Amino acids and biogenic amines in

Amino acids and biogenic amines in the samples were extracted as
originally described by Simon-Sarkadi and Holzapfel (1994), and later
improved by Rabie, Siliha, el-Saidy, el-Badawy, and Malcata (2010)
for meat matrices: 10 ml of 10 %(v/v) trichloroacetic acid was
added to 3 g of sample, the mixture was shaken for 1 h using a
Laboshake Ls 500i (Gerhardt, Germany), and the extract was finally
filtered through Whatman No.1 filter paper. To remove fat, the
extracts were kept at −20 °C for 1 d, and then subjected to centrifugation
at 7000 g for 15 min using a T 24 apparatus (MLW). The
supernatant was finally collected and filtered through 0.25 μm
membrane filters (Nalgene, USA).
2.4. Quantitation of amino acids and biogenic amines
Analyses of free amino acids and biogenic amines were performed
using an AAA 400amino acid analyser (Ingos, Czech Republic) equipped
with a Watrex Polymer 8 ion exchange column (20 cm long, 3.7 mm
i.d.) for amino acids, and an Ostion LG ANB ion exchange column
(6 cm long, 3.7 mm i.d.) for biogenic amines. Free amino acids and
biogenic amines in 100 μL-aliquots were injected into said column,
and separated by stepwise gradient elution at 0.30 mL/min (60 °C),
using a Li+ buffer for amino acids and a Na+/K+ buffer for biogenic
amines – prepared as described in detail by Csomos and Simon-Sarkadi
(2002); the total running timeswere 92 and 101 min, respectively. Colorimetric
detection was accomplished at 570 and 440 nm, for amino acids
and biogenic amines, after post column derivatization (121 °C) with ninhydrin,
supplied at 0.20 mL/min (Csomos & Simon-Sarkadi, 2002). All
analytical determinations were done in triplicate (free amino acids) and
duplicate (biogenic amines).
Identification was by matching of retention times of aliquots of
actual samples and chromatographic standards,whereas quantification
was by peak area based on calibration curves previously prepared using
chromatographic standards.
2.5. Statistical analyses
All experimental values pertaining to biogenic amine and amino
acid concentrations were reported as average ± standard deviation
of three replicates. Statistical significance of the differences found
between data was ascertained via Student's t-tests; a probability
value, P, of less than 5% was considered as statistically significant.
The statistical software utilized was SPSS (from SPSS Inc., Chicago IL,
USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กรดอะมิโนและ biogenic amines ในตัวอย่างถูกสกัดเป็นเดิม อธิบายโดย Simon Sarkadi Holzapfel (1994), และในภายหลังปรับปรุง โดย Rabie, Siliha เอ Saidy เอ Badawy และ Malcata (2010)สำหรับเมทริกซ์เนื้อ: มี 10 ml ของกรด trichloroacetic %(v/v) 10เพิ่ม g 3 ของตัวอย่าง ส่วนผสมถูกเขย่าสำหรับ 1 h โดยใช้แบบLaboshake Ls 500i (Gerhardt เยอรมนี), และสารสกัดได้ในที่สุดกรองโดยใช้กระดาษกรอง Whatman No.1 เอาไขมัน การบางส่วนถูกเก็บไว้ที่ −20 ° C สำหรับ 1 d แล้ว ต้อง centrifugationที่ g 7000 สำหรับ 15 นาทีใช้เครื่อง T 24 (MLW) ที่supernatant ถูกรวบรวม และกรองผ่าน 0.25 μmตัวกรองเมมเบรน (Nalgene สหรัฐอเมริกา)2.4 การวิเคราะห์หาปริมาณกรดอะมิโนและ biogenic aminesได้ดำเนินการวิเคราะห์ของ biogenic amines และกรดอะมิโนอิสระใช้เป็น AAA 400amino กรด analyser (Ingos สาธารณรัฐเช็ก) พร้อมมีคอลัมน์การแลกเปลี่ยนไอออน Watrex เมอร์ 8 (ยาว 20 ซม. 3.7 มม.