อถูกเชื้อเมล็ดลงในสื่อที่มีความเป็นกรดเดิมถูกเพิ่ม 50-70 กรัม / ลิตรตามลำดับเกือบไม่มีเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ถูกออกซิไดซ์หลังวันที่ 5 เปิดเผยโดยสถานะการอยู่รอดของแบคทีเรียในสื่อเหล่านี้.

แม้ว่า A. เชื้อที่ FS1 ไม่สามารถ คูณเมื่อความเป็นกรดเป็นครั้งแรกถึง 50 g / l พวกเขายังคงสามารถอยู่รอดเป็นเวลา 5 วันในสภาพแวดล้อมเหล่านี้ มันเป็นไปได้ที่จะอธิบายว่า AAB เก็บบางอย่างที่จะต้านทานกรดอะซิติกโดยการบริโภคพลังงานที่มาจากการเผาผลาญอาหารบำรุงรักษา ในขณะที่ชีวมวลลดลงได้อย่างรวดเร็วและอย่างรวดเร็วเมื่อความเข้มข้นของกรดเดิมคือ 70 กรัม / ลิตรดังนั้นสายพันธุ์นี้คือมีความไวต่อความเป็นกรดนี้ นักวิจัยได้รายงานสี่กลไกสำคัญ (ไอออนลดลงระบบกรดปั๊มไหลอะซิติกกลไกการดูดซึมอะซิเตทและโปรตีนตอบสนองต่อความเครียดทั่วไป) ซึ่งบัญชีสำหรับต้านทานกรดอะซิติกของ AAB (Nakano et al., 2004 Nakano et al., 2006 Nakano และ Fukaya 2008 Matsushita et al., ปี 2005 และ Okamoto-Kainuma et al., 2002) กลไกเหล่านี้อาจแสดงให้เห็นว่าทำไม AAB สามารถอยู่รอดได้ในสภาพความเป็นกรดอย่างรุนแรง อย่างไรก็ตามการต้านทานแบคทีเรียกรดอะซิติกถูก จำกัด เพื่อที่จะหมักได้อย่างราบรื่นความเป็นกรดของสื่อเริ่มต้นในการทดลองแบบกึ่งต่อเนื่องที่ตามมาควรจะต่ำกว่า 50 กรัม / ลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 โดยการหมักความเป็นกรดของน้ำซุปได้ 0.1m NaOH กับฟีนอล์ฟทาลีน เป็นตัวชี้วัด PH ซึ่งถูกบันทึกไว้โดย alkosens บนเส้นได้โดย บริษัท ฟริงส์ . ความเข้มข้นของออกซิเจนก็ตั้งใจกับคล้ากออกซิเจนไฟฟ้าใช้ 53ysi ออกซิเจนเครื่องวัด ( Contreras zentella et al . , 2003 )3 . ผลและการอภิปรายด้วยจุดมุ่งหมายสูงสุดของกึ่งต่อเนื่องน้ำส้มสายชูหมัก , ชุดของการทดลองที่ถูกพัฒนาขึ้นจากการใช้ขวดและเสถียรภาพของกิจกรรมเอนไซม์ . การหมักได้ดีขึ้นผ่านการวิเคราะห์พลศาสตร์ของกระบวนการหมัก3.1 . การตั้งค่าเริ่มต้นของกรดจากการเติบโตของเซลล์ที่แตกต่างกันในสถานการณ์ที่กรดเป็นรูปที่ 2 พบ อ. pasteurianus ผลึก , อาหารที่มีเชื้อ 30 กรัม / ลิตรของกรดปรับทันที และถึงมวลชีวภาพสูงสุดอย่างรวดเร็ว ( 7 × 108 CFU / ml ) เมื่อปริมาณกรดเริ่มต้นเพิ่มขึ้นจาก 40 ถึง 45 กรัม / ลิตร เวลาของแบคทีเรียมาถึงเฟสอยู่กับที่ล่าช้าและมวลชีวภาพสูงสุดก็ลดลงจาก 2 × 108 8 × 107 CFU / ml มันชัดเจนว่าแนวโน้มของชีวมวล ( รูปที่ 2A ) และอัตรา acetification ( รูปที่ 2B ) , การเพิ่มมูลค่าสูงสุด เดิมทีแล้วลดระดับต่ำ มีลักษณะคล้ายคลึงกัน เมื่อเริ่มต้นความเป็นกรดต่ำกว่า 50 กรัม / ลิตร อย่างไรก็ตาม เมื่อเมล็ดเชื้อสื่อที่มีความเป็นกรดเพิ่มจากเดิม 50 70 g / l ตามลำดับ เกือบไม่มีเหล้าก็จะถูกออกซิไดซ์ได้หลังจาก 5 วันเปิดเผยโดยสถานะการอยู่รอดของแบคทีเรียในสื่อเหล่านี้ถึงแม้ว่า . . ผลึก pasteurianus ไม่สามารถคูณเมื่อเริ่มต้นเมขึ้นเป็น 50 กรัมต่อลิตร พวกเขายังคงสามารถอยู่รอดเป็นเวลา 5 วัน ในสภาพแวดล้อมเหล่านี้ มันเป็นไปได้ที่จะอธิบายว่า แอ๊บไว้ต้านทานบางกรดอะซิติก โดยการบริโภคพลังงานที่มาจาก maintance การเผาผลาญอาหาร ในขณะที่ปริมาณลดลงอย่างรวดเร็ว และอย่างรวดเร็วเมื่อเดิมกรดความเข้มข้น 70 กรัม / ลิตร ดังนั้น เชื้อนี้มีความไวต่อปริมาณกรดนี้ นักวิจัยได้รายงานกลไกหลักสี่ ( ไอออนลดระบบการปั๊มกรดอะมิโนและโปรตีนน้ำนมทั่วไป กลไกการตอบสนองต่อความเครียด ) ซึ่งบัญชีสำหรับต้านทานกรดของ AAB ( นากาโนะ et al . , 2004 , นากาโนะ et al . , 2006 , นากาโนะ และ fukaya 2008 , Matsushita et al . , 2005 และโอคาโมโตะ kainuma และ al . , 2002 ) กลไกเหล่านี้อาจแสดงถึงภาวะความเป็นกรดที่ AAB จะรอดจากรุนแรง อย่างไรก็ตาม การต้านทานแบคทีเรียกรดอะซิติกมีจำกัด เพื่อหมักได้อย่างราบรื่นความเป็นกรดของสื่อกึ่งต่อเนื่องที่ตามมาเริ่มการทดลองควรจะต่ำกว่า 50 กรัม / ลิตร