Amplification of Ssr Markers: Eight

Amplification of Ssr Markers: Eighty six SSR primers
were used for preliminary amplification of isolated DNA.
The amplification reactions were conducted following the
protocol proposed by Williams et al. [13] with a final
volume of 10 μl containing: 1.0 μl of DNA (10ng/μl); 1.0 μl
10x PCR buffer containing 15 mM MgCL2 (Promega), 0.8
μl of dNTPs (2.5 mM each), 0.2 μl of TaqDNA polymerase
(Promega; 5 u/μl), 2.0 μl of the forward and reverse
primer (1 μM each) and 5.0 μl of distilled water.
The amplifications of the primers were carried out in a
BIORAD-MyCycler-thermocycler with the following
amplification conditions: a denaturing step at 95°C for
3min.; followed by 40 cycles, each one consisting of

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ขยายเครื่องหมาย Ssr: หกเอ้ SSR ไพรเมอร์ใช้สำหรับขยายเบื้องต้นของดีเอ็นเอที่แยกปฏิกิริยาขยายได้ดำเนินการตามนำเสนอโดยวิลเลียมส์ et al. [13] ด้วยสุดท้ายเป็นโพรโทคอลปริมาตรบรรจุ μl 10: μl 1.0 ของดีเอ็นเอ (10ng/μl); 1.0 μl10 x 15 มม. MgCL2 ประกอบด้วยบัฟเฟอร์ PCR (Promega), 0.8Μl ของ dNTPs (2.5 mM แต่ละ) μl 0.2 ของ TaqDNA พอลิเมอเรส(Promega; 5 u μl), 2.0 μl ไปข้างหน้า และย้อนกลับสีรองพื้น (1 μM ละ) และ μl 5.0 ของน้ำกลั่นAmplifications ของไพรเมอร์ที่ได้ดำเนินการBIORAD-MyCycler-thermocycler กับต่อไปนี้ขยายเงื่อนไข: denaturing เป็นขั้นตอนที่ 95° C สำหรับ3 นาที ตามรอบ 40 แต่ละคนประกอบด้วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การขยายของ Ssr Markers: แปดสิบหกไพร SSR
ถูกนำมาใช้สำหรับการขยายเบื้องต้นของดีเอ็นเอที่แยก.
ปฏิกิริยาการขยายกำลังดำเนินการดังต่อไปนี้
โปรโตคอลที่เสนอโดยวิลเลียมส์และคณะ [13] ด้วยสุดท้าย
ปริมาณ 10 ไมโครลิตรที่มี: 1.0 ไมโครลิตรของดีเอ็นเอ (10ng / ไมโครลิตร); 1.0 ไมโครลิตร
10x บัฟเฟอร์ PCR ที่มี 15 มิลลิ MgCl2 (Promega) 0.8
ไมโครลิตรของ dNTPs (2.5 มิลลิแต่ละ), 0.2 ไมโครลิตรของโพลิเมอร์ TaqDNA
(Promega; 5 ท่าน / ไมโครลิตร) 2.0 ไมโครลิตรของไปข้างหน้าและย้อนกลับ
ไพร (1 ไมโครโมแต่ละคน) . และ 5.0 ไมโครลิตรของน้ำกลั่น
เครื่องขยายเสียงของไพรเมอร์ได้ดำเนินการใน
Biorad-MyCycler-เครื่อง thermocycler ดังต่อไปนี้
เงื่อนไขขยาย: ขั้นตอน denaturing ที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
3 นาที .; ตามด้วย 40 รอบแต่ละคนซึ่งประกอบด้วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเพิ่มเครื่องหมาย SSR : แปดสิบหก SSR ไพรเมอร์
ถูกใช้เบื้องต้นแบบแยก DNA amplification
ปฏิกิริยาการทดลองต่อไปนี้
โปรโตคอลเสนอโดยวิลเลียม et al . [ 13 ] กับเล่มสุดท้าย
10 μผมประกอบด้วย : 1.0 μ L ของดีเอ็นเอ ( 10ng / μ L ) ; 1.0 μ L
10x PCR buffer ที่มีไอโซโทป 15 มม. ( promega )
μ 0.8 ลิตร dntps ( 2.5 มม. แต่ละ ) , 0.2 μ l
taqdna เมอเรส( promega ; 5 U / μ L ) , 2.0 ลิตรμไปข้างหน้าและย้อนกลับ
รองพื้น ( 1 μ M แต่ละ ) และ 5.0 μผมน้ำกลั่น .
amplifications ของไพรเมอร์ พบว่าใน
biorad mycycler เทอร์มอไซเคล ์กับต่อไปนี้
( เงื่อนไข : ี่ขั้นตอนที่ 95 องศา C สำหรับ
3min ; ตามด้วย 40 รอบ แต่ละคนประกอบด้วย