Water samples were taken from four

Water samples were taken from four lakes of the Province of Vojvodina (northern Serbia): Provala Lake,Ludas Lake (two sampling sites), Zobnatica and Palic lakes on June 1, and October 1, 2008. The location and coordinates of sampling sites are shown in Fig. 1. The geographic coordinates are: 45°24’ N, 019°05’ E for Provala, 46°06’ N, 019°49’ E for Ludas 1, 46°03’ N,019°49’ E for Ludas 2, 46°05’ N, 019°45’ E for Palic and 45°50’ N, 019°38’ E for Zobnatica Lake. The North
latitudes and East longitudes were the same in June and October. Palic and Ludas lakes are protected areas.
Palic Lake is proclaimed as a protected area and a Park 892 Pamer, E. et al. of Nature, while Ludas Lake is a special natural preserve and, since 1977, designated as a swamp area of international significance by the Ramsar Convention.
Lake water samples were collected at depth of 1.5 m.The samples were kept and transported to the laboratory in cooled containers and analysed within 24h. For determination of total bacerial count (TBC) water samples were fixed with formaldehyde (2% final concentration) after the sampling. The basic parameters of water quality oxygen, temperature, electrical conductivity and pH were determed using oxymeter and conductivity meter (Hanna HI-9142 and HI-933000,
Hanna Instruments, USA), as well as pH meter (WTW InoLab-4, Germany). The total suspended solids (TSS),
chemical oxygen demand (COD), biochemical oxygen demand (BOD), total oraganic carbon (TOC) and surfactante (SUR) were measured at sampling site after the sampling using multiparameter PASTEL-UV Portable Analyzer “SECOMAM” (Nova Analytics Corporation, USA). Total nitrogen (TN), nitrate (NO3-),total and inorganic phosphorus (Ptot, PO43-) were
measured in laboratory within 24h. TN was determined according to the method of Kjeldahl in unfiltered
samples (CNR-IRSA, 1994). NO3" was determined spectrophotometrically in filtered samples according to Cataldo (Cataldo et al., 1975). Ammonia was determined by treating the lakewater samples in an alkaline citrate medium with sodium hypochlorite and phenol in the presence of sodium nitroprusside that acted as a catalyser (APHA, 1992). The blue indophenol colour formed with ammonia was measured spectrophotometrically at 640nm. Ptot was determined
by antimony method in unfiltered samples (Genchi,1990) as well as PO4 3- in filtered samples, using the same method. Organic phosphorus (Porg) was calculated by Porg = Ptot - PO4 3-. For this analysis the spectrophotometer Jenway 6505 UV/Vis, UK was used. In all samples, counts of aerobic heterotrophic bacteria, fecal and total coliforms were determined on solid media using the spread plate method. The aerobic heterotrophic bacteria (HPC) were grown on Nutrient
agar (Torlak, Serbia) using R2A medium (Merck, Germany). The media were incubated at 26oC for 5-7
days. Total and fecal coliforms were counted on Chromocult Coliform Agar (Merck, Germany) after 48 hours of incubation at 37oC. The waters were classified according to Kohl (1975) on the basis of HPC while coliforms were used for classifying water classification was according to Kavka et al. (2006). Bacterial counts in samples were determined by epifluorescence
microscopy according to Raymond et al. (1994). Sample aliquots were filtered under vacuum onto Sudan Black
prestained 0.2 μm pore size Nuclepore polycarbonate membrane filter with cellulose-acetate supporter filter.TBC was enumerated by direct counting of acridine orange stained cells (0.01% w:v, 5 min) using Olympus
CX41 epifluorescent microscope with coresponding filter. The bacterial cells were counted on at least 10
fields. The cell count was averaged and the results were expressed per milliliter of water samples.