ประชาชน) กรดอะมิโน และคอลัมน์ที่มีการแลกเปลี่ยนไอออน Ostion LG ANB(6 ซมยาว 3.7 มม.ประชาชน) สำหรับ biogenic amines กรดอะมิโนอิสระ และbiogenic amines ใน 100 μL-aliquots ถูกฉีดเข้าไปในคอลัมน์ดังกล่าวและแยก โดย elution stepwise ไล่ระดับที่ 0.30 mL/min (60 ° C),ใช้ Li + บัฟเฟอร์กรดอะมิโนและการนา + /mts K + บัฟเฟอร์สำหรับ biogenicamines เตรียมตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดทาง Csomos Simon Sarkadi(2002); รวมรัน timeswere 92 และ 101 นาที ตามลำดับ เทียบเคียงตรวจสอบไม่สำเร็จที่ 570 และ 440 nm สำหรับกรดอะมิโนและ biogenic amines หลังจากลงคอลัมน์ derivatization (121 ° C) กับ ninhydrinจัดที่ 0.20 mL/min (Csomos & Simon Sarkadi, 2002) ทั้งหมดdeterminations วิเคราะห์ทำใน triplicate (กรดอะมิโนอิสระ) และซ้ำ (biogenic amines)ระบุได้ โดยการจับคู่ของเวลารักษา aliquots ของตัวอย่างที่เกิดขึ้นจริงและมาตรฐาน chromatographic ในขณะที่นับได้ตามตามเส้นโค้งเทียบก่อนหน้านี้ เตรียมใช้พื้นที่สูงสุดมาตรฐาน chromatographic2.5. สถิติวิเคราะห์ค่าทดลองทั้งหมดที่เกี่ยวข้อง กับ biogenic amine และอะมิโนความเข้มข้นกรดมีรายงานเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของเหมือนกับสาม นัยสำคัญทางสถิติของการพบความแตกต่างระหว่างที่ข้อมูลถูก ascertained ผ่าน t-ทดสอบของนักเรียน ความน่าเป็นค่า P น้อยกว่า 5% ถูกพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติที่ใช้ซอฟต์แวร์ทางสถิติคือ โปรแกรม (จากโปรแกรม Inc. ชิคาโก ILสหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กรดอะมิโนและไบโอจีเอมีนในตัวอย่างถูกสกัดเป็น
อธิบายไว้เดิมโดย Simon-Sarkadi และ Holzapfel (1994) และต่อมา
ปรับปรุงโดย Rabie, Siliha เอล-Saidy เอล-Badawy และ Malcata (2010)
สำหรับการฝึกอบรมเนื้อ: 10 มล. 10% (v / v) กรดไตรคลอโรได้รับ
เพิ่มถึง 3 กรัมของตัวอย่างผสมถูกเขย่าเป็นเวลา 1 ชั่วโมงโดยใช้
Laboshake Ls 500i (Gerhardt เยอรมนี) และสารสกัดในที่สุดก็
กรองผ่านกระดาษกรอง 1 Whatman ในการลบไขมัน
สารสกัดถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 วันและจากนั้นภายใต้การหมุนเหวี่ยง
ที่ 7,000 กรัมเป็นเวลา 15 นาทีโดยใช้ T 24 เครื่อง (MLW)
ใสในที่สุดก็ถูกเก็บรวบรวมและกรองผ่าน 0.25 ไมครอน
กรองเมมเบรน (Nalgene สหรัฐอเมริกา).
2.4 ปริมาณของกรดอะมิโนและไบโอจีเอมีน
การวิเคราะห์ของกรดอะมิโนอิสระและไบโอจีเอมีนได้ดำเนินการ
โดยใช้การวิเคราะห์กรด 400amino AAA (INGOs, สาธารณรัฐเช็ก) การติดตั้ง
กับพอลิเมอ Watrex 8 คอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออน (20 ซม. ยาว 3.7 มม
รหัส) ให้กรดอะมิโน และ Ostion LG ANB คอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออน
(6 ซม. ยาว 3.7 มมรหัส) สำหรับไบโอจีเอมีน กรดอะมิโนฟรีและ
เอมีนไบโอจี 100 ไมโครลิตร aliquots ถูกฉีดเข้าไปในคอลัมน์กล่าว
และแยกจากกันโดยชะลาดแบบขั้นตอนที่ 0.30 มิลลิลิตร / นาที (60 ° C)
โดยใช้บัฟเฟอร์ + หลี่กรดอะมิโนและนา k + + / buffer สำหรับไบโอจี
เอมีน - จัดทำตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดโดย Csomos และไซมอน-Sarkadi
(2002); การทำงานทั้งหมด timeswere 92 และ 101 นาทีตามลำดับ สี
การตรวจสอบก็ประสบความสำเร็จที่ 570 และ 440 นาโนเมตรสำหรับกรดอะมิโน
เอมีนและไบโอจีหลังจากที่โพสต์คอลัมน์อนุพันธ์ (121 ° C) กับ ninhydrin,
จัดจำหน่ายที่ 0.20 มิลลิลิตร / นาที (Csomos และ Simon-Sarkadi, 2002) ทั้งหมด
หาความวิเคราะห์ได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่า (กรดอะมิโนอิสระ) และ
ทำซ้ำ (ไบโอจีเอมีน).
บัตรประจำตัวเป็นโดยการจับคู่ครั้งการเก็บรักษา aliquots ของ
ตัวอย่างที่เกิดขึ้นจริงและมาตรฐานโครมาขณะที่ปริมาณ
เป็นพื้นที่ยอดเขาที่อยู่บนพื้นฐานของเส้นโค้งการสอบเทียบก่อนหน้านี้เตรียมใช้
มาตรฐานสาร .
