Algal strains were acquired from the University of Texas Culture Collection.
UTEX strains B25, B31, 249, 256, and 264, all C. protothecoides,
were included in this study. Algal purification of strain B25 required sequentially
streaking single colony isolates onto water agar medium
until isolates free of bacterial contamination were obtained. Algal colonies
from the original B31 stock grew preferentially over the bacterial
contaminant on papaya heterotrophic growth medium, and a
bacteria-free isolate was maintained. Strains 249, 256, and 264 were
supplied as axenic cultures from UTEX. P1 agar medium, a modification
of Bristol medium [18] supplemented with 12.5% clarified juice from
Hawaii Rainbow Papaya and 1.5% agar and adjusted to pH 6.5 with
NaOH was used for the maintenance of all strains. Inoculum cultures
were prepared by inoculation of a single colony into 50 ml liquid P1 medium
in Erlenmeyer flasks, and shaken at 200 RPM, 25 °C, for 4–5 days
until cell density saturated. Inoculum cultures were diluted between
1:1000 and 1:10,000 for inoculation of each experiment. Supplemental
lighting was not used; flasks were exposed to ambient laboratory lighting,
and agar plates (for strain maintenance) were kept in a dark 25 °C
incubator.
สายพันธุ์ algal ได้รับมาจากการรวบรวมวัฒนธรรมของมหาวิทยาลัยเทกซัสUTEX สายพันธุ์ B25, B31, 249, 256 และ 264, protothecoides ซีทั้งหมดถูกรวมในการศึกษานี้ ฟอก algal ของต้องใช้ B25 ต้องตามลำดับแยกโคโลนีเดี่ยว streaking ลงกลางน้ำ agarจนแยกไม่ปนเปื้อนเชื้อแบคทีเรีย ได้รับ อาณานิคม algalจาก B31 เดิม หุ้นเติบโตขึ้นก่อนกว่าแบคทีเรียสารปนเปื้อนในมะละกอ heterotrophic เชื้อ และมีรักษาปราศจากแบคทีเรียที่แยก สายพันธุ์ 249, 256 และ 264 ได้กำหนดให้เป็นวัฒนธรรม axenic จาก UTEX P1 agar กลาง การปรับเปลี่ยนของบริ กลาง [18] เสริม ด้วย 12.5% ขึ้น้ำจากAgar มะละกอเรนโบว์ฮาวายและ 1.5% และปรับ pH 6.5 กับNaOH ที่ใช้ในการบำรุงรักษาสายพันธุ์ทั้งหมด วัฒนธรรม inoculumถูกเตรียม โดย inoculation ของโคโลนีเดี่ยวเป็นการ P1 50 มล.ของเหลวปานกลางใน Erlenmeyer น้ำ และเขย่าที่ 200 รอบต่อนาที ได้ 25 ° C, 4 – 5 วันจนกระทั่งความหนาแน่นเซลล์ที่อิ่มตัว Inoculum วัฒนธรรมถูกผสมระหว่าง1:1000 และ 1:10,000 สำหรับ inoculation ทดลองแต่ละ เพิ่มเติมไม่ใช้แสง น้ำที่สัมผัสกับแสงแวดล้อมห้องปฏิบัติการและแผ่น agar (การบำรุงรักษาต้องใช้) ที่ถูกเก็บไว้ในมืด 25 ° Cบ่มเพาะวิสาหกิจ
การแปล กรุณารอสักครู่..

สาหร่ายสายพันธุ์ที่ได้มาจากมหาวิทยาลัยเท็กซัสวัฒนธรรมการเก็บ.