Extracellular enzyme activities were determined in triplicate samples using fluorogenic model substrate 4 methylumbelliferone (MUF) according to Hoppe (Hoppe, 1983). Appropriate MUF-supstrates were
added to final concentrations: 500 μmol/L MUFglucose, 250 μmol/L for MUF-phosphate and 100 μmol/
L MUF-acetat, according to determined enzyme activities: β-D-glucosidase, alkaline phosphatase and
acetate esterase. The reaction mixtures were incubated for 8 hours in dark at room temperature. The reaction
was interrupted by boiling for 5 min. The pH of mixtures was adjusted to 10.5 by adding 10:1 of ammonium
glycine buffer (0.1 M) before fluorescence measurement. The fluorescence of 4-MUF, hydrolysed
from the model substrates was measured, using 96- well microtiter plate and automated microtiter plate
fluorometer (Fluoroscan Ascent FL, USA) with exitation and emission filters of 355 and 460 nm. Its quantity
determined fluorometrically indicated the level of extracellular enzyme activity in the sample. Standard
curve was constructed using an appropriate range of known concentrations. The enzyme activities were
expressed as total activity (nmol/h/dm3) and as specific enzyme activities, calculated per bacterial cell (amol/h/cell).
The correlation coefficients (r) and the statistical significance of the relationships (p-values) were calculated using Statistica 9.1 (StatSoft, USA). The data were analysed using two-way analyses of variance
(ANOVA) followed by Tukey’s HSD test (Hinkle, 1994).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างน้ำถูกนำมาจากทะเลสาบสี่ของจังหวัดของ Vojvodina (ภาคเหนือของประเทศเซอร์เบีย): provala ทะเลสาบ Ludas ทะเลสาบ (สองเว็บไซต์สุ่มตัวอย่าง) zobnatica และ Palic ทะเลสาบเมื่อวันที่ 1 มิถุนายนและ 1 ตุลาคม 2008 สถานที่และพิกัดของเว็บไซต์ตัวอย่างที่แสดงในภาพ 1 พิกัดทางภูมิศาสตร์คือ: 45 ° 24 'N, 019 ° 05' E สำหรับ provala, 46 ° 06 'N, 019 ° 49' E สำหรับ Ludas 1, 46 ° 03 'N, 019 ° 49' E สำหรับ Ludas 246 ° 05 'N, 019 ° 45' e สำหรับ Palic และ 45 ° 50 'N, 019 ° 38' E สำหรับ zobnatica ทะเลสาบ เหนือละติจูด
ลองจิจูดและตะวันออกได้เหมือนกันในเดือนมิถุนายนและตุลาคม Palic และทะเลสาบ Ludas มีการป้องกันพื้นที่.
Palic ทะเลสาบประกาศเป็นพื้นที่คุ้มครองและสวน 892 Pamer, e เอตอัล ของธรรมชาติในขณะ Ludas ทะเลสาบรักษาธรรมชาติพิเศษและตั้งแต่ปี 1977กำหนดให้เป็นพื้นที่หนองน้ำที่มีความสำคัญระหว่างประเทศตามอนุสัญญาแรมซาร์.