2.5 สถิติการวิเคราะห์
ค่าการทดลองทั้งหมดที่เกี่ยวข้องกับเอมีนและไบโอจีอะมิโนที่
ความเข้มข้นของกรดได้รับรายงานว่าค่าเฉลี่ย±ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน
ของสามซ้ำ อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติของความแตกต่างที่พบ
ระหว่างการตรวจสอบข้อมูลที่ได้รับผ่านทางนักศึกษาเสื้อทดสอบ; ความน่าจะเป็น
ค่า P, น้อยกว่า 5% ได้รับการพิจารณาเป็นนัยสำคัญทางสถิติ.
ซอฟต์แวร์ทางสถิติใช้เป็นโปรแกรม SPSS (จาก SPSS อิงค์ชิคาโกอิลลินอยส์
สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กรดอะมิโนและเอมีนในตัวอย่างที่เป็นอธิบายโดยไซมอน sarkadi
เดิม และ holzapfel ( 1994 ) และต่อมา
ปรับปรุงโดย rabie siliha , เอล saidy เอล badawy และ malcata ( 2010 )
สำหรับเมทริกซ์เนื้อ : 10 ml 10% ( v / v ) กรดไตรคลอโรอะซิติกถูก
เพิ่ม 3 จี ของตัวอย่าง ส่วนผสมที่ถูกเขย่าเป็นเวลา 1 ชั่วโมง โดยใช้
laboshake LS 500i ( เกอฮาร์ต , เยอรมัน ) , และสารสกัดจาก
ในที่สุดwhatman 1 กรองผ่านกระดาษกรอง กำจัดไขมัน , สารสกัดไว้
ที่ 20 ° C − 1 D , และจากนั้นต้องปั่น
7 , 000 G 15 นาทีโดยใช้เครื่องมือ T 24 ( MLW )
น่านก็รวบรวม และกรองผ่านเยื่อกรอง 0.25 μ M
( นาลจีน , USA ) .
2.4 . เซลล์ของกรดอะมิโนและเอมีน
การวิเคราะห์กรดอะมิโนฟรีและเอมีนจำนวน
ใช้ AAA 400amino กรด วิเคราะห์ ( ingos , สาธารณรัฐเช็ก ) ติดตั้ง
กับคอลัมน์ watrex พอลิเมอร์ 8 แลกเปลี่ยนไอออน ( 20 เซนติเมตร ยาว 3.7 มม.
ไอดี ) กรดอะมิโน และคอลัมน์ ostion LG anb แลกเปลี่ยนไอออน
( 6 เซนติเมตร ยาว 3.7 มิลลิเมตร ไอดี ) สำหรับองค์รวม . กรดอะมิโนอิสระและ
เอมีนใน 100 μ l-aliquots ถูกฉีดเข้าไปในคอลัมน์
แยก ( แบบไล่ระดับที่ 3 มล. / นาที ( 60 องศา C )
ใช้บัฟเฟอร์ลี่สำหรับกรดอะมิโนและ Na / K buffer สำหรับ biogenic amines )
เตรียมตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดโดย csomos และไซมอน sarkadi
( 2002 ) ; ทั้งหมดวิ่ง timeswere 92 และ 101 นาที ตามลำดับ 7.4
ตรวจจับได้และ 440 ที่ 570 นาโนเมตรสำหรับ
เอมีนและกรดอะมิโน ,หลังจากโพสต์กับคอลัมน์ ( 121 ° C ) กับ ninhydrin
จัด , ที่ 0.20 มล. / นาที ( csomos &ไซมอน sarkadi , 2002 ) รวมทั้งวิเคราะห์ทั้งหมด
เสร็จทั้งสามใบ ( กรดอะมิโน ) และ

ซ้ำ ( องค์รวม ) จำแนกได้โดยการจับคู่ในเวลาจริงและมาตรฐานของตัวอย่างเฉยๆ

และ ในขณะที่ปริมาณโดยพื้นที่พีคตามเส้นโค้งสอบเทียบก่อนหน้านี้เตรียมใช้มาตรฐานและ
.
2.5 สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์
ทั้งหมดเกี่ยวกับ biogenic amine โดยใช้ค่าความเข้มข้นกรดอะมิโน
รายงานเป็นค่าเฉลี่ยส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน±
3 ได้แก่ นัยสำคัญของความแตกต่างระหว่างการพบ
ข้อมูลผ่านนักเรียนจำนวน ; ความน่าจะเป็น
ค่า Pน้อยกว่า 5% ถือว่าเป็นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ สถิติที่ใช้ คือ ใช้โปรแกรมซอฟต์แวร์
( จากโปรแกรม SPSS Inc ชิคาโกอิลลินอยส์ ,
สหรัฐอเมริกา )