UTEX สายพันธุ์ B25, B31, 249, 256 และ 264 ทั้งหมด protothecoides
ซีถูกรวมอยู่ในการศึกษาครั้งนี้ การทำให้บริสุทธิ์สาหร่ายสายพันธุ์ B25 ต้องตามลำดับพุ่งอาณานิคมเดียวแยกบนอาหารเลี้ยงเชื้อกลางน้ำจนถึงแยกอิสระจากการปนเปื้อนของเชื้อแบคทีเรียที่ได้รับ อาณานิคมสาหร่ายจากสต็อก B31 เดิมเติบโตพิเศษกว่าแบคทีเรียปนเปื้อนในสื่อการเจริญเติบโตของมะละกอheterotrophic และแยกเชื้อแบคทีเรียฟรีถูกเก็บรักษาไว้ สายพันธุ์ 249, 256 และ 264 ถูกจัดเป็นวัฒนธรรมaxenic จาก UTEX P1 กลางวุ้น, การปรับเปลี่ยนของกลางบริสตอ[18] เสริมด้วยน้ำผลไม้ชี้แจง 12.5% จากฮาวายสายรุ้งมะละกอและวุ้น 1.5% และปรับค่าพีเอช 6.5 ด้วย NaOH ถูกนำมาใช้สำหรับการบำรุงรักษาสายพันธุ์ทั้งหมด วัฒนธรรมหัวเชื้อที่ถูกจัดทำขึ้นโดยการฉีดวัคซีนของอาณานิคมเดียวใน 50 มลกลาง P1 ของเหลวในขวดErlenmeyer และเขย่าที่ 200 รอบต่อนาที, 25 ° C สำหรับ 4-5 วันจนกว่าจะมีความหนาแน่นของเซลล์อิ่มตัว วัฒนธรรมเชื้อเจือจางระหว่าง1: 1,000 และ 1: 10,000 ของการทดลองฉีดวัคซีนแต่ละ เสริมแสงไม่ได้ใช้; ขวดได้สัมผัสกับแสงล้อมรอบห้องปฏิบัติการและแผ่นวุ้น (สำหรับการบำรุงรักษาสายพันธุ์) ที่ถูกเก็บไว้ในที่มืด 25 ° C ศูนย์บ่มเพาะ
การแปล กรุณารอสักครู่..

สายพันธุ์สาหร่าย ได้มาจากมหาวิทยาลัยคอลเลกชันวัฒนธรรมเท็กซัส
utex สายพันธุ์ b25 B31 , 249 , 256 , 264 , protothecoides C ,
ถูกรวมอยู่ในการศึกษา สาหร่ายบริสุทธิ์จาก b25 เมื่อยต้องพิจารณา
streaking อาณานิคมเดียวแยกลงกลางน้ำ จนกระทั่งเชื้อวุ้น
ฟรี การปนเปื้อนของแบคทีเรียได้ อาณานิคม
สาหร่ายจากเดิมที่เติบโต preferentially มากกว่าหุ้น B31 ปนเปื้อนแบคทีเรียบนอาหารเลี้ยงเชื้อแบบมะละกอ
แบคทีเรียไอโซเลทและฟรีถูกเก็บรักษาไว้ จำนวน 249 , 256 , 264 )
ให้มาเป็น axenic วัฒนธรรมจาก utex . P1 วุ้นขนาดกลาง , การปรับเปลี่ยน
Bristol ขนาดกลาง [ 18 ] เสริม 12.5% มีน้ำผลไม้จาก
ฮาวายสีรุ้งมะละกอและ 1.5% วุ้น และปรับ pH 6.5 กับ
NaOH ที่ใช้สำหรับการบำรุงรักษาของทุกสายพันธุ์ โดยวัฒนธรรม
เตรียมจากเชื้อกลุ่มเดียวใน 50 ml P1
อาหารเหลวในเออร์เลนเมเยอร์ขวดและเขย่า 200 รอบต่อนาทีที่ 25 ° C เป็นเวลา 4 - 5 วัน
จนถึงความหนาแน่นเซลล์อิ่มตัว โดยวัฒนธรรมและลดระหว่าง
000 1:10000 สำหรับเชื้อแต่ละ การทดลอง เสริมแสงสว่าง
ไม่ได้ใช้ขวดมีการเปิดรับแสงห้องปฏิบัติการ
และวุ้นแผ่น ( เพื่อรักษาสายพันธุ์ ) ถูกเก็บไว้ในที่มืด 25 ° C
ตู้ฟักไข่
การแปล กรุณารอสักครู่..