ทะเลสาบเก็บตัวอย่างน้ำที่ระดับความลึก 1.5 ตัวอย่าง m.the ถูกเก็บและเคลื่อนย้ายไปยังห้องปฏิบัติการในภาชนะที่ระบายความร้อนและวิเคราะห์ภายใน 24 ชั่วโมง สำหรับการกำหนดจากทั้งหมด bacerial นับ (TBC) ตัวอย่างน้ำด้วยฟอร์มาล​​ดีไฮด์ (2% ความเข้มข้นสุดท้าย) หลังจากการสุ่มตัวอย่างพารามิเตอร์พื้นฐานของออกซิเจนคุณภาพน้ำอุณหภูมิการนำไฟฟ้าและค่า pH ถูก determed ใช้ oxymeter และมิเตอร์ไฟฟ้า (ฮันนา hi-9142 และ Hi-933000,
hanna เครื่องมือ USA) วัด pH เช่นเดียวกับ (WTW inolab-4, เยอรมนี ) สารแขวนลอยทั้งหมด (TSS)
(Chemical Oxygen Demand ปลา), ความต้องการออกซิเจนทางชีวเคมี (BOD)oraganic คาร์บอนทั้งหมด (TOC) และ surfactante (sur) เป็นวัดที่เก็บตัวอย่างหลังจากการสุ่มตัวอย่างโดยใช้ Multiparameter พาสเทลยูวีวิเคราะห์แบบพกพา "secomam" (โนวาวิเคราะห์ บริษัท , USA) ไนโตรเจนทั้งหมด (TN), ไนเตรต (NO3-), ฟอสฟอรัสรวมและนินทรีย์ (ptot, po43)
เป็นวัดในห้องปฏิบัติการภายใน 24 ชั่วโมง เทนเนสซีถูกกำหนดตามวิธีของ Kjeldahl ในการกลั่นกรอง
ตัวอย่าง (cnr-irsa, 1994) NO3 "ถูกกำหนดในตัวอย่าง spectrophotometrically กรองตาม Cataldo (Cataldo, et al., 1975). แอมโมเนียถูกกำหนดโดยการรักษาตัวอย่าง lakewater ในสื่อซิเตรตอัลคาไลน์ที่มีโซเดียมไฮโปคลอไรต์และฟีนอลในการปรากฏตัวของ nitroprusside โซเดียมที่ทำหน้าที่เป็น catalyser ( apha, 1992)สีฟ้า indophenol เกิดขึ้นกับแอมโมเนียถูกวัด spectrophotometrically ที่ 640nm ptot ถูกกำหนดโดยวิธี
พลวงในตัวอย่างที่ยังไม่ได้กรอง (genchi, 1990) เช่นเดียวกับ PO4 3 - in ตัวอย่างที่ผ่านการกรองโดยใช้วิธีการเดียวกัน ฟอสฟอรัสอินทรีย์ (porg) ที่คำนวณได้จาก porg = ptot - PO4 3 - สำหรับการวิเคราะห์นี้ Spectrophotometer jenway 6505 UV / Vis, UK ถูกนำมาใช้ ในทุกตัวอย่างจำนวนของเชื้อแบคทีเรีย heterotrophic แอโรบิก, อุจจาระและโคลิฟอร์มทั้งหมดถูกนำมาพิจารณาในสื่อที่เป็นของแข็งโดยใช้วิธีการแพร่กระจายแผ่น แบคทีเรีย heterotrophic แอโรบิก (HPC) มีปลูกในอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหาร
(torlak, เซอร์เบีย) โดยใช้ R2A กลาง (เมอร์ค, เยอรมนี) สื่อที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 26oc วัน
5-7 โคลิฟอร์มทั้งหมดและอุจจาระถูกนับวุ้น chromocult โคลิฟอร์ม (เมอร์ค,เยอรมนี) 48 ชั่วโมงหลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 37oc น้ำที่ได้รับการจำแนกตาม Kohl (1975) บนพื้นฐานของ HPC ในขณะที่โคลิฟอร์มที่ใช้สำหรับการจัดหมวดหมู่แบ่งน้ำตาม kavka et al, (2006) ปริมาณแบคทีเรียในตัวอย่างที่ได้รับการพิจารณาโดยการใช้กล้องจุลทรรศน์
epifluorescence ตามที่เรย์มอน​​ด์ et al, (1994) aliquots ตัวอย่างถูกกรองภายใต้สูญญากาศไปยังซูดานสีดำ
prestained ไมโครเมตรขนาด 0.2 nuclepore รูขุมขนโพลีคาร์บอเนตที่มีเยื่อกรองเซลลูโลสอะซิเตท-ลูกน้อง filter.tbc ถูกแจกแจงโดยการนับจำนวนโดยตรงของ acridine เซลล์สีส้ม (0.01% w: V, 5 นาที) โดยใช้ OLYMPUS
cx41 กล้องจุลทรรศน์ epifluorescent กับ coresponding ตัวกรอง เซลล์แบคทีเรียถูกนับอย่างน้อย 10 สาขา
นับเซลล์ที่ได้รับการเฉลี่ยและผลที่ได้สามารถแสดงออกต่อมิลลิลิตรของตัวอย่างน้ำ.
เอนไซม์ extracellular ถูกดำเนินการในตัวอย่างเพิ่มขึ้นสามเท่าโดยใช้สารตั้งต้นแบบ fluorogenic 4 methylumbelliferone (MUF) ตาม Hoppe (hoppe, 1983) ที่เหมาะสม MUF-supstrates ถูก
เพิ่มความเข้มข้นสุดท้าย: 500 ไมโครโมล / ลิตร mufglucose, 250 ไมโครโมล / ลิตรสำหรับ MUF ฟอสเฟตและ 100 ไมโครโมล /
l MUF-Acetat ตามที่กำหนดกิจกรรมเอนไซม์β-D-glucosidase alkaline phosphatase มีน้ำนมและ esterase
ผสมปฏิกิริยาถูกบ่มเป็นเวลา 8 ชั่วโมงในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง
ปฏิกิริยาถูกขัดจังหวะด้วยเดือดเป็นเวลา 5 นาที ค่าพีเอชของผสมมีการปรับถึง 10.5 โดยการเพิ่มของแอมโมเนีย 10:01
glycine บัฟเฟอร์ (0.1 เมตร) ก่อนที่จะวัดเรืองแสง เรืองแสงจาก 4-MUF,
ย่อยจากพื้นผิวแบบถูกวัดโดยใช้ 96 - แผ่นไมโครดีและแผ่นไมโครอัตโนมัติ fluorometer
(fluoroscan ขึ้น FL, USA) กับตัวกรอง exitation และปล่อยก๊าซเรือนกระจกจาก 355 และ 460 นาโนเมตร
ปริมาณที่กำหนด fluorometrically ชี้ให้เห็นระดับของการทำงานของเอนไซม์ในสารตัวอย่าง มาตรฐาน
เส้นโค้งที่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้ช่วงที่เหมาะสมของความเข้มข้นที่รู้จักกัน เอนไซม์ถูก
แสดงเป็นกิจกรรมทั้งหมด (nmol/h/dm3) และเป็นเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงคำนวณต่อเซลล์แบคทีเรีย (Amol / h / มือถือ).
ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ (R) และนัยสำคัญทางสถิติของความสัมพันธ์ทางสถิติ (p ค่า) มีการคำนวณโดยใช้ STATISTICA 9.1 (statsoft, USA)ข้อมูลที่ถูกวิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์แบบสองทางของความแปรปรวน
(ANOVA) ตามด้วยการทดสอบ Tukey HSD ของ (ฮิงเกิ้ล, 1994)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างน้ำที่ได้มาจากทะเลสาบสี่ของวอยวอดีจังหวัดของนา (ภาคเหนือเซอร์เบีย): เล Provala เล Ludas (สองสุ่มไซต์), Zobnatica และทะเลสาบ Palic บน 1 มิถุนายน 1 ตุลาคม 2008 ตั้งและพิกัดของไซต์จะแสดงใน Fig. 1 มีพิกัดภูมิศาสตร์: 45 ° 24' N, 019 ° 05' E สำหรับ Provala, 46 ° 06' N, 019 ° 49' E Ludas 1, 46 ° 03' N, 019 ° 49' E Ludas 2 46 ° 05' N, 019 ° 45' E สำหรับ Palic และ 45 ° 50' N, 019 ° 38' E สำหรับเล Zobnatica เหนือ
latitudes และ longitudes ตะวันออกเดียวกันในเดือนมิถุนายนและตุลาคม ทะเลสาบ Palic และ Ludas ได้มีการป้องกันพื้นที่
เล Palic ถูกประกาศเป็นเขตพื้นที่คุ้มครองและการสวน 892 Pamer, E. et al. ธรรมชาติ เล Ludas เป็น การรักษาธรรมชาติพิเศษ และ ตั้งแต่ปี 2520 กำหนดเป็นพื้นที่พรุของประเทศสำคัญโดย Ramsar ประชุม.
ตัวอย่างน้ำทะเลถูกรวบรวมที่ลึก 1.5 m.The ตัวอย่างถูกเก็บ และขนส่งไปห้องปฏิบัติการในภาชนะเย็น ๆ และ analysed ภายใน 24 ชม สำหรับการกำหนด bacerial รวม ตัวอย่างน้ำจำนวน (TBC) ถูกจัดคงกับฟอร์มาลดีไฮด์ (2% ความเข้มข้นสุดท้าย) หลังจากการสุ่มตัวอย่าง พารามิเตอร์พื้นฐานของออกซิเจนคุณภาพน้ำ อุณหภูมิ ค่าการนำไฟฟ้า และค่า pH ได้ determed ใช้วัด oxymeter และนำ (Hanna HI-9142 และ HI-933000,
เครื่อง Hanna, USA), และวัดค่า pH (WTW InoLab-4 เยอรมนี) ของแข็ง (TSS), หยุดชั่วคราวรวม
อุปสงค์เคมีออกซิเจน (COD), biochemical ความต้องการออกซิเจน (BOD), คาร์บอนรวม oraganic (TOC) และ surfactante (เซอ) ถูกวัดที่สุ่มตัวอย่างหลังจากสุ่มตัวอย่างใช้ multiparameter UV ดินสอสีพกพาวิเคราะห์ "SECOMAM" (โนวาวิเคราะห์ Corporation, USA) รวมไนโตรเจน (TN), ไนเตรต (NO3-), ถูกรวม และอนินทรีย์ฟอสฟอรัส (Ptot, PO43-)
วัดในห้องปฏิบัติการภายใน 24 ชม กำหนดตามวิธีการของ Kjeldahl ในไม่ถูกกรอง TN
ตัวอย่าง (โรงแรมซีเอ็นอาร์-IRSA, 1994) NO3 "กำหนด spectrophotometrically ในตัวอย่างถูกกรองตาม Cataldo (Cataldo et al., 1975) แอมโมเนียถูกกำหนด โดยการรักษาตัวอย่าง lakewater ในการซิเตรตด่างกับผงฟอกขาวและวางในต่อหน้าของ nitroprusside โซเดียมที่ดำเนินเป็น catalyser (อาภา 1992) สีบลู indophenol กับแอมโมเนียถูกวัด spectrophotometrically ที่ 640nm กำหนด Ptot
ยังไม่ได้ โดยวิธีพลวงในกรองตัวอย่าง(เท็นชูกา 1990) และ PO4 3 - ในตัวอย่างกรอง ใช้วิธีการเดียวกัน อินทรีย์ฟอสฟอรัส (Porg) ถูกคำนวณ โดย Porg = Ptot - PO4 3- การวิเคราะห์นี้เครื่องทดสอบกรดด่าง Jenway 6505 UV/Vis, UK ถูกใช้ ในตัวอย่างทั้งหมด การตรวจนับแบคทีเรีย heterotrophic แอโรบิก กำจัด fecal และรวมถูกกำหนดบนสื่อที่ใช้วิธีกระจายจานทึบ แบคทีเรีย heterotrophic แอโรบิก (HPC) ได้เติบโตบนอาหาร
agar (Torlak เซอร์เบีย) ใช้สื่อ R2A (เมอร์ค เยอรมนี) สื่อถูก incubated ที่ 26oC สำหรับ 5-7
วัน นับรวม และ fecal กำจัดได้ใน Chromocult Agar โคลิฟอร์ม (เมอร์ค เยอรมนี) หลังจาก 48 ชั่วโมงหลังจากบ่มที่ 37oC น้ำถูกแบ่งตามโครงการ (1975) โดย HPC ในขณะที่ใช้กำจัดสำหรับประเภทน้ำ ประเภทถูกตามการ Kavka et al. (2006) การตรวจนับแบคทีเรียในตัวอย่างได้ถูกกำหนด โดย epifluorescence
microscopy ตามเรย์มอนด์และ al. (1994) อย่าง aliquots ถูกกรองภายใต้สุญญากาศไปซูดานดำ
prestained 0.2 μm รูขุมขนขนาด Nuclepore โพลีคาร์บอเนตเมมเบรนกรองกับตัวกรองเซลลูโลส acetate ผู้สนับสนุนTBC ถูกระบุ โดยตรงนับเซลล์ acridine สีส้ม (0.01% w:v, 5 นาที) ใช้โอลิมปัส
CX41 epifluorescent กล้องจุลทรรศน์กับตัวกรอง coresponding เซลล์แบคทีเรียที่นับได้น้อย 10
เขตข้อมูล การนับจำนวนเซลล์ที่ averaged และผลลัพธ์ถูกแสดงสำหรับแต่ละ milliliter ของน้ำตัวอย่าง
Extracellular เอนไซม์กิจกรรมถูกกำหนดในตัวอย่าง triplicate ที่ใช้ methylumbelliferone พื้นผิว 4 รุ่น fluorogenic (MUF) ตาม Hoppe (Hoppe, 1983) MUF supstrates ที่เหมาะสมถูก
เพิ่มความเข้มข้นสุดท้าย: μmol 500 L MUFglucose, μmol 250 L MUF ฟอสเฟตและ 100 μmol /
L MUF-acetat ตามกิจกรรมของเอนไซม์กำหนด: β-D-glucosidase อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส และ
acetate esterase น้ำยาผสมปฏิกิริยาถูก incubated สำหรับ 8 ชั่วโมงในความมืดที่อุณหภูมิห้อง ปฏิกิริยา
ถูกขัดจังหวะ โดยการต้มใน 5 นาที ค่า pH ของส่วนผสมถูกปรับ 10.5 โดยเพิ่ม 10:1 ของแอมโมเนีย
glycine บัฟเฟอร์ (0.1 M) ก่อนวัด fluorescence Fluorescence ของ 4 MUF hydrolysed
จากพื้นผิวของแบบจำลองถูก วัด ใช้แผ่นดี 96 microtiter และอัตโนมัติแผ่น microtiter
fluorometer (Fluoroscan โรงแรมแอสเซ็นต์ FL สหรัฐอเมริกา) ตัวกรอง exitation และมลพิษของ 355 และ 460 nm ปริมาณของ
กำหนด fluorometrically ระบุระดับของ extracellular เอนไซม์ในตัวอย่าง มาตรฐาน
เส้นโค้งถูกสร้างโดยใช้ช่วงเหมาะสมของความเข้มข้นที่รู้จัก มีกิจกรรมของเอนไซม์
แสดงกิจกรรมทั้งหมด (nmol/h/dm3) และ เป็นเอนไซม์เฉพาะ กิจกรรม คำนวณต่อเซลล์แบคทีเรีย (amol/h/cell).
The สัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ (r) และนัยสำคัญทางสถิติของความสัมพันธ์ (ค่า p) ถูกคำนวณโดยใช้ Statistica 9.1 (StatSoft สหรัฐอเมริกา) ข้อมูลได้ analysed ใช้วิเคราะห์สองของ variance
(ANOVA) ตามการทดสอบของ Tukey HSD (ฮินเคิล 1994)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่างน้ำมาจากสี่ทะเลสาบของจังหวัดที่เห็น Vojvodina (เซอร์เบียทางด้านทิศเหนือ) provala Lake ludas Lake (สองสถานที่การสุ่มตัวอย่าง) zobnatica และทะเลสาบ palic บนวันที่ 1 มิถุนายนและวันที่ 1 ตุลาคม 2008 ค่าพิกัดและที่ตั้งของสถานที่การสุ่มตัวอย่างแสดงอยู่ในรูปที่ 1 . ค่าพิกัดทาง ภูมิศาสตร์ ที่มี 45 ° C 24 ' n 019 ° 05 ' e สำหรับ provala 46 ° C 06 ' n 019 ° 49 ' e สำหรับ ludas 146 ° C 03 ' n, 019 ° 49 ' e สำหรับ ludas 246 ° C 05 ' n 019 ° 45 ' e สำหรับ palic และ 45 ° 50 ' n 019 ° 38 ' e สำหรับ zobnatica Lake . ทางด้านทิศเหนือ
แถบใกล้เส้นศูนย์สูตรและ longitudes ด้านทิศตะวันออกเป็นคนเดียวกันในเดือนมิถุนายนและตุลาคม palic ludas ทะเลสาบและจะได้รับการป้องกันพื้นที่.
palic Lake คือประกาศเป็นพื้นที่ที่ได้รับการป้องกันและที่จอดที่ 892 pamer e . et al .ของธรรมชาติในขณะที่ ludas Lake คือรักษาธรรมชาติที่พิเศษและนับตั้งแต่ปี 1977กำหนดให้เป็นพื้นที่หนองน้ำที่มีความสำคัญระหว่างประเทศโดย ramsar Convention .ตัวอย่างน้ำ
Lake ที่ได้จากการเก็บข้อมูลที่ความลึก 1.5 เมตร.ตัวอย่างที่มีการดูแลรักษาและส่งไปยังห้องทดลองใน ภาชนะ ทำความเย็นและวิเคราะห์ ภายใน 24 ชั่วโมง สำหรับการกำหนดจำนวน bacerial รวม(ที่อยู่ tbc )ตัวอย่างน้ำเป็นแบบคงที่พร้อมด้วยฟอร์มาลดีไฮด์( 2% การรวมกลุ่มครั้งสุดท้าย)หลังจากการสุ่มตัวอย่างที่ตัวแปรขั้นพื้นฐานของค่า pH และการนำไฟฟ้า อุณหภูมิ ออกซิเจน คุณภาพ ของน้ำโดยใช้มาตรวัดเป็น determed oxymeter และนำกระแสไฟฟ้า( Hanna Hi -9142 และตราสาร
Hanna Hi -933000 USA )และมิเตอร์ PH ( wtw inolab 4 เยอรมัน) ยอดรวมที่แขวนลอย( TSS )
สารเคมีความต้องการออกซิเจน( COD )ออกซิเจนทางชีวเคมีตามต้องการ(ก่อนปล่อย)ยอดรวม oraganic ผงถ่านกัมมันต์(บริษัทไทยโอเลฟินส์จำกัด)และ surfactante ( sur )เป็นวัดที่เว็บไซต์การสุ่มตัวอย่างหลังจากการสุ่มตัวอย่างโดยใช้ multiparameter สีอ่อน UV แบบพกพาตัววิเคราะห์ความสมบูรณ์" secomam "( Corporation USA Today Nova วิเคราะห์) ปริมาณไนโตรเจนทั้งหมด( TN )ดินประสิว(ไม่มี 3 - )ฟอสฟอรัสทั้งหมดและไม่มีกาย( ptot PO 43 - )เป็น
วัดค่าในห้องปฏิบัติการโดย ภายใน 24 ชั่วโมง TN ตั้งใจไว้แล้วว่าตามวิธีการของ kjeldahl
ตามมาตรฐานในแบบไหลปกติโดยยังไม่ได้กรองตัวอย่าง( cnr - irsa 1994 ) ไม่มี 3 "จึงตัดสินใจ spectrophotometrically ในตัวอย่างที่กรองตาม cataldo ( cataldo et al .. 1975 ) แอมโมเนียเป็นกำหนดโดยปฏิบัติต่อตัวอย่าง lakewater ในขนาดกลาง citrate อัลคาไลน์ที่มีโซเดียมไฮโปคลอไรด์และฟีนอลในการมีอยู่ของ nitroprusside โซเดียมที่ทำหน้าที่เป็น catalyzer ( apha 1992 )สี indophenol สีฟ้าจะมีสารแอมโมเนีย spectrophotometrically วัดได้ที่ 640 นิวตันเมตร ptot ตั้งใจไว้แล้วว่า
ซึ่งจะช่วยโดยใช้วิธีการแร่พลวงในตัวอย่างแบบไหลปกติโดยยังไม่ได้กรอง( genchi, 1990 )และ PO 43 - ในตัวอย่างที่กรองแล้วโดยใช้วิธีการเดียวกันนี้ ฟอสฟอรัสอินทรีย์( porg )จะคำนวณโดย ptot porg = - PO 43 - สำหรับใช้ในการวิเคราะห์นี้ jenway 6505 UV /เผชิญหน้ากันที่ประเทศอังกฤษได้ถูกใช้ ในตัวอย่างทั้งหมดนับถอยหลังของแบคทีเรีย heterotrophic coliforms อุจจาระและแอโรบิกรวมทั้งกำหนดบนแท็บสื่อโดยใช้วิธีแผ่นกระจายตัวอยู่โดยรอบได้ แบคทีเรีย heterotrophic แอโรบิก( HPC )ได้เติบโตในสารอาหาร
สาหร่ายทะเล( torlak เซอร์เบีย)โดยใช้ R 2 ขนาดกลาง( merck เยอรมัน) สื่อที่เป็น incubated ที่ 26 oC สำหรับ 5-7 5-7 5-7
วัน coliforms รวมและอุจจาระนับบน chromocult coliform สาหร่ายทะเล( merckเยอรมัน)หลังจากผ่านไป 48 ชั่วโมงของผู้ประกอบการที่ 37 oC . ผืนน้ำที่ได้รับการจำแนกให้เป็นตาม Kohl (. 1975 )บนพื้นฐานของ High Performance Computing - HPC ในขณะที่ coliforms ได้ถูกนำมาใช้เพื่อจำแนกตามการแบ่ง ประเภท น้ำเพื่อ kavka et al . ( 2006 ) นับถอยหลังฆ่าเชื้อแบคทีเรียในตัวอย่างก็ถูกกำหนดโดย epifluorescence
การตรวจวิเคราะห์สารเคมีตามไปยัง Raymond James et al . ( 1994 ) aliquots ลิ้มลองได้ที่กรองในเครื่องดูดฝุ่นลงบนซูดานสีดำ
ตามมาตรฐานprestained 0.2 μ m รูขนาด nuclepore โพลีคาร์บอเนตเยื่อแผ่นกรองด้วยเซลลูโลสมีสารอะซีเตทผู้สนับสนุนแผ่นกรอง.ที่อยู่ tbc ก็ระบุไว้โดยตรงการนับของ acridine สีส้มสีเซลล์( 0.01% W : V , 5 นาที)โดยใช้ Olympus
CX 41 epifluorescent กล้องจุลทรรศน์ด้วย coresponding แผ่นกรอง เซลล์แบคทีเรียนับในที่อย่างน้อย 10
ฟิลด์นับจำนวนเซลล์ที่ได้เฉลี่ยและผลที่ได้แสดงออกถึงต่อ milliliter ของตัวอย่างน้ำ.กิจกรรมเอนไซม์
extracellular มีกำหนดในตัวอย่างเป็นสามโดยใช้ fluorogenic ยึดไดย์กับรุ่น 4 methylumbelliferone ( muf )ตาม hoppe ( hoppe 1983 ) ที่เหมาะสม muf - supstrates มี
ซึ่งจะช่วยเพิ่มความเข้มข้นในรอบสุดท้าย 500 mufglucose / L μmol 250 μmol / L สำหรับ muf - และฟอสเฟต 100 μmol /
L muf - acetat ตามกิจกรรมเอนไซม์กำหนดเฉพาะ - D - glucosidase phosphatase อัลคาไลน์และ
เช่นอะคีเทต esterase . ส่วนผสมปฏิกริยาที่เป็น incubated สำหรับ 8 ชั่วโมงในสีเข้มที่ อุณหภูมิ ห้อง ปฏิกริยาที่
ถูกขัดจังหวะด้วยการต้มเป็นเวลา 5 นาทีการวัดค่า pH ของส่วนผสมมีการปรับถึง 10.5 โดยการเพิ่ม 10 : 1 ของบัฟเฟอร์ its ammonium
ถั่วเหลือง( 0.1 ม.)ก่อนคุณสมบัติฟลูเรซ - เซ็นซ คุณสมบัติฟลูเรซ - เซ็นซ 4 - mufhydrolysed
จาก substrates รุ่นวัดได้โดยใช้ 96 - microtiter แผ่นและแผ่นความร้อนโดยอัตโนมัติ microtiter
fluorometer ( fluoroscan สงครามเย็น FL USA )พร้อมด้วยแผ่นกรองก๊าซและ exitation ของ 355 และ 460 นิวตันเมตร จำนวนของ
กำหนด fluorometrically ระบุระดับของการทำงานของเอนไซม์ extracellular ในตัวอย่าง มาตรฐาน
ตามมาตรฐานปรับตามความโค้งมนได้ถูกสร้างขึ้นโดยใช้ความหลากหลายที่เหมาะสมของความเข้มข้นที่รู้จักกันดี เอนไซม์ที่มีกิจกรรม
ซึ่งจะช่วยแสดงความเป็นยอดรวมกิจกรรม( nmol / H / DM 3 )และเป็นเฉพาะเอนไซม์การคำนวณต่อเชื้อแบคทีเรียเซลล์( amol / H /เซลล์). N ที่ความสัมพันธ์ coefficients ( R )และข้อมูลทางสถิติความสำคัญในความสัมพันธ์( P - ค่า)คำนวณโดยใช้ statistica 9.1 ( statsoft , USA )ข้อมูลที่ถูกนำมาวิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์แบบสองทางของความแตกต่าง
( anova )ตามด้วย hsd ทดสอบของ tukey ( hinkle 1994 )